膳食纖維的測(cè)定及RINTDF法的優(yōu)勢(shì)
當(dāng)前用于測(cè)量膳食纖維的分析方法
A. 總膳食纖維方法
B. 個(gè)體膳食纖維成分方法
C. 補(bǔ)充膳食纖維方法 - 較少使用
RINTDF方法（AOAC 2017.16和AOAC 2022.01）相較于綜合TDF方法（AOAC 2009.01）的優(yōu)勢(shì)
為了克服集成TDF方法報(bào)告的所有局限性，調(diào)整后創(chuàng)建了RINTDF方法。RINTDF在2016年接受了實(shí)驗(yàn)室間評(píng)估，并在2018年被接受為AOAC方法2017.16，在2022年被接受為AOAC方法2022.01。
較短的孵育時(shí)間：在整合的總膳食纖維（TDF）方法中，與胰α-淀粉酶（PAA）和淀粉葡萄糖苷酶（AMG）的孵育時(shí)間為16小時(shí)，與已發(fā)表的測(cè)量抗性淀粉（RS）的方法一致。然而，食物在小腸中的停留時(shí)間更可能是約4小時(shí)，這是在快速整合總膳食纖維（RINTDF）中使用的時(shí)間。為了獲得與AOAC方法2009.01在16小時(shí)內(nèi)對(duì)一系列對(duì)照淀粉/抗性淀粉的水解程度相同，RINTDF方法中PAA和AMG的水平需要大幅增加（PAA從2 KU/檢測(cè)增加到5 KU/檢測(cè)，AMG從0.14 KU/檢測(cè)增加到1.7 KU/檢測(cè)）。
避免RMD偽影：已有報(bào)告在使用整合TDF方法水解某些淀粉時(shí)會(huì)產(chǎn)生少量的抗性麥芽糊精。這些寡糖在分析方法中對(duì)進(jìn)一步水解具有抗性，但容易被小腸粘膜的α-葡萄糖苷酶復(fù)合體水解——因此它們是由分析方法產(chǎn)生的偽影，不應(yīng)包括在膳食纖維（DF）中。在RINTDF采用的修訂孵育條件下，水解淀粉時(shí)不會(huì)形成有問(wèn)題的抗性麥芽糊精。
提高RS4的準(zhǔn)確性：整合TDF方法的結(jié)果顯示對(duì)磷酸交聯(lián)淀粉（Resistance Starch 4，RS4）有些低估。雖然使用RINTDF獲得的結(jié)果與使用整合TDF方法獲得的結(jié)果非常相似，但對(duì)于某些磷酸交聯(lián)淀粉樣品（如Fibersym®）和天然高直鏈玉米淀粉（例如Hylon VII®），獲得了更高（更具生理相關(guān)性）的值。
提高FOS的準(zhǔn)確性：使用整合TDF方法時(shí)，當(dāng)使用所選的HPLC系統(tǒng)（Waters Sugar-Pak®柱）時(shí)，低聚果糖（FOS）也被低估，因?yàn)楣侨桥c二糖共洗脫，因此無(wú)法測(cè)量。為了實(shí)現(xiàn)果糖三糖（在FOS中）與二糖的完全分離，改用Tosoh Biosciences LLC的TSKgel G2500PWxL®凝膠滲透柱進(jìn)行HPLC（如Matsutani Chemical Company推薦的），而不是使用Waters Corporation的Sugar-Pak®柱。使用甘油作為內(nèi)標(biāo)物代替山梨醇，因?yàn)樵赥SKgel G2500PWxL®柱上，山梨醇與葡萄糖共洗脫。這導(dǎo)致需要從酶制劑中排除甘油，這已在快速整合總膳食纖維檢測(cè)試劑盒（K-RINTDF）中實(shí)現(xiàn)。
更安全的配方：K-INTDF在孵育緩沖液中使用了疊氮鈉以防止16小時(shí)孵育期間的微生物污染。鑒于疊氮鈉具有顯著的毒性，這是不可取的。由于RINTDF使用的孵育時(shí)間較短，孵育溶液的微生物感染不是問(wèn)題，這意味著可以從孵育緩沖液中排除疊氮鈉。
A. 總膳食纖維方法
| AOAC 方法 | 測(cè)量成分 | 貨號(hào) |
| 2022.01 | HMWDF和SDFS IDF、SDFP及SDFS | K-RINTDF |
| 2017.16 | HMWDF與SDFS IDF、SDFP和SDFS | K-RINTDF |
| 2009.01 | 所有食物中的HMWDF和SDFS | K-INTDF |
| 2011.25 | 所有食物中的IDF、SDFP和SDFS | K-INTDF |
| 985.29 | HMWDF | K-TDFR |
| 991.43 | IDF和SDFP分別 | K-TDFR |
B. 個(gè)體膳食纖維成分方法
| AOAC 方法 | 測(cè)量成分 | 貨號(hào) |
| 995.16 | 谷物、飼料和食品中的（1-3）（1-4）-β-葡聚糖 | K-BGLU |
