淀粉及其各組分檢測試劑盒選型指南
淀粉
檢測試劑盒，用于研究淀粉及其作用的酶
淀粉是人類飲食中碳水化合物的主要來源。它在植物中以儲存多糖的形式出現(xiàn)，在種子和塊莖中的含量非常高。淀粉對食品工業(yè)的重要性不言而喻，但對造紙、紡織、生物塑料和石油工業(yè)也很重要。淀粉由兩個組分亞群組成：
圖示：支鏈淀粉由線性的α-1,4-D-吡喃葡萄糖鏈組成，每24-30個殘基就有α-1,6分支點。
抗性淀粉是指對人類小腸中存在的酶具有抗水解作用的任何淀粉。Englyst等人（Englyst, H. N. Kingman, S. M. & Cummings, J. H. (1992). 歐洲臨床營養(yǎng)學(xué)雜志, 46 (補充2), S33-S50）定義了四種不同類型的抗性淀粉。
RS1：無法直接接觸到的淀粉，例如種子或豆類以及未加工的全谷物中的淀粉。
RS2：以天然顆粒形式存在的抗性淀粉，如生土豆、青香蕉粉和高直鏈玉米淀粉。
RS3：當(dāng)含淀粉食物烹飪并冷卻時形成的抗性淀粉，例如在豆類、面包、玉米片以及煮熟并冷藏的土豆、意大利面沙拉或壽司米飯中。這種處理導(dǎo)致淀粉老化——冷卻時直鏈淀粉和支鏈淀粉的再結(jié)晶——這使得淀粉對酶解作用具有抵抗力。
RS4：經(jīng)過合成改性以抵抗消化的淀粉。這種類型的抗性淀粉可以展示出廣泛的結(jié)構(gòu)多樣性。
食物中淀粉被人體消化系統(tǒng)中的酶降解的分析對于計算食物中的膳食纖維（未消化成分）和可用碳水化合物（已消化成分）非常重要�？梢栽谖覀兊木W(wǎng)站上找到。
試劑盒
淀粉及其組分
這些獲得了AOAC批準(zhǔn)的方法，通過酶法測定任何樣品中的總淀粉（K-TSHK、K-TSTA、AOAC 996.11）和抗性淀粉（K-RSTAR、AOAC 2002.02）含量。改進抗性淀粉方法后使快速抗性淀粉程序（K-RAPRS）開發(fā)，該程序與最新膳食纖維方法（K-RINTDF，AOAC 2017.16）一致，采用4小時的酶孵育代替現(xiàn)有的16小時程序。這產(chǎn)生了更具生理相關(guān)性的結(jié)果，因為食物在小腸中的平均停留時間約為4小時�；谙嗤椒ǖ男聹y定程序（K-DSTRS）允許測定快速消化淀粉（RDS）、慢速消化淀粉（SDS）、總可消化淀粉（TDS）和抗性淀粉。樣品中的直鏈淀粉和支鏈淀粉含量也可以使用Megazyme的直鏈淀粉/支鏈淀粉（K-AMYL）試劑盒測定，該試劑盒基于刀豆蛋白A介導(dǎo)的沉淀步驟。所謂的“淀粉損傷”水平是另一個可以通過酶法分析的淀粉屬性，使用淀粉損傷（K-SDAM）試劑盒。在此試劑盒中，高度純化的真菌α-淀粉酶可以作用于破損的淀粉顆粒，但對未破損的顆粒幾乎沒有水解活性。膳食纖維（K-TDFR適用于AOAC 985.29、AOAC 991.43、AOAC 2001.03；K-INTDF適用于AOAC 2009.01、AOAC 2011.25和K-RINTDF適用于AOAC 2017.16）可以使用酶促-重量法測量。補充分析物，可利用碳水化合物，可以根據(jù)“Prosky型”孵育條件使用K-ACHDF或現(xiàn)代“McCleary”孵育條件（生理相關(guān)的4小時孵育）使用K-AVCHO測定。樣品中的游離葡萄糖含量可以使用葡萄糖氧化酶或己糖激酶程序（K-GLUC和K-GLUHK）測定。
