近期，來自美國各地的 60 多名科學(xué)家簽署了一封致美國FDA的信函，建議該機(jī)構(gòu)將 T 細(xì)胞作為衡量COVID-19疫苗有效性的指標(biāo)。通常，疫苗的有效性是通過抗體反應(yīng)來衡量的，但科學(xué)家們正在推動(dòng)將T細(xì)胞視為疫苗長期成功的一個(gè)因素。
  簽署人之一，賓夕法尼亞大學(xué)佩雷​​爾曼醫(yī)學(xué)院系統(tǒng)藥理學(xué)和轉(zhuǎn)化治療學(xué)系主任 E. John Wherry 指出，對于許多疾病，尤其是 COVID-19，在涉及疫苗保護(hù)人免受疾病與簡單感染的能力時(shí)，似乎存在很多誤解。“很明顯，隨著時(shí)間的推移，T細(xì)胞反應(yīng)非常強(qiáng)大且非常穩(wěn)定。并且抗體保護(hù)和提供屏障阻止病毒進(jìn)入的想法符合輕度感染與疾病的表現(xiàn)，而T細(xì)胞可以防止進(jìn)展為嚴(yán)重疾病”。

現(xiàn)在，隨著Omicron在COVID-19領(lǐng)域占據(jù)主導(dǎo)地位，科學(xué)家們正在敦促FDA重新考慮該如何定義免疫反應(yīng)。潛在的新變種仍然可能出現(xiàn)，并且持續(xù)的疫苗加強(qiáng)接種并非對所有地區(qū)可行的。聯(lián)名科學(xué)家們正在請求圍繞COVID-19進(jìn)行更多研究，其中包括T細(xì)胞，迄今為止，這些研究在很大程度上被忽視了。信中寫道“如果自COVID-19大流行開始以來收集了詳盡的更廣泛的適應(yīng)性免疫反應(yīng)（包括（抗體）和 T 細(xì)胞）數(shù)據(jù)，我們將更好地了解新興變體帶來的風(fēng)險(xiǎn)……。檢查 T-細(xì)胞反應(yīng)可用于臨床診斷和管理、保護(hù)性免疫評估和疫苗評估”。
  到目前為止，制藥行業(yè)包括COVID-19疫苗/治療性藥物/預(yù)防性藥物幾乎完全專注于抗體。雖然抗體可以幫助預(yù)防感染，但有助于長期恢復(fù)的T細(xì)胞在很大程度上被拋在了后面。T 細(xì)胞有助于刺激B細(xì)胞產(chǎn)生抗體，還可以轉(zhuǎn)化為記憶CD8 T細(xì)胞，提供持久的免疫反應(yīng)。

2020 年 6 月，Adaptive Biotechnologies與 Microsoft 合作建立了一個(gè)包含 COVID-19 患者去識別血液樣本的數(shù)據(jù)庫。他們的目標(biāo)是測量和分析不同的免疫反應(yīng)——特別是T細(xì)胞對病毒的反應(yīng)。Adaptive公司發(fā)現(xiàn)T細(xì)胞反應(yīng)的不同，是不同COVID-19變體和不同疫苗造成的免疫反應(yīng)主要區(qū)別之一。

貝絲以色列女執(zhí)事醫(yī)療中心 發(fā)表了一項(xiàng)評估強(qiáng)生公司COVID-19疫苗免疫原性的研究。研究發(fā)現(xiàn)，在曾一度在南非占主導(dǎo)地位的 Beta 變體的情況下，強(qiáng)生的疫苗并不能很好地產(chǎn)生抗體，但T細(xì)胞反應(yīng)仍然有效。

“這有點(diǎn)自相矛盾。我們知道南非變種似乎逃脫了一些中和抗體。然而，當(dāng)您看到避免死亡或住院的硬終點(diǎn)時(shí)，該疫苗在南非的表現(xiàn)相當(dāng)不錯(cuò)，” Adaptive首席醫(yī)療官Lance Baldo醫(yī)學(xué)博士說。“所以，理論是：如果抗體沒有像我們預(yù)期的那樣提供保護(hù)，那么實(shí)際上是 T 細(xì)胞提供了這種保護(hù)嗎？”
總之，抗體至關(guān)重要，但事實(shí)上這些疫苗會(huì)誘導(dǎo)非常強(qiáng)的T細(xì)胞反應(yīng)，如果將T細(xì)胞反應(yīng)納入衡量指標(biāo)的建議被FDA采納，制藥公司提交疫苗數(shù)據(jù)時(shí)所需的免疫反應(yīng)測量將被進(jìn)一步標(biāo)準(zhǔn)化，或許能夠促進(jìn)未來更有效的疫苗研發(fā)，更好地了解可能的疫苗副作用。
 
