豆芽中4種植物生長素的UPLC/MS/MS測定(QuEChERS)
瀏覽次數(shù):2254 發(fā)布日期:2022-7-7
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豆芽中4種植物生長素的UPLC/MS/MS測定(QuEChERS)
《BJS 201703 豆芽中植物生長激素的測定》
一、樣品提取
準確稱取 10.0 g 經(jīng)粉碎的豆芽置于50 mL離心管中,加入20 mL 含 1% 甲酸乙腈溶液,2500 rpm 渦旋混勻 5 min;然后加入 QuEChERS 萃取鹽包(貨號:Q050025 ),立即手動振搖 30s,渦旋 2min;再以 5000r/min 離心5min,使乙腈和水分層,上層乙腈層待凈化。
二、樣品凈化
精密量取上層乙腈層5 mL置于 QuEChERS凈化管(貨號:Q015014 )15 mL凈化管中,2500 rpm 渦旋混勻 2min,以 5000 r/min 離心5 min,移取上層清液4 mL于另一 15 mL 離心管中,45℃水浴氮吹至干,用甲醇定容至 1mL,過 0.22 µm 尼龍濾膜供上機測試。
三、標曲配制
稱取空白豆芽樣品 10.0 g 按照上述一、二步驟操作,作為空白基質(zhì)提取液;分別精密量取一定量的混合標準液加入到空白基質(zhì)提取液中,用甲醇定容至 1 mL,配制成適當濃度的基質(zhì)混合標準工作溶液。
四、儀器條件
色譜條件
儀器:UPLC-MS/MS(Thermo Fisher TQS Endura)
色譜柱:OSD色譜柱 (2.1 mm×50 mm, 1.8 µm)
流動相:A:5 mmol/L 乙酸銨
B:甲醇(0.1% 甲酸)
洗脫方式:梯度洗脫,見表 1
表 1 梯度洗脫程序
時間 /min |
A/% |
B/% |
0 |
95 |
5 |
2.0 |
70 |
30 |
3.5 |
10 |
90 |
4.0 |
10 |
90 |
4.1 |
95 |
5 |
5.0 |
95 |
5 |
流速:0.3 mL/min 柱溫:35℃ 進樣量:5 µL
質(zhì)譜條件
離子源:HESI 電噴霧電壓:3500 V
鞘氣壓力:35 arb 輔氣壓力:3 arb
離子傳輸管:380℃ 輔氣溫度:420℃
表 2 組分名稱、保留時間及特征離子一覽表(* 為定量離子)
名稱 |
保留時間 /min |
母離子 |
子離子 |
赤霉素 |
3.22 |
344.9 |
133.0*,106.0 |
6- 芐基腺嘌呤 |
3.97 |
224.2 |
142.5*,238.9 |
4- 氯苯氧乙酸 |
3.45 |
184.8 |
161.0*,125.1 |
2,4- 二氯苯氧乙酸 |
3.86 |
218.9 |
126.7*,110.7 |
五、實驗結(jié)果
表 3 豆芽中 4 種植物生長激素加標回收結(jié)果(25.0 µg/kg)
目標物 |
回收率(%) |
平均回收率(%) |
RSD(%) |
1 |
2 |
3 |
4 |
赤霉素 |
96.96 |
88.74 |
96.19 |
91.44 |
93.3 |
4.2 |
6- 芐基腺嘌呤 |
83.47 |
86.42 |
90.84 |
83.81 |
86.1 |
3.9 |
4- 氯苯氧乙酸 |
93.66 |
87.35 |
89.32 |
86.91 |
89.3 |
3.4 |
2,4- 二氯苯氧乙酸 |
78.48 |
77.82 |
78.50 |
75.41 |
77.6 |
1.9 |
豆芽中植物生長激素檢測色譜圖如下:
從上至下出峰順序依次為:4- 氯苯氧乙酸、2,4- 二氯苯氧乙酸、6- 芐基腺嘌呤、赤霉素。注意事項:
1. 該實驗采用 UPLC/MS/MS 檢測,對部分目標物有基質(zhì)抑制效應(yīng),如 6- 芐基腺嘌呤,建議配制基質(zhì)混合標準工作液進行定量,校正回收率。
2. 在標準《BJS 201703》中,只取 4 mL 提取液進行凈化,離心后取全部凈化液氮吹復(fù)溶,但在實際操作中,離心后實際氮吹復(fù)溶的凈化液體積不到 4 mL,會造成檢測結(jié)果偏低,建議取 5 mL 提取液凈化,再精密量取 4 mL 凈化液氮吹復(fù)溶
訂購信息
貨號 |
描述 |
包裝 |
Q050025 |
4g MgSO4+1g無水醋酸鈉,50 mL 離心管 |
50 支/盒 |
Q015014 |
300mg MgSO4+100 mg C18,15 mL 離心管 |
50 支/盒 |
YQ-CL200 |
clover® 多管渦旋混勻儀 |
1 臺/箱 |
CN13N22 |
尼龍 /Φ13 mm/0.22 µm/ 有機系 |
100 個/盒 |
CN50M45 |
MCE/Φ50 mm/0.45 µm/ 水系 |
100 片 /盒 |
CN50N22 |
NL 濾膜,直徑 50 mm,孔徑 0.22 µm,水系 |
100 片/盒 |
CL-BC9002 |
2 mL 藍色聚丙烯蓋,預(yù)開口,9-425 |
100 個/盒 |
CL-SB9004 |
2 mL 螺紋棕色樣品瓶,帶書寫處 11.6*32 mm,9-425 |
100 個/盒 |