最初，3T3細(xì)胞系是由George Todaro和Howard Green在1962年構(gòu)建的永生化細(xì)胞系，來(lái)自小鼠胚胎的成纖維細(xì)胞。這些細(xì)胞在低密度條件下培養(yǎng)，可以持續(xù)分裂并增殖。小鼠胚胎成纖維細(xì)胞系是通過(guò)克隆分離得到的3T3（Swiss小白鼠）的連續(xù)亞株，通過(guò)特定的培養(yǎng)條件和誘導(dǎo)因子（如胰島素、地塞米松和異丁基甲基黃嘌呤等）誘導(dǎo)3T3-L1細(xì)胞分化為成熟的脂肪細(xì)胞。這個(gè)特性使得3T3-L1細(xì)胞系成為研究脂肪細(xì)胞生物學(xué)的重要模型，廣泛應(yīng)用于研究脂肪細(xì)胞的分化、代謝及相關(guān)疾�。ㄈ缣悄虿�、肥胖癥）。
    在體內(nèi)，3T3-L1前體細(xì)胞通過(guò)特定的信號(hào)刺激（如胰島素、類(lèi)固醇和其他代謝因子）被誘導(dǎo)分化為脂肪細(xì)胞�？梢岳�用3T3-L1研究脂肪合成相關(guān)基因如脂肪酸合成酶（FAS）、甘油三酯合成酶（DGAT）C/EBPα和PPARγ，這些基因是脂肪細(xì)胞分化的重要轉(zhuǎn)錄因子， 使用CRISPR/Cas9等基因編輯技術(shù)，可以研究特定基因在脂肪細(xì)胞功能和代謝中的作用。
研究者可以利用3T3-L1分化成脂肪細(xì)胞評(píng)估新藥對(duì)脂肪生成、脂肪代謝和胰島素敏感的影響，通常誘導(dǎo)3T3-L1的分化成脂肪細(xì)胞的方式是雞尾酒誘導(dǎo)法。  
*雞尾酒誘導(dǎo)法實(shí)驗(yàn)方案材料準(zhǔn)備：

• 細(xì)胞株：3T3-L1細(xì)胞
• 培養(yǎng)基：
  • DMEM（高糖型）
  • 胎牛血清（FBS）
  • 青霉素-鏈霉素（Penicillin-Streptomycin）
• 誘導(dǎo)液：
  • Dexamethasone（1 µM）
  • Insulin（10 µg/mL）
  • 3-isobutyl-1-methylxanthine (IBMX)（0.5 mM）
• 培養(yǎng)器具：培養(yǎng)瓶、培養(yǎng)皿

實(shí)驗(yàn)步驟

• 細(xì)胞培養(yǎng)：
  • 將3T3-L1細(xì)胞在DMEM培養(yǎng)基中，添加10% FBS和1%青霉素-鏈霉素，在37°C、5% CO₂的條件下培養(yǎng)。
• 細(xì)胞接種：
  • 當(dāng)細(xì)胞融合度達(dá)到約80%時(shí)，用胰蛋白酶消化細(xì)胞，離心后重新懸浮于培養(yǎng)基中。
  • 接種于培養(yǎng)皿中，繼續(xù)培養(yǎng)至細(xì)胞密度達(dá)到約100%（接種后約2-3天）。
• 誘導(dǎo)分化：
  • 在細(xì)胞達(dá)到完全融合后，換成誘導(dǎo)液（包含Dexamethasone、Insulin和IBMX），在37°C培養(yǎng)48小時(shí)。
• 維持培養(yǎng)：
  • 誘導(dǎo)后48小時(shí)，換成含有Insulin（10 µg/mL）的培養(yǎng)基，繼續(xù)培養(yǎng)2-3天。
• 后續(xù)培養(yǎng)：
  • 每隔幾天更換培養(yǎng)基，直到細(xì)胞完全分化（一般需要7-10天）。
• 分化觀察：
  • 通過(guò)油紅O染色等方法觀察細(xì)胞內(nèi)脂肪滴的形成。

• 注意事項(xiàng)
  • 誘導(dǎo)液的成分和濃度可能需要根據(jù)實(shí)驗(yàn)需求進(jìn)行優(yōu)化。
  • 確保無(wú)菌操作，避免細(xì)胞污染。
  • 定期觀察細(xì)胞狀態(tài)，確保細(xì)胞健康。

3T3-L1細(xì)胞形態(tài)特點(diǎn)：
    3T3-L1細(xì)胞是一種小鼠前脂肪細(xì)胞系，其形態(tài)特征包括扁平或多邊形的細(xì)胞形狀，細(xì)胞較大且通常呈現(xiàn)聚集或連片生長(zhǎng)的狀態(tài)。在誘導(dǎo)分化后，細(xì)胞會(huì)變得更圓，并開(kāi)始形成脂滴。 
3T3-L1形態(tài)圖
    為了更深入地了解3T3-L1細(xì)胞的行為和特性，使用康和達(dá)全自動(dòng)活細(xì)胞成像儀 Celloger^® Pro 進(jìn)行實(shí)時(shí)拍攝。這款設(shè)備結(jié)合了傳統(tǒng)顯微鏡的光學(xué)技術(shù)、先進(jìn)的數(shù)字成像技術(shù)和軟件自動(dòng)化技術(shù)，為成骨細(xì)胞的研究提供了前所未有的便利。

3T3-L1 (Fibroblasts(Mouse))
Morphology	Fibroblast
Culture Properties	Adherent

臨床意義
    3T3-L1細(xì)胞在研究多種與代謝相關(guān)疾�。ㄈ绶逝�、糖尿病和心血管疾�。┓矫姘l(fā)揮了重要作用。以下是一些關(guān)鍵點(diǎn)：

