細(xì)胞工廠

實(shí)戰(zhàn)操作答疑篇

通過前四期，我們對細(xì)胞工廠的應(yīng)用、操作流程、相關(guān)配件、串聯(lián)使用等方面有了詳細(xì)的了解。

但究竟如何選擇合適的細(xì)胞工廠？

新舊版細(xì)胞工廠有何不同？

不同的選擇有哪些優(yōu)勢？

 

我的細(xì)胞要轉(zhuǎn)移到細(xì)胞工廠中，應(yīng)該選擇幾層的呢？

 

可根據(jù)單個(gè)批次需要獲得的細(xì)胞數(shù)量，可以大致計(jì)算出培養(yǎng)細(xì)胞所需要用到的培養(yǎng)面積，進(jìn)一步確定所需的細(xì)胞工廠層數(shù)。

第一步:計(jì)算每層細(xì)胞工廠可能獲得的最大細(xì)胞數(shù)量

（單位面積最大細(xì)胞數(shù)量）x（632平方厘米）=每層細(xì)胞工廠可獲得的最大細(xì)胞數(shù)量

注:單位面積最大細(xì)胞數(shù)量和細(xì)胞系的種類、環(huán)境等因素有關(guān)，每個(gè)實(shí)驗(yàn)室得出的數(shù)據(jù)可能會(huì)有所差異，用戶可根據(jù)自己的實(shí)際情況獲得此數(shù)據(jù)。

例如：10^4x632平方厘米=6.3x10^6

第二步:計(jì)算每批次操作中所需的細(xì)胞層數(shù)

（每批次操作中所需的細(xì)胞）/（每層細(xì)胞工廠可獲得的最大細(xì)胞量）=所需要的細(xì)胞層數(shù)

例如：（6x10^8）/（6.3x10^6）=9.5 層，所以可以選用10層細(xì)胞工廠。
 

耐思現(xiàn)有單層，2層，5層，10層和40層的細(xì)胞工廠。

耐思從批量化、標(biāo)準(zhǔn)化制造，逐步走向定制化、個(gè)性化制造，可額外定制層數(shù)，定制出品到完成送貨周期約為1周，滿足客戶個(gè)性化層數(shù)需求。
 

細(xì)胞工廠有大小口，雙大口和雙小口，都有什么特點(diǎn)和區(qū)別呢？

大口設(shè)計(jì)，便于直接傾倒培養(yǎng)基；小口設(shè)計(jì)，便于連接管路進(jìn)行無菌操作�？筛鶕�(jù)實(shí)際操作的需求來選擇口徑大小。
 

之前用別家的總覺得不太平整，你家的有這問題嗎？

產(chǎn)品升級前后都進(jìn)行了焊接測試、中間層測第8層平面度，測試結(jié)果如下：

升級前平面度最大值1.3900，升級后最大值1.1894，且平面度較穩(wěn)定，滿足技術(shù)要求。

細(xì)胞工廠可以用來培養(yǎng)哪些細(xì)胞？
 

耐思細(xì)胞工廠可用于如疫苗、單克隆抗體或生物制藥等工業(yè)規(guī)模生產(chǎn)，適合于貼壁細(xì)胞培養(yǎng)，線性放大不會(huì)改變細(xì)胞生長的動(dòng)力學(xué)條件。如VERO、MRC-5、2BS、293T、L-929等。

我在小試時(shí)使用手動(dòng)操作，現(xiàn)在馬上要進(jìn)行中試放大，有沒有什么方案可以提高效率？

可以使用密閉管路連接的方式用細(xì)胞工廠配件將多個(gè)細(xì)胞工廠串聯(lián)起來。由于生產(chǎn)工藝的區(qū)別，在使用細(xì)胞工廠進(jìn)行大規(guī)模細(xì)胞培養(yǎng)時(shí)可能會(huì)采用不同的串聯(lián)方式，不同的生物工藝配件。


耐思生命能夠根據(jù)您的需求進(jìn)行管路的專屬定制，從批量化、標(biāo)準(zhǔn)化制造，逐步走向定制化、個(gè)性化制造，全方位寬領(lǐng)域滿足客戶所需。
 

細(xì)胞工廠細(xì)胞培養(yǎng)的時(shí)候該如何觀察細(xì)胞的狀態(tài)？如何操作？
 

對于1、2、4、10層的細(xì)胞工廠一般使用倒置顯微鏡對細(xì)胞工廠中細(xì)胞的存活率和生長狀況進(jìn)行監(jiān)測。細(xì)胞工廠中各層之間或同一層之間的培養(yǎng)環(huán)境基本相同，因此可以通過觀察底部一兩層或同一層之間的邊緣細(xì)胞狀態(tài)，來判斷整體細(xì)胞工廠中細(xì)胞的狀態(tài)。
 

如果倒置顯微鏡比較小，無法放置10層細(xì)胞工廠及40層細(xì)胞工廠，可以在培養(yǎng)中過程中將培養(yǎng)的細(xì)胞接種到另一個(gè)1層細(xì)胞工廠進(jìn)行對照，根據(jù)1層的生長狀況對10、40層細(xì)胞工廠進(jìn)行一個(gè)估計(jì)。

細(xì)胞工廠培養(yǎng)細(xì)胞的性能如何？

我們將準(zhǔn)備好的對數(shù)期VERO 細(xì)胞制成細(xì)胞懸液，以5X10/mL 的濃度接種至一個(gè)二層細(xì)胞工廠中，接種體積為400mL。


（40x 培養(yǎng)24h后觀察）


（40x 培養(yǎng)48h后觀察）


（40x 培養(yǎng)72h后觀察）
 

通過觀察可見細(xì)胞均貼壁生長，形態(tài)正常，分布均勻，生長狀態(tài)良好。

我們與市面上其他品牌的二層細(xì)胞工廠通過三天細(xì)胞培養(yǎng)后細(xì)胞消化計(jì)數(shù)。

在細(xì)胞總數(shù)上耐思細(xì)胞工廠略勝一籌。

你們細(xì)胞工廠有那些驗(yàn)證文件？我們的工業(yè)生產(chǎn)需要資料審批。

耐思細(xì)胞工廠驗(yàn)證文件重點(diǎn)集中于產(chǎn)品的安全性能驗(yàn)證和適用性能驗(yàn)證，包含原材料信息、產(chǎn)品理化測試（如熾灼殘?jiān)�、金屬元素、溶出物檢測等）、產(chǎn)品生物學(xué)測試（如體外細(xì)胞毒性試驗(yàn)、皮膚致敏試驗(yàn)、皮膚刺激試驗(yàn)、皮內(nèi)反應(yīng)試驗(yàn)、急性全身毒性測試、溶血試驗(yàn)等）、產(chǎn)品溶出物測試、產(chǎn)品細(xì)胞生長測試（如細(xì)胞生長均一性試驗(yàn)、不同品牌細(xì)胞培養(yǎng)對比等）、無菌保障及工藝信息。