圖1

圖2

 

圖3

遷移監(jiān)測
將細(xì)胞置于培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。根據(jù)實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)，若使用顯微鏡則需分別在不同時(shí)間點(diǎn)（如6小時(shí)、12小時(shí)、24小時(shí)等）觀察并拍攝劃痕區(qū)域的細(xì)胞遷移情況。每個(gè)時(shí)間點(diǎn)要保持相同的拍攝條件和位置。

若使用成像儀，選好點(diǎn)位，設(shè)置好拍攝間隔時(shí)間與循環(huán)數(shù)即可（建議間隔時(shí)間2h，循環(huán)數(shù)24）。

數(shù)據(jù)分析
若用顯微鏡，需要使用圖像分析軟件（如ImageJ）來測量不同時(shí)間點(diǎn)劃痕的寬度，計(jì)算細(xì)胞遷移的距離或劃痕閉合率。根據(jù)實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)，評(píng)估不同處理?xiàng)l件下的細(xì)胞遷移情況。
 
若使用成像儀，通過STAT軟件自動(dòng)生成劃痕曲線及相關(guān)數(shù)據(jù)：包括相關(guān)的劃痕定量曲線，自動(dòng)給出傷口匯合度，相對傷口密度，傷口寬度等定量數(shù)據(jù)。
 

圖4 每1h拍攝一次后，通過成像儀得到的細(xì)胞生長曲線。

還可搭載選配的劃痕分析軟件，得到細(xì)胞遷移（劃痕實(shí)驗(yàn)）實(shí)驗(yàn)中自動(dòng)生成劃痕曲線及相關(guān)數(shù)據(jù)：包括相關(guān)的劃痕定量曲線，傷口匯合度，相對傷口密度，傷口寬度等定量數(shù)據(jù)
 

圖5 劃痕選配軟件可以得到的更多更全面的定量數(shù)據(jù)

注意事項(xiàng)
劃痕操作要輕柔均勻，避免對細(xì)胞造成過度損傷。
劃痕后的清洗步驟要仔細(xì)，確保去除掉脫落的細(xì)胞碎片。
實(shí)驗(yàn)過程中盡量減少培養(yǎng)板的移動(dòng)，防止細(xì)胞位置變化影響結(jié)果。
每個(gè)條件需至少重復(fù)3個(gè)孔，以確保數(shù)據(jù)的可靠性和重復(fù)性。
 
預(yù)期結(jié)果
未處理組的劃痕會(huì)隨時(shí)間逐漸愈合，細(xì)胞向劃痕區(qū)域遷移，劃痕寬度逐漸減小。
處理組則根據(jù)處理的不同，可能出現(xiàn)細(xì)胞遷移加快或減慢的現(xiàn)象。