• 肥胖：3T3-L1細(xì)胞分化為脂肪細(xì)胞的過(guò)程幫助研究脂肪組織如何影響全身代謝，以及如何通過(guò)調(diào)節(jié)脂肪細(xì)胞功能來(lái)預(yù)防和治療肥胖。
• 2型糖尿�。和ㄟ^(guò)觀察3T3-L1細(xì)胞對(duì)胰島素的反應(yīng)，研究人員可以了解胰島素抵抗的機(jī)制，進(jìn)而探索改善胰島素敏感性的方法。
• 炎癥：3T3-L1細(xì)胞能夠研究肥胖相關(guān)的慢性炎癥，因?yàn)榉逝謺?huì)導(dǎo)致脂肪組織中的炎癥因子釋放，這與代謝綜合癥密切相關(guān)。
• 脂肪代謝異常：3T3-L1細(xì)胞還用于研究脂肪酸氧化、脂肪合成等代謝途徑的調(diào)控，幫助理解代謝異常如何影響健康。
• 藥物篩選：通過(guò)3T3-L1細(xì)胞模型，可以篩選和評(píng)估新藥物對(duì)脂肪細(xì)胞功能和代謝的影響，為新療法的開(kāi)發(fā)提供基礎(chǔ)。

 
活細(xì)胞成像儀：洞察生命的微觀世界
    Celloger^® Pro 活細(xì)胞成像儀，憑借出眾的圖像質(zhì)量和便利性，給科研人員提供了更加先進(jìn)的功能。通過(guò)在培養(yǎng)箱內(nèi)實(shí)時(shí)監(jiān)測(cè)細(xì)胞，可以實(shí)現(xiàn)在不破壞細(xì)胞自然生長(zhǎng)環(huán)境的情況下無(wú)縫觀察和追蹤細(xì)胞動(dòng)態(tài)。雙熒光和明場(chǎng)顯微鏡可以同時(shí)可視化多個(gè)標(biāo)記，多點(diǎn)延時(shí)成像可以捕獲不同位點(diǎn)的細(xì)胞動(dòng)態(tài)變化。無(wú)論是觀察3T3-L1細(xì)胞的生長(zhǎng)動(dòng)態(tài)，還是監(jiān)測(cè)其在不同條件下的形態(tài)變化，Celloger^® Pro 活細(xì)胞成像儀都能輕松應(yīng)對(duì)，讓每一個(gè)細(xì)微的生命瞬間都無(wú)所遁形。 
完美結(jié)合：開(kāi)啟藥物篩選的新篇章
    在利用Celloger活細(xì)胞成像儀，可以被用來(lái)觀察3T3-L1細(xì)胞在不同條件下的生理變化，比如脂肪滴的形成、3T3-L1細(xì)胞增殖、凋亡等，利用Celloger活細(xì)胞成像儀，評(píng)估新藥對(duì)糖尿病或者脂肪類(lèi)疾病的影響，讓藥物篩選更加精準(zhǔn)。
    因此，我們誠(chéng)摯邀請(qǐng)廣大科研人員加入我們的行列，共同探索藥物篩選的新方式，利用活細(xì)胞成像儀的強(qiáng)大功能，開(kāi)啟藥物篩選的新篇章。讓我們攜手并進(jìn)，在藥物篩選的征途中，創(chuàng)造更加輝煌的明天！
 
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• 輕松實(shí)現(xiàn)實(shí)時(shí)監(jiān)測(cè)

遠(yuǎn)程監(jiān)控培養(yǎng)箱內(nèi)的活細(xì)胞，不干擾適合細(xì)胞培養(yǎng)環(huán)境。可以實(shí)時(shí)監(jiān)控細(xì)胞，也可以利用延時(shí)拍攝功能，自動(dòng)拍攝細(xì)胞圖像，只需點(diǎn)擊即可輕松制作延時(shí)視頻。

• 多孔位延時(shí)成像功能

Celloger^® Pro 通過(guò)自動(dòng)移動(dòng)的集成相機(jī)和固定在平臺(tái)的培養(yǎng)耗材和樣本，在多個(gè)位點(diǎn)進(jìn)行細(xì)胞成像。這樣確保了細(xì)胞的穩(wěn)定環(huán)境，從而提高了圖像質(zhì)量和研究準(zhǔn)確性。

• 熒光和明場(chǎng)鏡頭

憑借雙色熒光和明場(chǎng)鏡頭，Celloger^® Pro可以拍攝高質(zhì)量和高分辨率圖片。

• 可更換的物鏡

Celloger^® Pro為用戶提供可更換的物鏡，為研究人員的不同需求提供靈活性。有2X，4X和10X的物鏡供選擇，用戶可以自由切換。

• 兼容多種培養(yǎng)容器

Celloger^® Pro 適配多種holder以適用多種不同類(lèi)型的細(xì)胞培養(yǎng)容器，包括孔板、T形瓶、載玻片。

• Celloger^® Pro 應(yīng)用場(chǎng)景

來(lái)源：
Teixeira C, Sousa AP, Santos I, Rocha AC, Alencastre I, Pereira AC, Martins-Mendes D, Barata P, Baylina P, Fernandes R. Enhanced 3T3-L1 Differentiation into Adipocytes by Pioglitazone Pharmacological Activation of Peroxisome Proliferator Activated Receptor-Gamma (PPAR-γ). Biology (Basel). 2022 May 24;11(6):806. doi: 10.3390/biology11060806. PMID: 35741327; PMCID: PMC9219682.