辣椒及其制品辣度ELISA檢測(cè)試劑盒
使用說明書

 快速（＜10min）、高回收（≥80%）和高效的前處理方法

 檢測(cè)限1度辣度，定量限2度辣度

 快速，檢測(cè)時(shí)間30min

 高的重現(xiàn)性

原理：
基于競(jìng)爭(zhēng)性免疫檢測(cè)原理：辣椒素與預(yù)包被在板上的辣椒素蛋白偶聯(lián)物競(jìng)爭(zhēng)結(jié)合有限的抗辣椒素的抗體，然后加入酶結(jié)合物反應(yīng)，形成酶結(jié)合物—抗辣椒素抗體—辣椒素蛋白偶聯(lián)物復(fù)合物，洗滌除去未結(jié)合的反應(yīng)物，經(jīng)TMB底物顯色產(chǎn)生藍(lán)色產(chǎn)物，加終止液后，產(chǎn)物由藍(lán)色轉(zhuǎn)變?yōu)辄S色，其在450nm下有最大吸收峰。樣本中辣椒素含量與樣本的吸光度呈負(fù)相關(guān)。

 

1. 當(dāng)與儀器方法結(jié)果相比時(shí)，試劑盒的結(jié)果偏高這是很正常的現(xiàn)象。因?yàn)閮x器方法僅測(cè)量的單一化合物，而試劑盒中的抗體由于不僅能識(shí)別目標(biāo)分子且還能識(shí)別結(jié)構(gòu)上相似的分子，包括其相關(guān)的代謝產(chǎn)物。因此，使用人員需要明白本產(chǎn)品的局限性和對(duì)數(shù)據(jù)做出合理的分析。

2. 任何試劑、檢測(cè)程序的改變都可能導(dǎo)致檢測(cè)失敗。

3. 不要使用超過有效期的產(chǎn)品；不同批次的產(chǎn)品不得混用。

4. 實(shí)驗(yàn)用水的質(zhì)量很重要，請(qǐng)使用蒸餾水或去離子水。

5. 微孔板開封后，需置于有干燥劑的密封袋中冷藏保存，建議于一個(gè)月內(nèi)使用完。

 酶標(biāo)儀：配備450nm波長(zhǎng)

 單道移液器：0.5-10、20-200、100-1000μL、0.5-5mL量程各一支

 多道移液器：30-300μL量程一支

 白色、黃色和藍(lán)色吸頭若干  恒溫培養(yǎng)箱

 均質(zhì)器或絞肉機(jī)

 甲醇，分析純

 二甲基亞砜，分析純

(1) 樣本提取液

      分別取甲醇70mL和二甲基亞砜 30mL混勻備用。

(2) 1×樣本稀釋液

      取4×樣本稀釋液1份，加入3份去離子水混勻，比如1mL+3mL    

火鍋底料、凝固性油樣，可以加熱至樣品溶化后再稱量

(1) 稱取0.2g均質(zhì)的樣本于一合適的容器中，加入10mL樣本提取液渦旋2min;

(2) 4000rpm，離心5min；

(3) 取上層液體0.1mL，加入9.9mL去離子水混勻；

(4) 再取0.1mL上一步混勻后溶液，加入0.9mL去離子水混勻

(5) 再取0.1mL上一步混勻后溶液，加入0.1mL1×樣本稀釋液混勻

稀釋倍數(shù)：1

  粉碎后，過40目篩

(1) 稱取0.2g均質(zhì)的樣本于一合適的容器中，加入10mL樣本提取液渦旋2min;

(2) 4000rpm，離心5min；

(3) 取上層液體0.1mL，加入9.9mL去離子水混勻；

(4) 再取0.1mL上一步混勻后溶液，加入0.9mL去離子水混勻

(5) 再取0.1mL上一步混勻后溶液，加入0.1mL1×樣本稀釋液混勻

稀釋倍數(shù)：1

    在均質(zhì)器或料理機(jī)上均質(zhì)呈勻漿

(1) 稱取0.2g均質(zhì)的樣本于一合適的容器中，加入10mL樣本提取液渦旋2min;

(2) 4000rpm，離心5min；

(3) 取上層液體0.1mL，加入9.9mL去離子水混勻；

(4) 再取0.1mL上一步混勻后溶液，加入0.9mL去離子水混勻

(5) 再取0.1mL上一步混勻后溶液，加入0.1mL1×樣本稀釋液混勻

稀釋倍數(shù)：1

• 所有試劑需回復(fù)至室溫（在20-25℃下，從試劑盒中取出并放置1-2h）;
• 檢測(cè)開始前需準(zhǔn)備好所需試劑；
• 取出所需體積的試劑，其余放回盒內(nèi)；
• 未使用完的試劑請(qǐng)勿倒回原試劑瓶?jī)?nèi)，移取每一種試劑需更換吸頭，以免交叉污染；
• 請(qǐng)不要在通風(fēng)口、陽光直射下檢測(cè)，以避免造成微孔微環(huán)境差異導(dǎo)致檢測(cè)失敗；
• 標(biāo)準(zhǔn)品、陽性樣本以及用過的吸頭和器皿均應(yīng)做有毒廢棄物處理。