MFC160真菌毒素多功能凈化柱:—步法凈化多毒素樣品
近年來,真菌毒素對糧食飼料的污染是一個(gè)全球性的熱點(diǎn)問題,不僅以黃曲霉毒素(Aflatoxin),赭曲霉毒素A(Ochratoxin A),單端孢菌毒素(Trichothecenes),玉米赤霉烯酮(Zearalenone),煙曲霉毒素(Fumonisin)和串珠鐮刀菌素(Moniliformin)發(fā)生較多,而且真菌毒素種類繁多、結(jié)構(gòu)復(fù)雜多樣,這就造成實(shí)際生產(chǎn)中,真菌毒素的定量檢測成為困擾我們的重要難題之一,目前的檢測方法包括薄層色譜法、酶聯(lián)免疫法、免疫親和柱凈化高效液相色譜法。但薄層色譜法操作繁瑣、污染大、定量差、耗時(shí)長;而酶聯(lián)免疫法雖操作簡單、靈敏度高,但特異性差,假陽性高;免疫親和柱高效液相色譜法成本太高, 對于高黃曲霉毒素含量的樣品偏差較大。迫切需要一種樣品處理簡便易行、快速準(zhǔn)確、靈敏度高、檢測限低,檢測成本低廉的檢測方法和技術(shù)。
針對這些檢測難點(diǎn)和問題,長期致力于真菌毒素檢測技術(shù)研究的Pribolab經(jīng)過不懈努力和多次試驗(yàn)驗(yàn)證,成功研發(fā)出了PriboFast®系列各類真菌毒素多功能凈化柱和專用凈化柱,將極性、非極性及離子交換等多類基團(tuán)作為填充劑填充到柱體中,可選擇性吸附樣液中的脂類、蛋白類等雜質(zhì),從而對毒素樣品起到非常針對性的純化作用; 系列凈化柱就是采取這種獨(dú)特設(shè)計(jì)原理過柱后將干擾物雜質(zhì)等截留在柱內(nèi)填充物,樣液中的毒素不被吸附而直接通過。其顯著特點(diǎn)是,一步就可完成毒素樣品的凈化(操作步驟見下圖), 30秒左右即完成整個(gè)凈化過程,凈化效果理想, 實(shí)驗(yàn)證明,對谷物樣品PriboFast®系列凈化柱比免疫親和柱回收率還要高,其對所有真菌毒素的回收率均在85-95%; 之二是操作步驟更為簡便,凈化前也不需進(jìn)行活化、淋洗和洗脫等操作只需直接上樣,有效減少有機(jī)溶劑的使用和浪費(fèi);其操作明顯不同于免疫親和柱和固相萃取柱(SPE),后兩者凈化樣品至少需要三步 1)將樣品中的待測物吸附到柱上;2)清洗柱上的雜質(zhì);3)用有機(jī)溶劑洗脫柱子上的待測物。
其中 MFC160多功能凈化柱實(shí)現(xiàn)了一步凈化含多類毒素(黃曲霉毒素、玉米赤霉烯酮和單端孢霉烯族毒素(包括嘔吐毒素)三類)樣品的目的,過柱凈化后的樣品液可直接用于液相進(jìn)行黃曲霉毒素、玉米赤霉烯酮和單端孢霉烯族毒素(包括嘔吐毒素)三大類毒素含量的檢測,回收率達(dá)到90%以上,有效降低單個(gè)檢測成本.
總之,PriboFast®系列真菌毒素凈化柱整個(gè)凈化過程樣品處理簡單,操作簡便易行、快速準(zhǔn)確、靈敏度高、檢測限低,檢測成本低廉,適合大批量檢測,并能避免氯仿等有毒試劑的使用,在國際上不少試驗(yàn)室已得到確認(rèn),也是得到AOAC的官方認(rèn)可的檢驗(yàn)方法。目前在國內(nèi)的糧油質(zhì)檢系統(tǒng)、疾控系統(tǒng)和進(jìn)出口檢驗(yàn)已廣泛采用這種新的檢測方法,而且實(shí)踐證明,這是一種值得推廣和應(yīng)用的真菌毒素檢測新技術(shù)。
注:
注: MFC160真菌毒素多功能凈化柱(MFC,MultiSep )是國家標(biāo)準(zhǔn) GB/T 5009.23 中使用的 mycosep 226 228MFC柱的改進(jìn)型,它將極性、非極性及離子交換等多類基團(tuán)作為填充劑填充到柱體中,可選擇性吸附樣液中的脂類、蛋白類等雜質(zhì),從而對毒素樣品中黃曲霉毒素 玉米赤霉烯酮 嘔吐毒素三類毒素起到非常針對性的純化作用,過柱凈化后的樣品可以用于檢測黃曲霉毒素 玉米赤霉烯酮 嘔吐毒素三類毒素,在使用成本大大降低,有效提高就檢測效率。
|