培養(yǎng)細(xì)胞時(shí),何時(shí)使用培養(yǎng)瓶,何時(shí)使用孔板培養(yǎng),取決于實(shí)驗(yàn)?zāi)康暮托枰?strong>一般情況下,原代細(xì)胞培養(yǎng)和常規(guī)傳代培養(yǎng)使用培養(yǎng)瓶,可獲得大量實(shí)驗(yàn)用細(xì)胞。
細(xì)胞培養(yǎng)瓶
TIPS:什么是TC處理?
TC處理表示該器皿經(jīng)過表面的改性處理,適合貼壁細(xì)胞的培養(yǎng)。而懸浮生長(zhǎng)的細(xì)胞,就不一定需要這樣經(jīng)過特殊處理過的器皿。但經(jīng)過表面的改性處理后的細(xì)胞培養(yǎng)皿等一般也適合懸浮細(xì)胞的培養(yǎng)。
大部分動(dòng)物細(xì)胞需要貼附在一個(gè)固相界面上才能生長(zhǎng)。而只有親水的固相界面,細(xì)胞才能貼附。
最早的細(xì)胞培養(yǎng)器皿是由玻璃制作的。由于玻璃的表面是親水的,不經(jīng)過特殊的處理,普通的細(xì)胞就可以貼附生長(zhǎng)。而聚苯乙烯透光性能好,具有較好的強(qiáng)度和易塑性,并且沒有毒性,成為一次性細(xì)胞培養(yǎng)皿和細(xì)胞培養(yǎng)板等一次性細(xì)胞培養(yǎng)耗材的首選材料,然而聚苯乙烯表面是疏水的,所以需要經(jīng)過表面的改性處理,增強(qiáng)細(xì)胞吸附與蛋白結(jié)合的能力,變成親水后才能適用于細(xì)胞培養(yǎng)。
1 、如何選擇培養(yǎng)瓶、培養(yǎng)板培養(yǎng)細(xì)胞
首先,根據(jù)期望獲得的細(xì)胞產(chǎn)量來選擇,培養(yǎng)瓶是通過表面積來命名的,例如T25、T75、T175,數(shù)字就是表面積,25就是25平方厘米,如此類推;
細(xì)胞培養(yǎng)皿
2 、以細(xì)胞為載體或?qū)ο蟮膶?shí)驗(yàn)使用細(xì)胞培養(yǎng)板較好,如藥敏試驗(yàn)、MTT(96孔培養(yǎng)板)、免疫組化(6孔培養(yǎng)板)等。
細(xì)胞培養(yǎng)板
選擇好合適的孔板后,在培養(yǎng)階段,有2點(diǎn)注意事項(xiàng):
多孔板會(huì)帶板蓋,但其密封性不好,在培養(yǎng)箱內(nèi)會(huì)造成邊緣的孔位蒸發(fā)效率過高,進(jìn)而影響細(xì)胞生長(zhǎng)速率?梢栽谏w上板蓋后在縫隙處貼一圈封口膜。或者舍棄邊緣孔位,并采用添加培養(yǎng)基來代替。
NEST EDGE細(xì)胞培養(yǎng)板
EDGE細(xì)胞培養(yǎng)板周圍具有溝槽設(shè)計(jì),通過改變?cè)?6孔板的結(jié)構(gòu),在最外側(cè)孔的外側(cè)設(shè)計(jì)了不同寬度及厚度的槽形結(jié)構(gòu),因此達(dá)到最大程度消除邊緣效應(yīng)的目的,同時(shí)又保證了細(xì)胞培養(yǎng)的最佳狀態(tài)。提高了培養(yǎng)板的溫度穩(wěn)定性和均衡的濕度環(huán)境,從而減 少或消除了邊緣效應(yīng),保證了細(xì)胞生長(zhǎng)的均一性。
當(dāng)細(xì)胞種入孔內(nèi)以后,不應(yīng)該再進(jìn)行過多的震動(dòng),例如晃動(dòng)、抖動(dòng)培養(yǎng)板,而應(yīng)該輕緩的放入培養(yǎng)箱中。
如果培養(yǎng)箱由多人共用,還應(yīng)該考慮頻繁開關(guān)箱門、拿放孔板造成的震動(dòng),這些不利因素都應(yīng)該盡量減少。