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β-葡聚糖檢測(cè)試劑盒用于研究混合連接(1,3:1,4)選型指南

瀏覽次數(shù):180 發(fā)布日期:2024-12-12  來(lái)源:本站 僅供參考,謝絕轉(zhuǎn)載,否則責(zé)任自負(fù)
β-葡聚糖檢測(cè)試劑盒,用于研究混合連接(1,3:1,4)-β-葡聚糖及其作用的酶
 
混合連接(1,3:1,4)-β-葡聚糖存在于燕麥和大麥等谷物胚乳細(xì)胞壁中,在小麥和黑麥中的含量較少。與β-葡聚糖相關(guān)的健康益處已經(jīng)得到充分證實(shí),這使其成為食品工業(yè)關(guān)注的重要成分。動(dòng)物飼料中高水平的β-葡聚糖會(huì)導(dǎo)致采食量減少和飼料轉(zhuǎn)化率降低。
 
β-葡聚糖也是釀酒工業(yè)中的一個(gè)重要分析物,其水平升高會(huì)導(dǎo)致麥芽汁粘度增加,從而引起加工問(wèn)題。因此,了解這種多糖的完全降解、結(jié)構(gòu)和功能特性的酶機(jī)制至關(guān)重要。
 
試劑盒
 
該系列試劑盒用于測(cè)量所有樣品中的混合鍵合β-葡聚糖(K-BGLU:AOAC 995.16,CODEX II型方法);谌玖蠘(biāo)記的天然多糖的試劑盒(K-MBGL)也可用于測(cè)量?jī)?nèi)切作用的β-葡聚糖降解酶,包括內(nèi)切-1,3(4)-β-葡聚糖酶/地衣酶和內(nèi)切-1,4-β-葡聚糖酶/內(nèi)切纖維素酶。內(nèi)切-1,4-β-葡聚糖酶可以使用新型的CellG5試劑盒(K-CellG5)進(jìn)行特異性測(cè)量。樣品中的游離葡萄糖含量可以使用葡萄糖氧化酶或己糖激酶試劑盒(K-GLUC和K-GLUHK)來(lái)確定。
 
貨號(hào) 品名
K-BGLU β-葡聚糖(β-1,3:1,4混合連接)
K-MBGL β-葡聚糖酶(麥芽和微生物)
K-CellG5 纖維素酶(CellG5 方法)
K-GLUC D-葡萄糖(GOPOD格式)
K-GLUHK D-葡萄糖(HK格式)
 
碳水化合物
低聚糖
已制備多種混合連接(β-1,3:1,4)DP3和DP4葡萄糖低聚糖,純度高,可用作色譜標(biāo)準(zhǔn)品,也可用于酶表征和結(jié)合研究。相應(yīng)的纖維素低聚糖在這方面也可能證明是有用的。
 
貨號(hào) 品名
O-BGTRIA 32-β-D-葡萄糖基-纖維二糖
O-BGTRIB 31-β-D-纖維二糖基葡萄糖
 O-CTR 纖維三糖
 O-CTE 四糖
O-CPE 五碳糖
O-CHE 六糖醇
 
多糖
高純度的燕麥和大麥 (1,3:1,4)-β-D-葡聚糖,是其中一部分。β-葡聚糖有高、中、低粘度等級(jí),這些粘度表示了每個(gè)產(chǎn)品中的分子量范圍。從冰島苔蘚中分離出的地衣多糖是另一種β-葡聚糖來(lái)源,其β-1,3 鍵的比例較高。羧甲基纖維素 4M 是一種中等粘度的纖維素,其羧甲基取代度為 0.4。這種比其他羧甲基纖維素(通常 DS 為 0.7)更低的取代度,更容易被全譜內(nèi)切纖維素酶水解,因此普遍適用于該酶的測(cè)定。
 
貨號(hào) 品名
P-BGBL β-葡聚糖(大麥;低粘度,高純度)
P-BGBM β-葡聚糖(大麥;中等粘度,高純度)
P-BGBH β-葡聚糖(大麥;高粘度,高純度)
P-BGOM β-葡聚糖(燕麥;中等粘度,高純度)
P-BGCFA β-葡聚糖CFA標(biāo)準(zhǔn)
P-MWBGS β-葡聚糖分子量標(biāo)準(zhǔn)品
 

地衣酶(EC 3.2.1.73)選擇性地水解位于其還原側(cè)的β-1,3連接的葡萄糖殘基相鄰的β-1,4糖苷鍵。
內(nèi)切纖維素酶(endo-1,4-β-葡聚糖酶)(EC 3.2.1.4)水解多糖主鏈中的β-1,4糖苷鍵。它在1,3-β連接的D-葡萄糖殘基的非還原側(cè)切割1,4-β-D-葡萄糖苷鍵,但不在還原側(cè)切割。它還在水解這些葡聚糖中長(zhǎng)鏈的1,4-β-D-葡萄糖苷鏈時(shí)產(chǎn)生各種纖維素寡糖。
β-葡萄糖苷酶(EC 3.2.1.21)依次作用,一次水解一個(gè)葡萄糖殘基,從寡糖/多糖片段的非還原端開(kāi)始。它們對(duì)β-1,4和β-1,3糖苷鍵的特異性各不相同。
纖維二糖水解酶(EC 3.2.1.91)以類似的外切方式作用,但切割二糖(纖維二糖)單元。

 
貨號(hào) 品名
β-葡萄糖苷酶
E-LICHN 地衣酶(枯草桿菌)
內(nèi)切-1,4-β-葡聚糖酶
E-CELAN 內(nèi)切纖維素酶(黑曲霉)(最適pH 4.5)
外切-1,4-β-葡萄糖苷酶
E-BGLUC β-葡萄糖苷酶(黑曲霉)(最適pH 4.0)
E-BGOSAG β-葡萄糖苷酶(農(nóng)桿菌屬)(最適pH 6.5)
外切-1,3-β-葡聚糖酶
E-EXBGOS 外切-1,3-β-D-葡聚糖酶 + β-葡萄糖苷酶
E-EXBGTV 重組外切-1,3-β-葡聚糖酶(綠木霉)(最適pH 4.5)
纖維二糖水解酶
E-CBHII 纖維素酶I(長(zhǎng)枝木霉)(最適pH 4.5)
Rec重組酶
 
酶底物
已從(1,3:1,4)-β-葡聚糖制備了用于檢測(cè)和測(cè)量?jī)?nèi)切-(1,3:1,4)-β-葡聚糖酶活性的不溶性和可溶性顯色酶底物。這些底物在與合適的內(nèi)切-(1,3:1,4)-β-葡聚糖酶孵育時(shí)會(huì)產(chǎn)生比色反應(yīng),通過(guò)提供的標(biāo)準(zhǔn)曲線(僅限S-ABG100)可以關(guān)聯(lián)到酶活性,或者用于瓊脂平板上的篩選。不溶性底物還以片劑形式提供,以提高用戶在測(cè)定特定酶活性時(shí)的準(zhǔn)確性和便利性。應(yīng)當(dāng)注意的是,由于許多內(nèi)切-1,4-β-葡聚糖酶也作用于(1,3:1,4)-β-葡聚糖,這些底物也會(huì)被一些內(nèi)切-1,4-β-葡聚糖酶水解。針對(duì)內(nèi)切-1,4-β-葡聚糖酶的特異性染色多糖底物的類似版本也可提供。
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