2ⁿ指數(shù)級超多重技術(shù)在數(shù)字PCR檢測中的應(yīng)用
PCR已成為分子診斷領(lǐng)域最重要的技術(shù)手段之一，占據(jù)分子診斷市場的半壁江山。數(shù)字PCR是最新一代PCR技術(shù)，也是當前靈敏度和定量精度最高的分子檢測技術(shù)。但數(shù)字PCR使用成本仍然相對較高，檢測靶點數(shù)少（一般≤6靶點/反應(yīng)），阻礙了其在臨床中的大規(guī)模應(yīng)用，提高數(shù)字PCR的多重檢測能力迫在眉睫。
超2N指數(shù)式多重數(shù)字PCR技術(shù)（2N Super-multiplex dPCR）
基于熒光通道數(shù)的增加和基于探針濃度梯度增加，均可以在一定程度上提高數(shù)字PCR檢測重數(shù)，然而只能達到“線性”增加的目的�；谔结槤舛忍荻鹊亩嘀貦z測技術(shù)雖然可以顯著增加多重能力，但由于無法避免cross-reactivity現(xiàn)象，不能確保僅獲得位點特異性的分簇，因此穩(wěn)定性不足、靈敏度較差，難以滿足臨床級別的數(shù)據(jù)要求。而基于創(chuàng)新的且數(shù)字PCR獨特適用的熒光編碼技術(shù)可以實現(xiàn)“指數(shù)”級的多重檢測，顛覆性的提高數(shù)字PCR檢測重數(shù)，更全面的覆蓋臨床應(yīng)用多場景需求。
超2N指數(shù)式多重數(shù)字PCR技術(shù)（2N Super-multiplex dPCR）
基于熒光通道數(shù)的增加和基于探針濃度梯度增加，均可以在一定程度上提高數(shù)字PCR檢測重數(shù)，然而只能達到“線性”增加的目的�；谔结槤舛忍荻鹊亩嘀貦z測技術(shù)雖然可以顯著增加多重能力，但由于無法避免cross-reactivity現(xiàn)象，不能確保僅獲得位點特異性的分簇，因此穩(wěn)定性不足、靈敏度較差，難以滿足臨床級別的數(shù)據(jù)要求。而基于創(chuàng)新的且數(shù)字PCR獨特適用的熒光編碼技術(shù)可以實現(xiàn)“指數(shù)”級的多重檢測，顛覆性的提高數(shù)字PCR檢測重數(shù)，更全面的覆蓋臨床應(yīng)用多場景需求。
圖1. 線性級多重 vs 指數(shù)級多重
小海龜科技基于獨創(chuàng)“固態(tài)油隔水”的數(shù)字PCR技術(shù)，實現(xiàn)了熒光編碼和解碼技術(shù)的創(chuàng)新突破，結(jié)合小海龜科技推出的Perfect ARMSTM技術(shù)和超高特異性酶神甄TM，可以實現(xiàn)“指數(shù)級”超多重檢測，在單個芯片內(nèi)可實現(xiàn)幾十重至上百重的靶點檢測。指數(shù)級超多重數(shù)字PCR，既可以保持數(shù)字PCR高靈敏性和高特異性的特征，又兼具PCR技術(shù)固有的經(jīng)濟、簡便、高效優(yōu)勢，極大拓寬了數(shù)字PCR在臨床應(yīng)用端的場景邊界，非常適用于病原體超多重檢測和腫瘤液態(tài)活檢等。
表1. 線性級多重 vs 指數(shù)級多重
1.病原體超多重檢測
指數(shù)級超多重數(shù)字PCR技術(shù)可以單管反應(yīng)實現(xiàn)30種以上的病原體檢測分型，通過不同的組合設(shè)計，可以滿足大量的感染性癥狀的臨床應(yīng)用場景。比如：呼吸道感染、消化道感染、血流感染、術(shù)后感染及其它感染性疾病。
2.腫瘤液態(tài)活檢
指數(shù)級超多重數(shù)字PCR技術(shù)可以單管反應(yīng)實現(xiàn)70種以上的腫瘤基因突變檢測，適用于腫瘤的早期診斷、精準用藥和MRD監(jiān)測。2N超多重數(shù)字PCR技術(shù)，拓展了數(shù)字PCR應(yīng)用場景，為分子檢測試劑盒開發(fā)探索出一條嶄新的道路。
2.腫瘤液態(tài)活檢
指數(shù)級超多重數(shù)字PCR技術(shù)可以單管反應(yīng)實現(xiàn)70種以上的腫瘤基因突變檢測，適用于腫瘤的早期診斷、精準用藥和MRD監(jiān)測。2N超多重數(shù)字PCR技術(shù)，拓展了數(shù)字PCR應(yīng)用場景，為分子檢測試劑盒開發(fā)探索出一條嶄新的道路。
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