淀粉降解酶
已經(jīng)將定義的比色寡糖配制成試劑盒，用于測量參與淀粉降解的主要酶，包括α-淀粉酶、β-淀粉酶、淀粉葡萄糖苷酶和普魯蘭酶/極限糊精酶。在某些情況下，這些試劑盒中的試劑成分也可以單獨提供。
碳水化合物
單糖
混合連接淀粉寡糖可從我們的產(chǎn)品中獲得，用作色譜標(biāo)準(zhǔn)品以及用于酶表征和結(jié)合研究。
多糖
β-極限糊精可作為底物用于根據(jù)Farrand、AACC（SKB單位）或ASBC（糊精化單位，DU）碘基方法測量α-淀粉酶活性。
酶
α-淀粉酶（EC 3.2.1.1）是一種內(nèi)切酶，能夠水解淀粉中的α-1,4葡萄糖連接。該產(chǎn)品一般分析和超純形式的α-淀粉酶來源于細菌、真菌和豬。
β-淀粉酶（EC 3.2.1.2）是一種外切酶，從α-1,4寡糖和非還原端的淀粉多糖片段中切割麥芽糖單元。
α-葡萄糖苷酶（EC 3.2.1.20）是一種外切酶，從α-1,4寡糖和多糖淀粉片段的非還原端切割葡萄糖單元。
淀粉葡萄糖苷酶（EC 3.2.1.3）是另一種外切酶，作用于淀粉寡聚體和聚合物的非還原端，但它同時水解α-1,6連接和α-1,4連接。這是在食品工業(yè)中用于膳食纖維測定的關(guān)鍵酶。這種酶的商業(yè)制劑中經(jīng)常存在污染物，這些污染物可能強烈影響測定結(jié)果。E-AMGDF具有商業(yè)上可獲得的相當(dāng)高的純度。
極限糊精酶是一種內(nèi)切酶，在自然界中含量較低，但對某些行業(yè)特別是釀酒行業(yè)至關(guān)重要。極限糊精酶水解淀粉中的α-1,6連接，但對底物結(jié)合有嚴(yán)格要求。例如，極限糊精酶對63-α-D-葡萄糖基-麥芽三糖沒有活性，但容易水解63-α-D-麥芽三糖基-麥芽三糖。普魯蘭酶是極限糊精酶的微生物源等效酶。
圖：淀粉降解酶水解作用的示意圖。
酶底物
比色寡糖以試劑盒形式提供，用于測量α-淀粉酶（K-CERA和K-AMYLSD）、β-淀粉酶（K-BETA3）以及普魯蘭酶/極限糊精酶（K-PullG6）。比色寡糖（僅底物）在某些情況下可作為獨立產(chǎn)品提供。比色寡糖（僅底物）在某些情況下可作為獨立產(chǎn)品提供。
不溶性和可溶性顯色酶底物已分別從AZCL-淀粉和染色淀粉制備，用于檢測和測量α-淀粉酶。極限糊精酶/普魯蘭酶的類似底物已從AZCL-普魯蘭和染色普魯蘭衍生而來。
可溶性顯色底物在與所需的內(nèi)切酶孵化后會產(chǎn)生比色反應(yīng)，通過提供的標(biāo)準(zhǔn)曲線可以將其與酶活性相關(guān)聯(lián)。
不溶性顯色底物推薦用于瓊脂/凝膠上的定性篩查實驗，但這些底物也有片劑形式，可以在定量分析中使用（同樣通過將測量的吸光度與提供的標(biāo)準(zhǔn)曲線相關(guān)聯(lián)），具有改進的便利性，因此分析員的生產(chǎn)率更高。
檢測試劑盒，用于研究淀粉及其作用的酶
淀粉是人類飲食中碳水化合物的主要來源。它在植物中以儲存多糖的形式出現(xiàn)，在種子和塊莖中的含量非常高。淀粉對食品工業(yè)的重要性不言而喻，但對造紙、紡織、生物塑料和石油工業(yè)也很重要。淀粉由兩個組分亞群組成：
- 直鏈淀粉——由長的線性α-1,4-D-葡萄糖殘基鏈組成（聚合度約300-3000）；
