一、技術原理
試劑盒基于恒溫熒光法檢測,利用兩對特殊引物和具有鏈置換活性的Bst DNA聚合酶,使模板兩端引物結合處循環(huán)出現(xiàn)環(huán)狀單鏈結構,引物順利與模板結合并進行鏈置換擴增反應,實現(xiàn)在恒溫條件下(60-65℃)進行連續(xù)快速擴增。反應體系中加入了顯色指示劑,陰陽性結果顯色差異顯著,擴增結束后可以通過觀察熒光顯色劑的顏色變化判讀結果,無需開蓋避免了擴增產(chǎn)物交叉感染性的可能性。
恒溫熒光法是一種新型的恒溫核酸擴增技術,該技術無需常規(guī)PCR中變性、退火、延伸等步驟不同溫度設計要求,只需提供一個適宜的恒定溫度即可,因此,與常規(guī)PCR相比,恒溫熒光法技術更適合現(xiàn)場高通量快速檢測,具有簡單、快速、特異性強的特點。
二、恒溫熒光法試劑盒組成
三、恒溫熒光法試劑盒操作指南
四、金黃色葡萄球菌快速篩選操作流程
五、可疑菌落快速鑒定操作流程
六、恒溫熒光法試劑盒特點
操作簡單 通過幾步加樣后,60-65℃范圍內(nèi)恒溫條件下即可完成擴增。
使用便捷 一管式凍干,免去繁瑣的配置步驟。
儀器簡單 擴增條件簡單,能提供恒溫裝置即可。
特異性高 比傳統(tǒng)PCR靈敏度高10-100倍,可檢測5-20個拷貝。
快速判讀 使用合適的增菌液收集到足夠菌體后,40-60分鐘內(nèi)可完成檢測,肉眼觀察顏色變化即可判讀結果。全部檢驗流程僅需約13h
七、恒溫熒光法技術快速檢測金黃色葡萄球菌試劑推薦
7.5%氯化鈉胰酪胨大豆肉湯;
金黃色葡萄球菌核酸檢測試劑盒(恒溫熒光法);
金黃色葡萄球菌顯色培養(yǎng)基;
Baird-parker瓊脂平板;
營養(yǎng)瓊脂斜面;
血平板;
凍干血漿;
革蘭氏染色液;
八、需要配套的儀器及耗材
側(cè)邊過濾樣品均質(zhì)袋(食品檢測);
可調(diào)移液器;
高速振蕩樣品前處理器;
高速離心機;
恒溫金屬。
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