本試劑盒是利用競(jìng)爭(zhēng)ELISA方法,在酶標(biāo)板微孔上預(yù)包被抗 硝基咪唑抗原。檢測(cè)時(shí),加入標(biāo)準(zhǔn)品或樣品溶液,硝基咪唑抗體及酶標(biāo)記物,包被抗原和加入樣本中的硝基咪唑競(jìng)爭(zhēng)性地與硝基咪唑抗體結(jié)合后,再與酶標(biāo)記物形成抗原抗體復(fù)合物,用TMB底物顯色;加入反應(yīng)終止液,在450nm波長(zhǎng)酶標(biāo)儀下進(jìn)行檢測(cè),樣品中的硝基咪唑濃度與吸收光強(qiáng)度成反比。
二、檢測(cè)范圍
本試劑盒是應(yīng)用ELISA技術(shù)研發(fā)的藥物殘留檢測(cè)產(chǎn)品,與儀器分析技術(shù)比較,能經(jīng)濟(jì)、快速地檢測(cè)出蜂蜜中的硝基咪唑類藥物。
三、交叉反應(yīng)率
與類似物的交叉反應(yīng)率:
甲硝唑(MNZ) ………………………………………100%
二甲硝咪唑DMZ…………………………………… 168%
洛硝唑(RNZ) ………………………………………112%
異丙硝唑……………………………………………33%
四、試劑盒組成
酶標(biāo)板1塊,96孔/板
標(biāo)準(zhǔn)液6瓶(1ml/瓶):
0 ppb、0.05ppb、0.2ppb、0.8ppb、3.2ppb、12.8ppb
抗體工作液 ………………………7ml
酶標(biāo)記物 ……………………… 12ml
底物液A …………………………7ml
底物液B …………………………7ml
終止液 …………………………7ml
20X濃縮洗滌液 ………………40 ml
2X濃縮復(fù)溶液 ………………50 ml
說(shuō)明書 ……………………………1份
樣本處理步驟:
(A)蜂蜜(樣本稀釋倍數(shù)0.5)
(1)取3g蜂蜜,加3ml 0.1M 碳酸鹽緩沖溶液振蕩至蜂蜜全部溶解;
(2)加入9ml 二氯甲烷,振蕩5分鐘,室溫4000轉(zhuǎn)/分,離心5分鐘;
(3)去除上層雜質(zhì),取下層有機(jī)相6ml至另一離心管中,加入2ml二氯甲烷,2ml 2M氫氧化鈉溶液,室溫4000轉(zhuǎn)/分,離心5分鐘;
(4)取4ml清澈下層有機(jī)相至干燥溶器中,50℃水浴氮?dú)獯蹈桑?/SPAN>
(5)用0.5ml復(fù)溶工作液溶解干燥的殘留物,再加入正己烷1ml混合30秒,室溫3000轉(zhuǎn)/分以上,離心5分鐘;
(6)去除上層取下層50µl液體用于分析。