淀粉及其各組分檢測(cè)試劑盒選型指南

瀏覽次數(shù)：245　發(fā)布日期：2024-12-10　來(lái)源：本站　僅供參考，謝絕轉(zhuǎn)載，否則責(zé)任自負(fù)

淀粉

檢測(cè)試劑盒，用于研究淀粉及其作用的酶

淀粉是人類飲食中碳水化合物的主要來(lái)源。它在植物中以儲(chǔ)存多糖的形式出現(xiàn)，在種子和塊莖中的含量非常高。淀粉對(duì)食品工業(yè)的重要性不言而喻，但對(duì)造紙、紡織、生物塑料和石油工業(yè)也很重要。淀粉由兩個(gè)組分亞群組成：

直鏈淀粉——由長(zhǎng)的線性α-1,4-D-葡萄糖殘基鏈組成（聚合度約300-3000）；
支鏈淀粉——包含1,4-α-連接的D-葡萄糖殘基線性鏈，通過(guò)1,6-α-分支點(diǎn)連接，這些分支點(diǎn)占總鏈接的3%到4.2%。動(dòng)物組織中相應(yīng)的儲(chǔ)存多糖，即糖原，具有更高的分支度，1,6-分支點(diǎn)約占總鏈接的10%。

圖示：支鏈淀粉由線性的α-1,4-D-吡喃葡萄糖鏈組成，每24-30個(gè)殘基就有α-1,6分支點(diǎn)。

抗性淀粉是指對(duì)人類小腸中存在的酶具有抗水解作用的任何淀粉。Englyst等人（Englyst, H. N. Kingman, S. M. & Cummings, J. H. (1992). 歐洲臨床營(yíng)養(yǎng)學(xué)雜志, 46 (補(bǔ)充2), S33-S50）定義了四種不同類型的抗性淀粉。

RS1：無(wú)法直接接觸到的淀粉，例如種子或豆類以及未加工的全谷物中的淀粉。
RS2：以天然顆粒形式存在的抗性淀粉，如生土豆、青香蕉粉和高直鏈玉米淀粉。
RS3：當(dāng)含淀粉食物烹飪并冷卻時(shí)形成的抗性淀粉，例如在豆類、面包、玉米片以及煮熟并冷藏的土豆、意大利面沙拉或壽司米飯中。這種處理導(dǎo)致淀粉老化——冷卻時(shí)直鏈淀粉和支鏈淀粉的再結(jié)晶——這使得淀粉對(duì)酶解作用具有抵抗力。
RS4：經(jīng)過(guò)合成改性以抵抗消化的淀粉。這種類型的抗性淀粉可以展示出廣泛的結(jié)構(gòu)多樣性。
食物中淀粉被人體消化系統(tǒng)中的酶降解的分析對(duì)于計(jì)算食物中的膳食纖維（未消化成分）和可用碳水化合物（已消化成分）非常重要。可以在我們的網(wǎng)站上找到。

試劑盒

淀粉及其組分

這些獲得了AOAC批準(zhǔn)的方法，通過(guò)酶法測(cè)定任何樣品中的總淀粉（K-TSHK、K-TSTA、AOAC 996.11）和抗性淀粉（K-RSTAR、AOAC 2002.02）含量。改進(jìn)抗性淀粉方法后使快速抗性淀粉程序（K-RAPRS）開(kāi)發(fā)，該程序與最新膳食纖維方法（K-RINTDF，AOAC 2017.16）一致，采用4小時(shí)的酶孵育代替現(xiàn)有的16小時(shí)程序。這產(chǎn)生了更具生理相關(guān)性的結(jié)果，因?yàn)槭澄镌谛∧c中的平均停留時(shí)間約為4小時(shí)�；谙嗤椒ǖ男聹y(cè)定程序（K-DSTRS）允許測(cè)定快速消化淀粉（RDS）、慢速消化淀粉（SDS）、總可消化淀粉（TDS）和抗性淀粉。樣品中的直鏈淀粉和支鏈淀粉含量也可以使用Megazyme的直鏈淀粉/支鏈淀粉（K-AMYL）試劑盒測(cè)定，該試劑盒基于刀豆蛋白A介導(dǎo)的沉淀步驟。所謂的“淀粉損傷”水平是另一個(gè)可以通過(guò)酶法分析的淀粉屬性，使用淀粉損傷（K-SDAM）試劑盒。在此試劑盒中，高度純化的真菌α-淀粉酶可以作用于破損的淀粉顆粒，但對(duì)未破損的顆粒幾乎沒(méi)有水解活性。膳食纖維（K-TDFR適用于AOAC 985.29、AOAC 991.43、AOAC 2001.03；K-INTDF適用于AOAC 2009.01、AOAC 2011.25和K-RINTDF適用于AOAC 2017.16）可以使用酶促-重量法測(cè)量。補(bǔ)充分析物，可利用碳水化合物，可以根據(jù)“Prosky型”孵育條件使用K-ACHDF或現(xiàn)代“McCleary”孵育條件（生理相關(guān)的4小時(shí)孵育）使用K-AVCHO測(cè)定。樣品中的游離葡萄糖含量可以使用葡萄糖氧化酶或己糖激酶程序（K-GLUC和K-GLUHK）測(cè)定。