- 支鏈淀粉——包含1,4-α-連接的D-葡萄糖殘基線性鏈，通過1,6-α-分支點連接，這些分支點占總鏈接的3%到4.2%。動物組織中相應(yīng)的儲存多糖，即糖原，具有更高的分支度，1,6-分支點約占總鏈接的10%。
圖示：支鏈淀粉由線性的α-1,4-D-吡喃葡萄糖鏈組成，每24-30個殘基就有α-1,6分支點。
抗性淀粉是指對人類小腸中存在的酶具有抗水解作用的任何淀粉。Englyst等人（Englyst, H. N. Kingman, S. M. & Cummings, J. H. (1992). 歐洲臨床營養(yǎng)學(xué)雜志, 46 (補充2), S33-S50）定義了四種不同類型的抗性淀粉。
RS1：無法直接接觸到的淀粉，例如種子或豆類以及未加工的全谷物中的淀粉。
RS2：以天然顆粒形式存在的抗性淀粉，如生土豆、青香蕉粉和高直鏈玉米淀粉。
RS3：當(dāng)含淀粉食物烹飪并冷卻時形成的抗性淀粉，例如在豆類、面包、玉米片以及煮熟并冷藏的土豆、意大利面沙拉或壽司米飯中。這種處理導(dǎo)致淀粉老化——冷卻時直鏈淀粉和支鏈淀粉的再結(jié)晶——這使得淀粉對酶解作用具有抵抗力。
RS4：經(jīng)過合成改性以抵抗消化的淀粉。這種類型的抗性淀粉可以展示出廣泛的結(jié)構(gòu)多樣性。
食物中淀粉被人體消化系統(tǒng)中的酶降解的分析對于計算食物中的膳食纖維（未消化成分）和可用碳水化合物（已消化成分）非常重要�？梢栽谖覀兊木W(wǎng)站上找到。
試劑盒
淀粉及其組分
這些獲得了AOAC批準(zhǔn)的方法，通過酶法測定任何樣品中的總淀粉（K-TSHK、K-TSTA、AOAC 996.11）和抗性淀粉（K-RSTAR、AOAC 2002.02）含量。改進抗性淀粉方法后使快速抗性淀粉程序（K-RAPRS）開發(fā)，該程序與最新膳食纖維方法（K-RINTDF，AOAC 2017.16）一致，采用4小時的酶孵育代替現(xiàn)有的16小時程序。這產(chǎn)生了更具生理相關(guān)性的結(jié)果，因為食物在小腸中的平均停留時間約為4小時�；谙嗤椒ǖ男聹y定程序（K-DSTRS）允許測定快速消化淀粉（RDS）、慢速消化淀粉（SDS）、總可消化淀粉（TDS）和抗性淀粉。樣品中的直鏈淀粉和支鏈淀粉含量也可以使用Megazyme的直鏈淀粉/支鏈淀粉（K-AMYL）試劑盒測定，該試劑盒基于刀豆蛋白A介導(dǎo)的沉淀步驟。所謂的“淀粉損傷”水平是另一個可以通過酶法分析的淀粉屬性，使用淀粉損傷（K-SDAM）試劑盒。在此試劑盒中，高度純化的真菌α-淀粉酶可以作用于破損的淀粉顆粒，但對未破損的顆粒幾乎沒有水解活性。膳食纖維（K-TDFR適用于AOAC 985.29、AOAC 991.43、AOAC 2001.03；K-INTDF適用于AOAC 2009.01、AOAC 2011.25和K-RINTDF適用于AOAC 2017.16）可以使用酶促-重量法測量。補充分析物，可利用碳水化合物，可以根據(jù)“Prosky型”孵育條件使用K-ACHDF或現(xiàn)代“McCleary”孵育條件（生理相關(guān)的4小時孵育）使用K-AVCHO測定。樣品中的游離葡萄糖含量可以使用葡萄糖氧化酶或己糖激酶程序（K-GLUC和K-GLUHK）測定。
| 貨號 | 品名 |
| K-TSTA | 總淀粉（GOPOD法） |
| K-TSHK | 總淀粉（己糖激酶法） |
