細(xì)胞在三維環(huán)境中與周?chē)募?xì)胞外基質(zhì)、其它細(xì)胞相互作用,接受各種信號(hào),指導(dǎo)其增殖、分化或遷移等行為。在二維培養(yǎng)體系下,細(xì)胞的各種行為與體內(nèi)生理?xiàng)l件下的行為存在明顯差異。諸多生理指標(biāo)都顯著不同,如增殖時(shí)間的長(zhǎng)短,藥物作用于細(xì)胞呈現(xiàn)的效應(yīng)。近年越來(lái)越多的證據(jù)表明,三維細(xì)胞培養(yǎng)比二維培養(yǎng)更接近體內(nèi)的生理環(huán)境,為我們更加準(zhǔn)確的了解體內(nèi)細(xì)胞行為和生理調(diào)節(jié)機(jī)制提供了條件?梢灶A(yù)見(jiàn),未來(lái)在高通量,自動(dòng)化,低成本,廣應(yīng)用性和高預(yù)測(cè)性等方面3D培養(yǎng)將逐步突破并日趨成熟、完善,2D培養(yǎng)向3D的轉(zhuǎn)變成為必然的發(fā)展趨勢(shì)和時(shí)代潮流。
當(dāng)前市場(chǎng)上有多種類(lèi)型的3D培養(yǎng)系統(tǒng),根據(jù)產(chǎn)品是否為細(xì)胞提供支撐(支架)材料大體可分為兩種類(lèi)型:基于scaffold的培養(yǎng)體系和無(wú)scaffold的培養(yǎng)體系。Scaffold則又有天然成分和人工合成成分之分。那么我們要如何選擇最適合自己的3D培養(yǎng)系統(tǒng)呢?這取決于我們的實(shí)驗(yàn)需求,舉例來(lái)說(shuō),實(shí)驗(yàn)的細(xì)胞類(lèi)型、實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)、試驗(yàn)規(guī)模、是否共培養(yǎng)、分析類(lèi)型、是否收集細(xì)胞用于分析、所需通量及可能的臨床使用等等都是決定性的因素。
目前,有支架的系統(tǒng),如3D Biomatrix公司的Perfecta3D ®懸滴板,InfiniteBio公司SCIVAX 3D Nano Culture® Plate;無(wú)支架的3D培養(yǎng)系統(tǒng)有Microtissues公司和Nano3D Biosciences公司。Microtissues能為您提供由瓊脂糖制成的3D Petri Dish®系統(tǒng), Nano3D Biosciences公司的Bio-Assembler™1采用的方法是磁懸浮技術(shù)。
普瑞麥迪公司與時(shí)俱進(jìn),不僅可以提供NSB公司有支架的ANFS系列3D培養(yǎng)皿,同時(shí)也可以提供AIM公司無(wú)支架的3D細(xì)胞培養(yǎng)芯片,
AIM基于微流體技術(shù)設(shè)計(jì)的3D細(xì)胞培養(yǎng)芯片,微流體設(shè)備有一套培養(yǎng)組,每個(gè)培養(yǎng)組都有三個(gè)培養(yǎng)室,中間的用于任何類(lèi)型的細(xì)胞以及水凝膠,另外兩個(gè)用于培養(yǎng)額外的細(xì)胞?梢宰屟芯咳藛T在一種模擬自然組織的三維水凝膠環(huán)境中同時(shí)培養(yǎng)多種細(xì)胞。水凝膠培養(yǎng)室每邊都有開(kāi)口,因此細(xì)胞間能夠相互作用,就像在活體里一樣。癌癥藥物以及其他試劑可以被加入到這些培養(yǎng)室里,用以觀察細(xì)胞在人體內(nèi)的反應(yīng)。
麻省理工學(xué)院機(jī)械工程與生物過(guò)程學(xué)教授Roger Kamm解釋道,這種設(shè)備的最大好處是可以讓研究人員更好地研究生物過(guò)程,比如癌癥轉(zhuǎn)移,并且讓他們能夠更精確地捕捉癌癥細(xì)胞對(duì)化療藥物的反應(yīng)。
Kamm說(shuō),其他公司設(shè)計(jì)的用于三維細(xì)胞培養(yǎng)的系統(tǒng)包括用水凝膠填注的深培養(yǎng)皿,由于這些深培養(yǎng)皿和顯微鏡之間必須保持一定距離,因此很難拍到高分辨率的圖像。但是AIM Biotech公司的這套儀器卻能像傳統(tǒng)培養(yǎng)皿一樣被直接放到顯微鏡下面進(jìn)行觀察,這對(duì)成像來(lái)說(shuō)非常有利。
這個(gè)圖片展示了內(nèi)皮細(xì)胞在2維媒質(zhì)槽中排列的樣子,它們沿著垂直的膠原質(zhì)的表面形成一堵“墻”。內(nèi)皮細(xì)胞核是紫色的,細(xì)胞間粘著劑血管內(nèi)皮細(xì)胞鈣黏蛋白是綠色的。圖片來(lái)源:麻省理工的研究人員。研究人員如是說(shuō):“用這個(gè)儀器可以在蓋片上的200微米內(nèi)拍攝,因此可以得到高分辨率的實(shí)時(shí)圖片和影片!
ANFS系列3D培養(yǎng)皿為NSB獨(dú)家開(kāi)發(fā)的拓?fù)錁?gòu)造“800nm 1:1”的設(shè)計(jì),非均一納米級(jí)凹槽構(gòu)造, 得該培養(yǎng)皿為細(xì)胞的生長(zhǎng)提供了一個(gè)類(lèi)似體內(nèi)的生理環(huán)境,尤其適用于心肌細(xì)胞的培養(yǎng)。
應(yīng)用總結(jié)
血管再生
癌細(xì)胞轉(zhuǎn)移
細(xì)胞入侵,遷移
疾病模型的構(gòu)建
藥物篩選
科學(xué)研究
3D細(xì)胞培養(yǎng)的未來(lái)
目前已有相當(dāng)多的實(shí)驗(yàn)證據(jù)證實(shí),盡管3D細(xì)胞培養(yǎng)與體內(nèi)環(huán)境并不是完全相同的,但它顯然比傳統(tǒng)2D細(xì)胞培養(yǎng)更接近體內(nèi)的條件。在3D培養(yǎng)體系中進(jìn)一步分析以往2D細(xì)胞實(shí)驗(yàn)所得的結(jié)果,將成為未來(lái)的研究熱點(diǎn)!拔覀冞^(guò)去的2D細(xì)胞實(shí)驗(yàn)得到了許多寶貴的成果,而現(xiàn)在到了進(jìn)一步深化這些研究的時(shí)候了,”Schrader說(shuō)!皩2D體外實(shí)驗(yàn)推進(jìn)到3D細(xì)胞體系的層面,將大大加快將新藥推向市場(chǎng)的速度,降低藥物研發(fā)的成本。”