貨號(hào)	品名
K-TSTA	總淀粉（GOPOD法）
K-TSHK	總淀粉（己糖激酶法）
K-TSCK	全淀粉控制面粉
K-DSTRS	可消化抗性淀粉
K-RAPRS	抗性淀粉（快速）
K-RSTAR	抗性淀粉
K-RSTCL	抗性淀粉控制面粉
K-AMYL	直鏈淀粉/支鏈淀粉
K-SDAM	淀粉損失
K-TDFR	總膳食纖維
K-INTDF	綜合總膳食纖維
K-RINTDF	快速綜合總膳食纖維
K-TDFC	總膳食纖維控制
K-ACHDF	可利用碳水化合物/膳食纖維
K-GLUC	葡萄糖（GOPOD法）
K-GLUHK	葡萄糖（己糖激酶法）

淀粉降解酶

已經(jīng)將定義的比色寡糖配制成試劑盒，用于測(cè)量參與淀粉降解的主要酶，包括α-淀粉酶、β-淀粉酶、淀粉葡萄糖苷酶和普魯蘭酶/極限糊精酶。在某些情況下，這些試劑盒中的試劑成分也可以單獨(dú)提供。

貨號(hào)	品名
α-淀粉酶
K-CERA	Ceralpha檢測(cè)
K-AMHR4	淀粉酶HR試劑
R-CAAR4	Ceralpha 試劑
K-AMYLSD	淀粉酶SD
K-MALTA	麥芽淀粉酶（α- 加β-淀粉酶）
β-淀粉酶
K-BETA3	Betamyl-3 測(cè)定
R-BAMR3	Betamyl-3 試劑
淀粉葡萄糖苷酶
R-AMGR3	淀粉葡萄糖苷酶試劑
普魯蘭酶/極限糊精酶
K-PullG6	普魯蘭酶/極限糊精酶

碳水化合物
單糖
混合連接淀粉寡糖可從我們的產(chǎn)品中獲得，用作色譜標(biāo)準(zhǔn)品以及用于酶表征和結(jié)合研究。

貨號(hào)	品名
O-PAN	Panose

多糖
β-極限糊精可作為底物用于根據(jù)Farrand、AACC（SKB單位）或ASBC（糊精化單位，DU）碘基方法測(cè)量α-淀粉酶活性。

貨號(hào)	品名
P-AMYL	直鏈淀粉（土豆）
P-BLDX	β-極限糊精

酶
α-淀粉酶（EC 3.2.1.1）是一種內(nèi)切酶，能夠水解淀粉中的α-1,4葡萄糖連接。該產(chǎn)品一般分析和超純形式的α-淀粉酶來(lái)源于細(xì)菌、真菌和豬。
β-淀粉酶（EC 3.2.1.2）是一種外切酶，從α-1,4寡糖和非還原端的淀粉多糖片段中切割麥芽糖單元。
α-葡萄糖苷酶（EC 3.2.1.20）是一種外切酶，從α-1,4寡糖和多糖淀粉片段的非還原端切割葡萄糖單元。
淀粉葡萄糖苷酶（EC 3.2.1.3）是另一種外切酶，作用于淀粉寡聚體和聚合物的非還原端，但它同時(shí)水解α-1,6連接和α-1,4連接。這是在食品工業(yè)中用于膳食纖維測(cè)定的關(guān)鍵酶。這種酶的商業(yè)制劑中經(jīng)常存在污染物，這些污染物可能強(qiáng)烈影響測(cè)定結(jié)果。E-AMGDF具有商業(yè)上可獲得的相當(dāng)高的純度。
極限糊精酶是一種內(nèi)切酶，在自然界中含量較低，但對(duì)某些行業(yè)特別是釀酒行業(yè)至關(guān)重要。極限糊精酶水解淀粉中的α-1,6連接，但對(duì)底物結(jié)合有嚴(yán)格要求。例如，極限糊精酶對(duì)63-α-D-葡萄糖基-麥芽三糖沒(méi)有活性，但容易水解63-α-D-麥芽三糖基-麥芽三糖。普魯蘭酶是極限糊精酶的微生物源等效酶。

