Q：熒光素酶報告基因檢測主要有哪些用途？
a.啟動子結(jié)構(gòu)分析，將啟動子區(qū)域序列（通常2k左右）進(jìn)行分段截短，或?qū)μ囟ㄎ稽c進(jìn)行突變，再分別構(gòu)建入luciferase報告載體，檢測其啟動子活性。
b.啟動子SNP分析，一些基因的啟動子區(qū)域存在單核苷酸多態(tài)性，可運用熒光素酶報告系統(tǒng)分析其相對活性。
c.驗證特定轉(zhuǎn)錄因子同其調(diào)控序列的作用，將該序列（通常為啟動子區(qū)域）插入報告基因載體，同時在實驗細(xì)胞中共轉(zhuǎn)過表達(dá)該轉(zhuǎn)錄因子，可分析轉(zhuǎn)錄因子過表達(dá)是否提高熒光素酶活性。
d.可以分析信號通路是否激活，將該信號通路的下游響應(yīng)原件序列構(gòu)建入報告基因載體，在不同上游信號條件下，熒光素酶活性代表了通路的下游響應(yīng)。例如在GPCR研究中，將cAMP response element（CRE）載入報告基因載體，構(gòu)建穩(wěn)定表達(dá)細(xì)胞株后，可以用于分析GPRC的激活與抑制劑篩選。又如，將HIF1α的響應(yīng)原件hypoxia-responsive element (HRE)插入luciferase報告載體構(gòu)建穩(wěn)轉(zhuǎn)細(xì)胞株，可以用于低氧相關(guān)通路的研究。
e.驗證microRNA的靶序列，將待測的3’UTR序列插入報告基因載體，再共轉(zhuǎn)入該microRNA，如果熒光素酶活性下降，則提示為其靶序列。
 

Q：做熒光素酶報告基因檢測，需要提供什么？實驗結(jié)果包括哪些？
您需要提供：1.基因序列或模板，需提供詳細(xì)的轉(zhuǎn)錄因子、目的基因或microRNA信息；2.實驗細(xì)胞，默認(rèn)為使用293T細(xì)胞，
實驗結(jié)束后，會為您提供實驗流程及完整報告一份，包括實驗原始數(shù)據(jù)、圖片、分析結(jié)果等。

Q：熒光素酶作為報告基因相比于熒光蛋白有哪些優(yōu)勢？
Luciferase的靈敏度相比于GFP提高10-100倍以上，同時具有更寬的動態(tài)范圍，便于數(shù)值分析比較，不需要熒光顯微鏡，而且在活體實驗中其熒光穿透性高于EGFP等熒光蛋白，同時由于沒有內(nèi)源活性、其本底信號很低。
而GFP等熒光蛋白相比于熒光素酶的優(yōu)勢在于可以進(jìn)行失蹤定位，并且其觀測不需裂解細(xì)胞，方便進(jìn)行適時觀察。

Q：海腎熒光素酶和螢火蟲熒光素酶相比，相對活性如何？
在氧、鎂和ATP的存在下，螢火蟲熒光素酶作用于甲蟲熒光素，而來源于海洋腔腸（Renilla reniformis)的熒光素酶在氧的存在下作用于海腎熒光素。雙報告基因技術(shù)（Dual-reporter assays）,結(jié)合了螢火蟲熒光素酶測試和海腎熒光素酶測試。

CHASELECTION逐典螢光素酶報告基因檢測試劑盒旨在準(zhǔn)確、靈敏、高效地測定螢火蟲螢光素酶活性，應(yīng)用高通量藥物篩選、藥物活性檢測、大規(guī)模啟動子功能測定、信號通路等研究。

逐典螢光素酶報告基因

針對報告基因檢測不同的側(cè)重需求，逐典推出了3種檢測系統(tǒng)。

逐典螢光素酶報告基因優(yōu)勢：

1. 檢測靈敏度高，信號穩(wěn)定性好

HEK293-NFK B-LUC細(xì)胞加入梯度稀釋的TNF 在37C、5%CO條件下刺激6小時后,分別用增強(qiáng)型、超敏型、穩(wěn)定型檢測試劑進(jìn)行信號檢測。

2. 操作方便

僅需將底物和螢光素酶檢測緩沖液混合后直接加入到細(xì)胞即可。

3. 穩(wěn)定性好

同時在10次反復(fù)凍融實驗中，逐典全系列報告基因檢測試劑盒顯示出較強(qiáng)的穩(wěn)定性。