報(bào)告基因檢測(cè)是功能基因組學(xué)研究的一個(gè)重要手段，在真核基因表達(dá)調(diào)控研究和相關(guān)藥物或蛋白篩選工作中，有廣泛的應(yīng)用。報(bào)告基因檢測(cè)系統(tǒng)，是把順式調(diào)控元件（即DNA非編碼序列）與某一種非常容易被鑒定的蛋白（即報(bào)告基因產(chǎn)物）的編碼序列連接起來(lái)，通過(guò)測(cè)定該報(bào)告基因在細(xì)胞內(nèi)的表達(dá)產(chǎn)物的量或活性，來(lái)判斷順式調(diào)控元件的表達(dá)調(diào)控作用。這種間接的測(cè)定技術(shù)，提供了一種簡(jiǎn)單、有效、有時(shí)是唯一可行的檢測(cè)體系。報(bào)告基因檢測(cè)技術(shù)，涉及報(bào)告基因載體質(zhì)粒構(gòu)建、細(xì)胞轉(zhuǎn)染、報(bào)告基因產(chǎn)物測(cè)定等方法。

 

理想的報(bào)告基因通常應(yīng)具備以下特點(diǎn)：已被克隆和全序列已測(cè)定；表達(dá)產(chǎn)物在受體細(xì)胞中不存在（即無(wú)背景）；細(xì)胞內(nèi)其它的基因產(chǎn)物不會(huì)干擾報(bào)告基因產(chǎn)物的檢測(cè)；基因產(chǎn)物在細(xì)胞內(nèi)的含量能夠?qū)崟r(shí)反映該基因的轉(zhuǎn)錄活性狀態(tài)；報(bào)告基因編碼產(chǎn)物的檢測(cè)方法應(yīng)該快速、簡(jiǎn)便、靈敏度高而且重現(xiàn)性好。

 

目前實(shí)驗(yàn)室較為常用的報(bào)告基因有以下幾種：熒光素酶（luc）、β-半乳糖苷酶（β-gal）、氯霉素乙酰轉(zhuǎn)移酶（CAT）、β-葡萄糖苷酸酶（GUS）、分泌型堿性磷酸酶（SEAP）、綠色熒光蛋白（GFP）以及生長(zhǎng)激素（hGH）等。其中熒光素酶報(bào)告基因具有檢測(cè)速度快、靈敏度高、費(fèi)用低等優(yōu)點(diǎn)，得到了最為廣泛的采用。在報(bào)告基因檢測(cè)體系中，報(bào)告基因的活性與特異性刺激互相影響。因此除了主報(bào)告基因質(zhì)粒外，通常還需包含另一種報(bào)告基因質(zhì)粒，共轉(zhuǎn)染同一細(xì)胞，以作為轉(zhuǎn)染效率和細(xì)胞數(shù)量、狀態(tài)的內(nèi)參照，使主報(bào)告基因的結(jié)果歸一化。