T細(xì)胞反應(yīng)檢測工具
目前，研究T細(xì)胞免疫原性反應(yīng)的主要檢測工具：ELISPOT檢測和流式胞內(nèi)細(xì)胞因子檢測手段，兩種方法各有優(yōu)缺點(diǎn)（如下表）。在COVID-19疫苗評估T細(xì)胞反應(yīng)時(shí)同時(shí)使用，互相驗(yàn)證。

	ELISpot/FluoroSpot技術(shù)	FCM-ICS技術(shù)
通量	高通量	相對較低
樣本	活細(xì)胞；細(xì)胞數(shù)要求相對較少	活細(xì)胞，細(xì)胞數(shù)要求高
檢測結(jié)果	單細(xì)胞水平/分泌因子的細(xì)胞頻率	單細(xì)胞水平/分泌因子細(xì)胞的占比
分析類型	功能分析	功能/表型分析(surface markers)
檢測指標(biāo)	單因子檢測(ELISPOT) 多因子檢測 (FluoroSpot)	多因子/多表型檢測
靈敏度	靈敏度高	靈敏度中等
代謝動(dòng)力學(xué)	刺激期間累積分泌的細(xì)胞因子	阻斷處理4-6h內(nèi)累積在胞內(nèi)的細(xì)胞因子
價(jià)格	適中	昂貴

 

1. Marsh, G. A, et al. ., et al. (2021). ChAdOx1 nCoV-19 (AZD1222) vaccine candidate significantly reduces SARS-CoV-2 shedding in ferrets. npj Vaccines. [研究內(nèi)容：新冠疫苗  物種：雪貂   檢測內(nèi)容：IFN-g T細(xì)胞 ELISPOT ]
2. Achiron, A, et al. ., et al. (2021). Humoral immune response in multiple sclerosis patients following PfizerBNT162b2 COVID19 vaccination: Up to 6 months cross-sectional study. J Neuroimmunol.[研究內(nèi)容：新冠疫苗 物種：人  檢測內(nèi)容：IgG B細(xì)胞ELISPOT  IFN-g/IL-2 T細(xì)胞Fluorospot 讀板儀：Mabtech IRIS]
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4. Varnaitė R, García M, Glans H, et al. Expansion of SARS-CoV-2–specific antibody-secreting cells and generation of neutralizing antibodies in hospitalized COVID-19 patients[J]. The Journal of Immunology, 2020, 205(9): 2437-2446.[研究內(nèi)容：新冠疫苗  物種：人   檢測內(nèi)容：B細(xì)胞三色Fluorospot  讀板儀：Mabtech IRIS]
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13. Sekine T, Perez-Potti A, Rivera-Ballesteros O, et al. Robust T cell immunity in convalescent individuals with asymptomatic or mild COVID-19[J]. Cell, 2020, 183(1): 158-168. e14.[研究內(nèi)容：SARS-CoV2 物種：人  檢測內(nèi)容： IFN-g T細(xì)胞ELISPOT ]
14. Bonifacius A, Tischer-Zimmermann S, Dragon A C, et al. COVID-19 immune signatures reveal stable antiviral T cell function despite declining humoral responses[J]. Immunity, 2021, 54(2): 340-354. e6.[研究內(nèi)容：SARS-CoV2 物種：人  檢測內(nèi)容： IFN-g T細(xì)胞ELISPOT   IFN-g/顆粒酶 T細(xì)胞Fluorospot實(shí)驗(yàn)]

 

高端：Mabtech IRIS	基礎(chǔ)：Mabtech Astor
-明場ELISPOT計(jì)數(shù)和數(shù)據(jù)分析 -四色FluoroSpot計(jì)數(shù)和數(shù)據(jù)分析	-明場ELISPOT計(jì)數(shù)和數(shù)據(jù)分析