| K-TSCK | 全淀粉控制面粉 |
| K-DSTRS | 可消化抗性淀粉 |
| K-RAPRS | 抗性淀粉（快速） |
| K-RSTAR | 抗性淀粉 |
| K-RSTCL | 抗性淀粉控制面粉 |
| K-AMYL | 直鏈淀粉/支鏈淀粉 |
| K-SDAM | 淀粉損失 |
| K-TDFR | 總膳食纖維 |
| K-INTDF | 綜合總膳食纖維 |
| K-RINTDF | 快速綜合總膳食纖維 |
| K-TDFC | 總膳食纖維控制 |
| K-ACHDF | 可利用碳水化合物/膳食纖維 |
| K-GLUC | 葡萄糖（GOPOD法） |
| K-GLUHK | 葡萄糖（己糖激酶法） |
淀粉降解酶
已經(jīng)將定義的比色寡糖配制成試劑盒，用于測量參與淀粉降解的主要酶，包括α-淀粉酶、β-淀粉酶、淀粉葡萄糖苷酶和普魯蘭酶/極限糊精酶。在某些情況下，這些試劑盒中的試劑成分也可以單獨提供。
| 貨號 | 品名 |
| α-淀粉酶 | |
| K-CERA | Ceralpha檢測 |
| K-AMHR4 | 淀粉酶HR試劑 |
| R-CAAR4 | Ceralpha 試劑 |
| K-AMYLSD | 淀粉酶SD |
| K-MALTA | 麥芽淀粉酶（α- 加β-淀粉酶） |
| β-淀粉酶 | |
| K-BETA3 | Betamyl-3 測定 |
| R-BAMR3 | Betamyl-3 試劑 |
| 淀粉葡萄糖苷酶 | |
| R-AMGR3 | 淀粉葡萄糖苷酶試劑 |
| 普魯蘭酶/極限糊精酶 | |
| K-PullG6 | 普魯蘭酶/極限糊精酶 |
碳水化合物
單糖
混合連接淀粉寡糖可從我們的產(chǎn)品中獲得，用作色譜標(biāo)準(zhǔn)品以及用于酶表征和結(jié)合研究。
| 貨號 | 品名 |
| O-PAN | Panose |
多糖
β-極限糊精可作為底物用于根據(jù)Farrand、AACC（SKB單位）或ASBC（糊精化單位，DU）碘基方法測量α-淀粉酶活性。
| 貨號 | 品名 |
| P-AMYL | 直鏈淀粉（土豆） |
| P-BLDX | β-極限糊精 |
酶
α-淀粉酶（EC 3.2.1.1）是一種內(nèi)切酶，能夠水解淀粉中的α-1,4葡萄糖連接。該產(chǎn)品一般分析和超純形式的α-淀粉酶來源于細菌、真菌和豬。
β-淀粉酶（EC 3.2.1.2）是一種外切酶，從α-1,4寡糖和非還原端的淀粉多糖片段中切割麥芽糖單元。
α-葡萄糖苷酶（EC 3.2.1.20）是一種外切酶，從α-1,4寡糖和多糖淀粉片段的非還原端切割葡萄糖單元。
淀粉葡萄糖苷酶（EC 3.2.1.3）是另一種外切酶，作用于淀粉寡聚體和聚合物的非還原端，但它同時水解α-1,6連接和α-1,4連接。這是在食品工業(yè)中用于膳食纖維測定的關(guān)鍵酶。這種酶的商業(yè)制劑中經(jīng)常存在污染物，這些污染物可能強烈影響測定結(jié)果。E-AMGDF具有商業(yè)上可獲得的相當(dāng)高的純度。
極限糊精酶是一種內(nèi)切酶，在自然界中含量較低，但對某些行業(yè)特別是釀酒行業(yè)至關(guān)重要。極限糊精酶水解淀粉中的α-1,6連接，但對底物結(jié)合有嚴(yán)格要求。例如，極限糊精酶對63-α-D-葡萄糖基-麥芽三糖沒有活性，但容易水解63-α-D-麥芽三糖基-麥芽三糖。普魯蘭酶是極限糊精酶的微生物源等效酶。