圖：淀粉降解酶水解作用的示意圖。

貨號(hào)	品名
E-MAST	麥芽淀粉酶標(biāo)準(zhǔn)品（α-和β-淀粉酶的混合物）
α-淀粉酶
E-BLAAM	α-淀粉酶（地衣芽孢桿菌）（高純度）
E-ANAAM	α-淀粉酶（米曲霉）（高純度）
E-PANAA	α-淀粉酶（豬胰腺）（部分純化）
β-淀粉酶
E-BARBL	β-淀粉酶（大麥）（超高純度）
E-BARBP	β-淀粉酶（大麥）（超高純度）
α-葡萄糖苷酶
E-TSAGS	嗜熱脂肪芽孢桿菌α-葡萄糖苷酶（超高純度）
E-MALTS	α-葡萄糖苷酶（酵母麥芽糖酶）（超高純度）
α-葡萄糖苷酶
E-AMGDF	淀粉葡萄糖苷酶（黑曲霉）（分析級(jí)）
E-AMGDFNG	淀粉葡萄糖苷酶（黑曲霉）無(wú)甘油
E-AMGDFPD	淀粉葡萄糖苷酶（粉末）（黑曲霉）（分析級(jí)）
E-AMGFR	淀粉葡萄糖苷酶（黑曲霉）（分析級(jí)）
E-AMGPU	淀粉葡萄糖苷酶（根霉屬）（超高純度）
普魯蘭酶
E-PULKP	普魯蘭酶M1（植物克雷伯氏菌）（超高純度）
E-PULBL	普魯蘭酶M2（地衣芽孢桿菌）（超高純度）
重組酶

酶底物

比色寡糖以試劑盒形式提供，用于測(cè)量α-淀粉酶（K-CERA和K-AMYLSD）、β-淀粉酶（K-BETA3）以及普魯蘭酶/極限糊精酶（K-PullG6）。比色寡糖（僅底物）在某些情況下可作為獨(dú)立產(chǎn)品提供。比色寡糖（僅底物）在某些情況下可作為獨(dú)立產(chǎn)品提供。

貨號(hào)	品名
α-淀粉酶底物
O-BPNPC7	4,6-O-苯亞甲基-4-硝基苯基-α-D-麥芽庚糖苷（需要α-葡萄糖苷酶）
α-葡萄糖苷酶底物
O-PNPAG	4-硝基苯基-α-D-吡喃葡萄糖苷

不溶性和可溶性顯色酶底物已分別從AZCL-淀粉和染色淀粉制備，用于檢測(cè)和測(cè)量α-淀粉酶。極限糊精酶/普魯蘭酶的類似底物已從AZCL-普魯蘭和染色普魯蘭衍生而來(lái)。

可溶性顯色底物在與所需的內(nèi)切酶孵化后會(huì)產(chǎn)生比色反應(yīng)，通過(guò)提供的標(biāo)準(zhǔn)曲線可以將其與酶活性相關(guān)聯(lián)。

不溶性顯色底物推薦用于瓊脂/凝膠上的定性篩查實(shí)驗(yàn)，但這些底物也有片劑形式，可以在定量分析中使用（同樣通過(guò)將測(cè)量的吸光度與提供的標(biāo)準(zhǔn)曲線相關(guān)聯(lián)），具有改進(jìn)的便利性，因此分析員的生產(chǎn)率更高。

貨號(hào)	品名
α-淀粉酶底物
片劑
T-AMZ	淀粉酶
T-AMZHY	淀粉酶HY（用于檢測(cè)蜂蜜中微量α-淀粉酶）
可溶性底物
S-RSTAR	紅色淀粉
限糊精酶/普魯蘭酶底物
片劑
T-LDZ	限速-葡聚糖酶
可溶性底物
S-RPUL	紅色普魯蘭糖

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