| 997.08 | 果聚糖和低聚果糖（FOS） | K-FRUC |
| 999.03 | 果聚糖和低聚果糖（FOS） | K-FRUC |
| 2000.11 | 聚葡萄糖 | |
| 2001.22 | 反式低聚半乳糖（GOS） | |
| 2002.02 | 抗性淀粉（RS2 和 RS3） | K-RSTAR |
C. 補(bǔ)充膳食纖維方法 - 較少使用
| AOAC 方法 | 測(cè)量成分 | 貨號(hào) |
| 991.42 | 食品中的IDF | K-TDFR |
| 993.19 | 食品中的SDFP | K-TDFR |
| 993.21 | 樣本中纖維含量大于10%且淀粉含量小于2%的總高分子量溶解性固體（HMWDF） | |
| 994.13 | HMWDF；提供糖組成和Klason木質(zhì)素 | |
| 2001.03 | 不含抗性淀粉的食物中的HMWDF和SDFS |
RINTDF方法（AOAC 2017.16和AOAC 2022.01）相較于綜合TDF方法（AOAC 2009.01）的優(yōu)勢(shì)
為了克服集成TDF方法報(bào)告的所有局限性，調(diào)整后創(chuàng)建了RINTDF方法。RINTDF在2016年接受了實(shí)驗(yàn)室間評(píng)估，并在2018年被接受為AOAC方法2017.16，在2022年被接受為AOAC方法2022.01。
較短的孵育時(shí)間：在整合的總膳食纖維（TDF）方法中，與胰α-淀粉酶（PAA）和淀粉葡萄糖苷酶（AMG）的孵育時(shí)間為16小時(shí)，與已發(fā)表的測(cè)量抗性淀粉（RS）的方法一致。然而，食物在小腸中的停留時(shí)間更可能是約4小時(shí)，這是在快速整合總膳食纖維（RINTDF）中使用的時(shí)間。為了獲得與AOAC方法2009.01在16小時(shí)內(nèi)對(duì)一系列對(duì)照淀粉/抗性淀粉的水解程度相同，RINTDF方法中PAA和AMG的水平需要大幅增加（PAA從2 KU/檢測(cè)增加到5 KU/檢測(cè)，AMG從0.14 KU/檢測(cè)增加到1.7 KU/檢測(cè)）。
避免RMD偽影：已有報(bào)告在使用整合TDF方法水解某些淀粉時(shí)會(huì)產(chǎn)生少量的抗性麥芽糊精。這些寡糖在分析方法中對(duì)進(jìn)一步水解具有抗性，但容易被小腸粘膜的α-葡萄糖苷酶復(fù)合體水解——因此它們是由分析方法產(chǎn)生的偽影，不應(yīng)包括在膳食纖維（DF）中。在RINTDF采用的修訂孵育條件下，水解淀粉時(shí)不會(huì)形成有問(wèn)題的抗性麥芽糊精。
提高RS4的準(zhǔn)確性：整合TDF方法的結(jié)果顯示對(duì)磷酸交聯(lián)淀粉（Resistance Starch 4，RS4）有些低估。雖然使用RINTDF獲得的結(jié)果與使用整合TDF方法獲得的結(jié)果非常相似，但對(duì)于某些磷酸交聯(lián)淀粉樣品（如Fibersym®）和天然高直鏈玉米淀粉（例如Hylon VII®），獲得了更高（更具生理相關(guān)性）的值。
提高FOS的準(zhǔn)確性：使用整合TDF方法時(shí)，當(dāng)使用所選的HPLC系統(tǒng)（Waters Sugar-Pak®柱）時(shí)，低聚果糖（FOS）也被低估，因?yàn)楣侨桥c二糖共洗脫，因此無(wú)法測(cè)量。為了實(shí)現(xiàn)果糖三糖（在FOS中）與二糖的完全分離，改用Tosoh Biosciences LLC的TSKgel G2500PWxL®凝膠滲透柱進(jìn)行HPLC（如Matsutani Chemical Company推薦的），而不是使用Waters Corporation的Sugar-Pak®柱。使用甘油作為內(nèi)標(biāo)物代替山梨醇，因?yàn)樵赥SKgel G2500PWxL®柱上，山梨醇與葡萄糖共洗脫。這導(dǎo)致需要從酶制劑中排除甘油，這已在快速整合總膳食纖維檢測(cè)試劑盒（K-RINTDF）中實(shí)現(xiàn)。
更安全的配方：K-INTDF在孵育緩沖液中使用了疊氮鈉以防止16小時(shí)孵育期間的微生物污染。鑒于疊氮鈉具有顯著的毒性，這是不可取的。由于RINTDF使用的孵育時(shí)間較短，孵育溶液的微生物感染不是問(wèn)題，這意味著可以從孵育緩沖液中排除疊氮鈉。
標(biāo)簽：
膳食纖維測(cè)定
RINTDF法的優(yōu)勢(shì)
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