截止目前,針對疫情相關(guān)人群做新冠肺炎篩查時,主要采用鼻咽拭子核酸檢測,原因是方便快捷,適合大規(guī)模篩查。但是,對于一些無癥狀感染者或輕癥感染者來說,感染后病情恢復(fù)得很快,可能3至5天咽部核酸就檢測不到了。通過研究發(fā)現(xiàn),一部分感染者糞便或肛拭子核酸陽性的持續(xù)時間比上呼吸道持續(xù)時間更長。因此,增加肛拭子等復(fù)雜樣本的核酸檢測能夠提高感染者檢出率,減少漏診。
日前,湖南省疾控研究人員對已經(jīng)確診的3例新型冠狀病毒肺炎患者不同時間的全血、尿液、糞便標(biāo)本同時進(jìn)行qPCR和Naica數(shù)字PCR(cd-PCR)的核酸檢測,并比較了兩種方法檢測各類樣本中2019-nCoV的差異性,提出改進(jìn)2019-nCoV核酸檢測的綜合策略,為核酸檢測陰性患者提供更多診斷支持。
本實(shí)驗(yàn)中數(shù)字PCR在病例發(fā)病早、中、晚期標(biāo)本中均能檢測到陽性微滴,而qPCR漏檢了發(fā)病小于5天的標(biāo)本,檢測到的陽性核酸均以中晚期為主。這也解釋了受檢測方法靈敏度的局限性,目前大部分假陰性患者都處于疾病發(fā)展的早期。此外,在本次實(shí)驗(yàn)中數(shù)字PCR在重癥病例的三種標(biāo)本中均測到陽性微滴,但因?yàn)檠、尿和可疑糞便的標(biāo)本病毒載量偏低,qPCR檢測均為陰性。
總之,數(shù)字PCR技術(shù)可以有效克服qPCR靈敏度不足的難題,捕捉到病毒載量較低的血液、尿液和可疑的糞便或肛拭子標(biāo)本,是qPCR的有益補(bǔ)充,為幫助臨床醫(yī)生準(zhǔn)確判斷早期感染及患者是否真正痊愈起到了積極的作用,對2019-nCoV的長期監(jiān)控有重要的意義。
Naica數(shù)字PCR技術(shù)進(jìn)行新冠病毒檢測,依托高靈敏度、全封閉、判讀快捷等優(yōu)勢,可應(yīng)用于以下場景:
1. 低濃度樣本檢測,如ct值>37個循環(huán)的樣本,ct值為零的高危密接樣本,排除假陰性結(jié)果;
2. 醫(yī)院樣本的準(zhǔn)確復(fù)核;
3. 出院標(biāo)準(zhǔn)的確證;
4. 陽性病人的出院后定期跟蹤檢測;
5.取樣困難病人的復(fù)雜樣本檢測:血漿、糞便、尿液等;
6.捐獻(xiàn)庫、樣本庫、血庫中樣本新冠篩查;
7.群采檢測和單采群檢,提高日檢測能力,篩選靈敏度高。