薄層色譜法基本原理

 
03 顯色

遵循：一看、二照、三碘、四顯。首先在日光下觀察，劃岀有色物質(zhì)的斑點(diǎn)位置； 在紫外燈下觀察有無(wú)暗斑或熒光斑點(diǎn)；紫外吸收很弱的物質(zhì)，可以用碘缸進(jìn)行顯色 無(wú)色又無(wú)紫外吸收且在碘缸中不顯色的物質(zhì)，可以根據(jù)化合物的顯色基團(tuán)選擇顯色劑顯色。

 
薄層色譜法案例分析

01 薄層色譜法TLC拖尾現(xiàn)象

① 首先考慮的是樣品濃度過(guò)大，硅膠板過(guò)載導(dǎo)致。這種情況直接降低樣品濃度或者減少上樣量。

② 樣品對(duì)硅膠的吸附能力過(guò)強(qiáng)導(dǎo)致的拖尾。對(duì)不同體系加入不同的調(diào)節(jié)劑，酸體系加冰醋酸，堿體系加氨水/三乙胺。

薄層色譜法TLC拖尾現(xiàn)象

 
02 薄層色譜法TLC邊緣效應(yīng)

原因：當(dāng)展開劑在薄層上展開時(shí)，極性較弱的展開劑和揮發(fā)較強(qiáng)的展開劑在薄層兩邊較易揮發(fā)，它們?cè)诒�層兩�?cè)的濃度比在中部的濃度小，因此產(chǎn)生了邊緣效應(yīng)。

解決方案：點(diǎn)樣時(shí)，板子兩邊空出0.5 cm邊際

薄層色譜法TLC邊緣效應(yīng)

 
03 薄層色譜法TLC分離效果差

原因：分離效果差的主要原因包括展開劑的選擇、展開方式以及實(shí)驗(yàn)環(huán)境條件。

解決方案：根據(jù)樣品的性質(zhì)選擇合適極性/體系的展開劑；避免點(diǎn)樣過(guò)量或不均勻；優(yōu)化展開方式，選擇最適合的上行或下行展開方式；控制實(shí)驗(yàn)環(huán)境的溫濕度，確保硅膠不吸潮。

薄層色譜法TLC分離效果差

 
04 薄層色譜法TLC樣品跑散/沖頂

原因：可能是樣品中有大極性溶劑、展開劑極性太大、硅膠板吸潮。

解決方案：在點(diǎn)板前，先用吹風(fēng)機(jī)將硅膠板吹干，點(diǎn)樣后，再將樣品溶劑吹干，選用極性適合的展開劑。

薄層色譜法TLC樣品跑散/沖頂

05 薄層色譜法TLC顯色劑顯色不清楚

原因：可能包括展開劑選擇不佳、樣品濃度過(guò)低、顯色劑選擇不當(dāng)?shù)取?/span>

解決方案：

① 展開劑選擇不佳，可能導(dǎo)致斑點(diǎn)重合或不明顯�？蓢L試不同類型、比例的展開劑，多次嘗試以找到最佳的展開劑組合。

② 調(diào)整樣品的濃度，以便在薄層色譜板上形成更明顯的斑點(diǎn)。

③ 選擇正確的顯色劑對(duì)樣品的顯色起到至關(guān)重要的作 用，如含氮（伯、仲）化合物選用茚三酮顯色劑，含還原性基團(tuán)化合物（羥基、氨基 、醛）選用高猛酸鉀顯色劑，生物堿選擇硫酸鈰顯色劑等。
 
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