圖：淀粉降解酶水解作用的示意圖。| 貨號 | 品名 |
| E-MAST | 麥芽淀粉酶標(biāo)準(zhǔn)品（α-和β-淀粉酶的混合物） |
| α-淀粉酶 | |
| E-BLAAM | α-淀粉酶（地衣芽孢桿菌）（高純度） |
| E-ANAAM | α-淀粉酶（米曲霉）（高純度） |
| E-PANAA | α-淀粉酶（豬胰腺）（部分純化） |
| β-淀粉酶 | |
| E-BARBL | β-淀粉酶（大麥）（超高純度） |
| E-BARBP | β-淀粉酶（大麥）（超高純度） |
| α-葡萄糖苷酶 | |
| E-TSAGS | 嗜熱脂肪芽孢桿菌α-葡萄糖苷酶（超高純度） |
| E-MALTS | α-葡萄糖苷酶（酵母麥芽糖酶）（超高純度） |
| α-葡萄糖苷酶 | |
| E-AMGDF | 淀粉葡萄糖苷酶（黑曲霉）（分析級） |
| E-AMGDFNG | 淀粉葡萄糖苷酶（黑曲霉）無甘油 |
| E-AMGDFPD | 淀粉葡萄糖苷酶（粉末）（黑曲霉）（分析級） |
| E-AMGFR | 淀粉葡萄糖苷酶（黑曲霉）（分析級） |
| E-AMGPU | 淀粉葡萄糖苷酶（根霉屬）（超高純度） |
| 普魯蘭酶 | |
| E-PULKP | 普魯蘭酶M1（植物克雷伯氏菌）（超高純度） |
| E-PULBL | 普魯蘭酶M2（地衣芽孢桿菌）（超高純度） |
| 重組酶 | |
酶底物
比色寡糖以試劑盒形式提供，用于測量α-淀粉酶（K-CERA和K-AMYLSD）、β-淀粉酶（K-BETA3）以及普魯蘭酶/極限糊精酶（K-PullG6）。比色寡糖（僅底物）在某些情況下可作為獨立產(chǎn)品提供。比色寡糖（僅底物）在某些情況下可作為獨立產(chǎn)品提供。
| 貨號 | 品名 |
| α-淀粉酶底物 | |
| O-BPNPC7 | 4,6-O-苯亞甲基-4-硝基苯基-α-D-麥芽庚糖苷（需要α-葡萄糖苷酶） |
| α-葡萄糖苷酶底物 | |
| O-PNPAG | 4-硝基苯基-α-D-吡喃葡萄糖苷 |
不溶性和可溶性顯色酶底物已分別從AZCL-淀粉和染色淀粉制備，用于檢測和測量α-淀粉酶。極限糊精酶/普魯蘭酶的類似底物已從AZCL-普魯蘭和染色普魯蘭衍生而來。
可溶性顯色底物在與所需的內(nèi)切酶孵化后會產(chǎn)生比色反應(yīng)，通過提供的標(biāo)準(zhǔn)曲線可以將其與酶活性相關(guān)聯(lián)。
不溶性顯色底物推薦用于瓊脂/凝膠上的定性篩查實驗，但這些底物也有片劑形式，可以在定量分析中使用（同樣通過將測量的吸光度與提供的標(biāo)準(zhǔn)曲線相關(guān)聯(lián)），具有改進的便利性，因此分析員的生產(chǎn)率更高。
| 貨號 | 品名 |
| α-淀粉酶底物 | |
| 片劑 | |
| T-AMZ | 淀粉酶 |
| T-AMZHY | 淀粉酶HY（用于檢測蜂蜜中微量α-淀粉酶） |
| 可溶性底物 | |
| S-RSTAR | 紅色淀粉 |
| 限糊精酶/普魯蘭酶底物 | |
| 片劑 | |
| T-LDZ | 限速-葡聚糖酶 |
| 可溶性底物 | |
| S-RPUL | 紅色普魯蘭糖 |
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