CASY 無標(biāo)記3D細(xì)胞分析系統(tǒng)是您實(shí)現(xiàn)精準(zhǔn)、無標(biāo)記細(xì)胞計(jì)數(shù)的理想選擇,特別適用于iPSCs、原代細(xì)胞以及敏感的干細(xì)胞培養(yǎng)!無需染料或標(biāo)記,只需不到一分鐘即可獲得可靠的重復(fù)性結(jié)果!
主要特點(diǎn)
誘導(dǎo)多能干細(xì)胞(iPSC)是從體細(xì)胞重新編程而來,具有在再生醫(yī)學(xué)、藥物篩選、毒理學(xué)研究和疾病模型開發(fā)中的巨大潛力。為了有效利用iPSC,采用高效的冷凍和解凍方法至關(guān)重要,這不僅能夠確保細(xì)胞在解凍后快速恢復(fù),還能在各個(gè)應(yīng)用領(lǐng)域中保持細(xì)胞擴(kuò)增與健康狀況的一致性。例如研究以下一些方面:
應(yīng)用領(lǐng)域
這篇綜述文章《Improving Cell Recovery: Freezing and Thawing Optimization of Induced Pluripotent Stem Cells》主要探討了如何優(yōu)化誘導(dǎo)多能干細(xì)胞(iPSCs)的冷凍保存和解凍過程,以提高細(xì)胞的存活率和恢復(fù)質(zhì)量。
文章內(nèi)容概覽
1 冷凍保存優(yōu)化
細(xì)胞生長階段:研究表明,將iPSCs在對數(shù)生長期(log phase)進(jìn)行冷凍,可以提高解凍后的存活率。這是因?yàn)樵谶@一階段,細(xì)胞分裂活躍,更有利于恢復(fù)。
冷凍速率:為了避免細(xì)胞內(nèi)冰晶的形成和細(xì)胞脫水,需要控制冷凍速率。建議在脫水區(qū)快速冷凍,冰晶形成區(qū)慢速冷凍,以及在進(jìn)一步冷卻區(qū)再次快速冷凍,以實(shí)現(xiàn)最佳的細(xì)胞存活率。
2 解凍步驟優(yōu)化
快速解凍:為了避免在解凍過程中細(xì)胞受損,建議進(jìn)行快速解凍。這可以通過在37°C水浴中進(jìn)行。
ROCK抑制劑:在解凍后的細(xì)胞培養(yǎng)基中添加ROCK抑制劑(如Y-27632),可以顯著提高細(xì)胞的附著和存活率,尤其是當(dāng)細(xì)胞被分散成單細(xì)胞時(shí)。
3 實(shí)驗(yàn)結(jié)果
細(xì)胞恢復(fù)質(zhì)量:通過優(yōu)化的冷凍和解凍流程,iPSCs在解凍后能夠更快地進(jìn)入實(shí)驗(yàn)狀態(tài),從而減少了對后續(xù)實(shí)驗(yàn)的影響。
4 技術(shù)應(yīng)用
結(jié)果顯示,CASY 無標(biāo)記3D細(xì)胞分析系統(tǒng)在解凍后的iPSCs實(shí)驗(yàn)中展現(xiàn)出優(yōu)異的細(xì)胞活性,確保實(shí)驗(yàn)的高度可靠性和再現(xiàn)性。
在冷凍保存iPSCs后,建議立即解凍一管以驗(yàn)證細(xì)胞的附著和恢復(fù)情況,以確保冷凍過程的成功。我們發(fā)現(xiàn),iPSCs在接種后30分鐘內(nèi)應(yīng)開始附著到Matrigel™涂層的培養(yǎng)皿上。如果附著時(shí)間明顯延遲,可能表示冷凍或解凍過程中存在問題,或細(xì)胞在儲存、運(yùn)輸過程中受損。這一觀察有助于及時(shí)優(yōu)化冷凍保存方案,保障iPSCs的質(zhì)量和活性。通過使用高精度的細(xì)胞計(jì)數(shù)分析儀,研究人員能夠更自信地評估和驗(yàn)證他們的冷凍保存方案的有效性。
CASY 無標(biāo)記3D細(xì)胞分析系統(tǒng)的便捷操作、卓越精確度以及對實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)的可靠驗(yàn)證,讓科研人員直觀感受到它作為實(shí)驗(yàn)室必備工具的顯著價(jià)值。文獻(xiàn)為iPSCs的冷凍保存和解凍提供了一套優(yōu)化步驟,不僅提升了細(xì)胞存活率,還確保細(xì)胞能夠迅速恢復(fù)并用于后續(xù)實(shí)驗(yàn)。
為了更精準(zhǔn)地量化細(xì)胞活力,我們推薦使用CASY,該儀器無需染料,能夠快速、準(zhǔn)確地測量總細(xì)胞數(shù)、活細(xì)胞和死細(xì)胞的數(shù)量,并分析細(xì)胞大小及聚集情況,特別適合iPSC和ESC等干細(xì)胞的研究。選擇CASY,輕松獲取精確的細(xì)胞分析結(jié)果,確保您的實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)更可靠,研究成果更出色!