貼壁細(xì)胞的多層培養(yǎng)瓶使用指南
瀏覽次數(shù):650 發(fā)布日期:2023-7-18
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貼壁細(xì)胞的多層培養(yǎng)瓶使用指南來了
貼壁細(xì)胞培養(yǎng)是生命科學(xué)領(lǐng)域中常見的實(shí)驗(yàn)技術(shù)之一。
它可以應(yīng)用于多種場景,包括但不僅限于:
藥物篩選: 通過培養(yǎng)貼壁細(xì)胞,可以測試藥物的療效和毒性,從而篩選出具有治療潛力的藥物。
細(xì)胞學(xué)研究: 貼壁細(xì)胞培養(yǎng)可以為細(xì)胞學(xué)研究提供許多有用的信息,例如細(xì)胞分裂、分化和轉(zhuǎn)化等
疾病模型: 通過培養(yǎng)患者的貼壁細(xì)胞,可以建立與某些疾病相關(guān)的細(xì)胞模型,例如癌癥。
基因編輯: 貼壁細(xì)胞培養(yǎng)可以為基因編輯提供重要的支持,例如CRISPR-Cas9基因編輯技術(shù)。
總之,貼壁細(xì)胞培養(yǎng)是一項(xiàng)非常重要的生命科學(xué)技術(shù),可以應(yīng)用于許多不同的場景和研究領(lǐng)域。
使用指南-細(xì)胞懸液接種到多層細(xì)胞培養(yǎng)瓶
1. 細(xì)胞懸液混勻: 按照實(shí)驗(yàn)要求的濃度準(zhǔn)備細(xì)胞,在培養(yǎng)基瓶、培養(yǎng)瓶或其他容器中混勻。建議的工作容積為每層30-50 mL.
2. 用移液管緊貼瓶壁緩慢地將液體加到五層細(xì)胞培養(yǎng)瓶中,避免產(chǎn)生泡沫或者氣泡(每次加液時(shí)移液管內(nèi)液體可留少許)。
注意事項(xiàng): 10 ml移液管可以伸到培養(yǎng)瓶底部使培養(yǎng)基分散開,而25 mL移液管則只能伸到NEST標(biāo)志的地方把液體分散開。
3. 把培養(yǎng)瓶有NEST標(biāo)志那一側(cè)朝向自己,順時(shí)針做斜45度左右放置一段時(shí)間,使瓶中各個(gè)隔層的液體達(dá)到平街。
4. 輕緩地將培養(yǎng)瓶水平放置于工作臺(tái)上,有NEST標(biāo)志那一面朝上。
5. 前后左右輕輕晃動(dòng)多層瓶,液體會(huì)均勻地分布在五個(gè)生長面上。
注意事項(xiàng): 搖晃的動(dòng)作要輕柔,一方面是防止起泡沫,另一方面是要防止培養(yǎng)基滲漏到下層中。
培養(yǎng)液的移除
1.抽吸法:
1)抽吸的時(shí)候,將多層瓶做斜45度,有NEST標(biāo)志的一面朝向自己
2)將移液管伸到底部抽吸培養(yǎng)基,直至完全抽吸完。
2. 傾倒法:將有NEST標(biāo)志的一面朝向自己,逆時(shí)針45度傾倒液體。
注意事項(xiàng): 抽吸培養(yǎng)液時(shí)建議使用10 mL移液管,才能將培養(yǎng)液吸盡
細(xì)胞的收集
1.用緩沖液清洗一遍以去除殘留的血清,后加入消化液 (> 5 mL層),混勻。
2.消化大約2 min (視細(xì)胞情況而定) ,用消化終止液中和消化液
3.采用移液管抽吸法或做倒法將細(xì)胞懸液置于離心管等容器中。
4.用一定量的緩沖液沖洗多層瓶三次,將沖洗液分別置于離心管中,混與計(jì)數(shù)或者傳代接種。
無錫耐思生命科技股份有限公司(以下簡稱“耐思”)于 2009 年成立,并創(chuàng)立 NEST 品牌,秉持“做高端耗材,創(chuàng)國際知名品牌”的信念,專注于生命科學(xué)領(lǐng)域產(chǎn)品的研發(fā)與制造。耐思擁有 7500m2 十萬級潔凈車間,2500m2 萬級潔凈車間,成熟的生產(chǎn)工藝、先進(jìn)的機(jī)器設(shè)備、專業(yè)的研發(fā)中心、資深的管理團(tuán)隊(duì),是國內(nèi)領(lǐng)先的醫(yī)療器械和生命科學(xué)領(lǐng)域耗材制造商。
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