細(xì)胞培養(yǎng)操作指南和注意事項
細(xì)胞培養(yǎng)
大神崛起計劃
剛接觸細(xì)胞培養(yǎng)的小白，生物實驗技術(shù)理論知識一堆，但真正到操作環(huán)節(jié)手忙腳亂，一堆“黑話”一頭霧水，常常不知從哪里下手。
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社會上習(xí)慣于把科學(xué)和技術(shù)連在一起，統(tǒng)稱為科學(xué)技術(shù)，簡稱科技。科學(xué)解決理論問題，技術(shù)解決實際問題�？萍家I(lǐng)我們走向更好的生活；
現(xiàn)代生物技術(shù)一般認(rèn)為包括基因工程技術(shù)、細(xì)胞工程技術(shù)、酶工程技術(shù)和發(fā)酵工程技術(shù)，而這些技術(shù)的發(fā)展幾乎都與細(xì)胞培養(yǎng)有密切關(guān)系；
醫(yī)藥領(lǐng)域（基因工程藥物或疫苗在研究生產(chǎn)過程中很多是通過細(xì)胞培養(yǎng)來實現(xiàn)）、基因工程（乙肝疫苗很多是以 CHO 細(xì)胞作為載體）、細(xì)胞工程（雜交瘤單克隆抗體，完全是通過細(xì)胞培養(yǎng)來實現(xiàn)），既使是現(xiàn)在飛速發(fā)展的基因工程抗體也離不開細(xì)胞培養(yǎng)；正在倍受重視的基因治療、體細(xì)胞治療也要經(jīng)過細(xì)胞培養(yǎng)過程才能實現(xiàn)，發(fā)酵工程和酶工程有的也與細(xì)胞培養(yǎng)密切相關(guān)。
總之,細(xì)胞培養(yǎng)在整個生物技術(shù)產(chǎn)業(yè)的發(fā)展中起到了很關(guān)鍵的核心作用。
細(xì)胞培養(yǎng)
將活細(xì)胞（尤其是分散的細(xì)胞）在體外進(jìn)行培養(yǎng)的方法稱為細(xì)胞體外培養(yǎng)。狹義的主要是指分離（散）細(xì)胞培養(yǎng)，廣義的還包括單（個）細(xì)胞培養(yǎng)又稱克隆，是指單個細(xì)胞通過有絲分裂形成的細(xì)胞群體。
初次培養(yǎng)。即培養(yǎng)物一經(jīng)接種到培養(yǎng)皿中就不再分割，任其生長繁殖而不更換生長器皿。
傳代培養(yǎng)
隨著培養(yǎng)時間的延長、細(xì)胞不斷分裂繁殖，細(xì)胞之間相互接觸會發(fā)生接觸性抑制，生長速度逐漸減慢甚至停止。培養(yǎng)皿中營養(yǎng)物逐漸不足，代謝產(chǎn)物不斷累積，不利于細(xì)胞繼續(xù)生長。在這種情況下，需要將培養(yǎng)物分割成小的部分，重新接到培養(yǎng)器皿中進(jìn)行再培養(yǎng)。
細(xì)胞系
原代細(xì)胞培養(yǎng)物經(jīng)首次傳代培養(yǎng)后所繁殖的細(xì)胞群體。狹義的是指可連續(xù)傳代的細(xì)胞，廣義的是指可傳代的細(xì)胞。正常細(xì)胞通常只能分裂有限的次數(shù)，隨后就會喪失增殖的能力，這是一個由遺傳決定的事件，被稱為衰老。這種細(xì)胞系被稱為有限細(xì)胞系；一些細(xì)胞系會通過轉(zhuǎn)化的過程變?yōu)橛郎约?xì)胞系，這一過程可自然發(fā)生，也可經(jīng)化學(xué)或病毒誘導(dǎo)發(fā)生。有限細(xì)胞系發(fā)生轉(zhuǎn)化獲得無限分裂能力后就成為連續(xù)細(xì)胞系。
03 細(xì)胞培養(yǎng)的環(huán)境
細(xì)胞培養(yǎng)實驗室的主要要求是時時維持細(xì)胞培養(yǎng)工作區(qū)域處于無菌狀態(tài)，獲得無菌條件最簡單、經(jīng)濟的方式就是使用細(xì)胞培養(yǎng)超凈臺。
細(xì)胞培養(yǎng)超凈臺應(yīng)足夠一人使用，內(nèi)外部均采用易清潔設(shè)計，具有充足的照明，使用舒適。
使用過程中需保持細(xì)胞培養(yǎng)超凈臺內(nèi)工作空間整潔有序，將所有物品放在直視范圍內(nèi)，便于取用。使用前向放入細(xì)胞培養(yǎng)超凈臺內(nèi)的物品噴灑70%的乙醇，擦拭清潔，進(jìn)行消毒。
細(xì)胞培養(yǎng)通超凈臺的物品擺放一般遵循以下右手使用習(xí)慣，可根據(jù)特殊實驗中增加的物品進(jìn)行相應(yīng)的適當(dāng)改動。
超凈臺中部
擺放細(xì)胞培養(yǎng)類耗材。耐思細(xì)胞培養(yǎng)類耗材除了板、瓶、皿等常規(guī)耗材，更具備高品質(zhì)大規(guī)模生物工藝器皿，規(guī)格全面，型號豐富。
超凈臺右前方
擺放移液耗材及器械，便于取用。耐思液體轉(zhuǎn)移類耗材多樣，移液吸頭、離心管、真空過濾器、血清移液管等應(yīng)有盡有。
超凈臺右后方
擺放生物試劑和培養(yǎng)基，便于吸取。耐思生物試劑類產(chǎn)品包含核酸提取與純化試劑、PCR/RT-PCR相關(guān)試劑、實驗室常規(guī)試劑、基因敲除試劑等。
超凈臺中后部
擺放試管架等，用于固定其他試劑。
超凈臺左后方
擺放小型容器，用于盛放廢液。
寫在最后
養(yǎng)細(xì)胞是細(xì)胞實驗的基礎(chǔ)
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