2D與3D實時可視化細胞趨化實驗操作詳解

瀏覽次數(shù)：592　發(fā)布日期：2024-9-13　來源：本站　僅供參考，謝絕轉(zhuǎn)載，否則責任自負

趨化性試驗用于分析某種細胞類型是否直接向特定趨化因子定向和遷移。由于趨化性在癌癥發(fā)展和免疫浸潤過程中是一個特別重要的過程，趨化性試驗中常用的細胞類型是癌細胞和免疫細胞。

趨化性試驗可以研究：

目的基因敲除、敲低或過表達后細胞的趨化行為
物質(zhì)的趨化潛力
趨化性抑制劑和增強劑的作用
趨化性和化學運動性之間的區(qū)別（增強遷移）
趨化過程中的細胞信號轉(zhuǎn)導
趨化過程中細胞骨架的變化

HT-1080細胞轉(zhuǎn)染LifeAct-TagGFP2 在2D表面上趨化遷移。

2D 與 3D 趨化性檢測

許多細胞自然生長在3D環(huán)境中。體外培養(yǎng)時，細胞附著在平坦的2D表面上，其行為可能與在3D凝膠基質(zhì)中不同。在許多情況下，3D環(huán)境更接近體內(nèi)情況，在規(guī)劃趨化性試驗時應考慮到這一點。

使用µ-Slide Chemotaxis，可以輕松在水基凝膠（如Ⅰ型膠原蛋白和 Matrigel）中建立趨化梯度，因為凝膠結(jié)構(gòu)不會阻礙擴散。感興趣可以聯(lián)系我們有關 3D 趨化性測定的優(yōu)點和缺點的更多信息。

HT-1080 癌細胞在 2D 表面上粘附（左）并嵌入 3D I型膠原蛋白（右）的顯微鏡觀察示意圖。

ibidi µ-Slide Chemotaxis

在 ibidi µ-Slide Chemotaxis中，細胞會遷移，并且可以在連接兩個大型儲存器的中央通道中觀察到
具有長期穩(wěn)定性的明確線性梯度
實驗起點的細胞分布均勻
非常適合使用倒置顯微鏡進行活細胞成像
適用于：

- 2D 和 3D 檢測 - 快速和慢速遷移細胞 - 粘附和非粘附細胞

使用 µ-Slide Chemotaxis，可以在 3D 凝膠基質(zhì)或 2D 表面上培養(yǎng)細胞。本示例展示了凝膠基質(zhì)中遷移細胞的 3D 實驗。

μ-Slide Chemotaxis是為研究快速或緩慢遷移、非粘附或粘附細胞在 2D 表面或 3D 凝膠基質(zhì)上的趨化行為而開發(fā)的�？梢杂^察到 48 小時以上線性和穩(wěn)定濃度分布中的細胞遷移。由于梯度快速建立，因此還可以測量快速遷移響應（發(fā)生在 30 分鐘內(nèi)）。

使用µ-Slide Chemotaxis可以對各種細胞類型（例如內(nèi)皮細胞、成纖維細胞、癌細胞和免疫細胞）的遷移行為進行詳細而明確的分析。

參考：

Zengel P, et al. (2011) μ-Slide Chemotaxis: a new chamber for long-term chemotaxis studies. BMC Cell Biol 12:21. 10.1186/1471-2121-12-21.

Biswenger V, et al. (2018) Characterization of EGF-guided MDA-MB-231 cell chemotaxis in vitro using a physiological and highly sensitive assay system. PLoS One 13(9):e0203040. 10.1371/journal.pone.0203040.

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