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zenCELL owl活細(xì)胞監(jiān)測在生物材料研究中的應(yīng)用

瀏覽次數(shù):1416 發(fā)布日期:2021-11-30  來源:本站 僅供參考,謝絕轉(zhuǎn)載,否則責(zé)任自負(fù)
生物材料(Biomaterial)的概念源于上世紀(jì)90年代,研究范疇涉及材料科學(xué)、生物學(xué)、解剖學(xué)、病理學(xué)等多學(xué)科的相互交叉和滲透。生物材料的種類繁多,分類方法也很多,應(yīng)用極為廣泛,比如有機(jī)材料的一類高分子生物聚合物,因其獨(dú)特屬性多應(yīng)用于仿生學(xué)、臨床醫(yī)學(xué)等研究,并逐步實(shí)現(xiàn)工程技術(shù)的轉(zhuǎn)化。目前,生物聚合粒子的形狀多為纖維狀或球形,可有效應(yīng)用于醫(yī)學(xué)領(lǐng)域,如用于組織工程的仿生纖維或可注射的膠囊。
該文章發(fā)表于Applied Materials Today當(dāng)代應(yīng)用材料(季刊,聚焦于交叉學(xué)科、新材料的應(yīng)用前沿)的最新一期(2021.09)。研究者們通過調(diào)整靜電紡絲參數(shù),結(jié)合紡前原液的結(jié)構(gòu)著色,合成了一種全新形態(tài)的高分子生物聚合材料,融合現(xiàn)有獨(dú)立形態(tài)的纖維狀和球形的結(jié)構(gòu)特點(diǎn),呈現(xiàn)啞鈴形的聚ε-己內(nèi)酯(PCL)微粒子 。為探究啞鈴形的聚ε-己內(nèi)酯(PCL)微粒是否可以模擬細(xì)胞外間質(zhì)(extracellular matrix,ECM)的生物特性,文章中建立U87細(xì)胞(人神經(jīng)膠質(zhì)瘤細(xì)胞)模型進(jìn)行掃描電鏡觀察和活細(xì)胞動態(tài)監(jiān)測實(shí)驗(yàn)。兩種實(shí)驗(yàn)方法得到一致性結(jié)果,即對比傳統(tǒng)的PCL纖維結(jié)構(gòu),該合成微粒子可模擬ECM并有效增強(qiáng)細(xì)胞信號轉(zhuǎn)導(dǎo)--細(xì)胞更強(qiáng)粘附于微粒子上,進(jìn)而形成增殖的啞鈴簇。

活細(xì)胞動態(tài)監(jiān)測實(shí)驗(yàn)由德國InnoME的zenCELL owl活細(xì)胞動態(tài)成像及分析系統(tǒng)(以下簡稱zenCELL owl)完成。在該實(shí)驗(yàn)中,U87細(xì)胞以30,000個細(xì)胞每孔的接種密度鋪在24孔板內(nèi),孔板板底進(jìn)行膠質(zhì)包被和無包被處理,同時細(xì)胞培養(yǎng)基內(nèi)加入/不加入密度為1 mg/ml的合成微粒子。將U87細(xì)胞模型置于細(xì)胞培養(yǎng)箱內(nèi),zenCELL owl設(shè)置監(jiān)測間隔17分鐘,監(jiān)測總時長3天,對不同實(shí)驗(yàn)組的U87細(xì)胞模型進(jìn)行長時間的動態(tài)監(jiān)測,獲取其動態(tài)變化過程中的圖像、視頻和數(shù)據(jù)。(圖1)

圖1  zenCELL owl設(shè)置條件
 
圖2 A-H生動地展示了同一個位置點(diǎn),U87細(xì)胞模型在24小時監(jiān)測下的動態(tài)變化。在監(jiān)測過程中,U87細(xì)胞會附著在呈啞鈴形的PCL顆粒上,進(jìn)一步遷移聚集形成啞鈴簇狀結(jié)構(gòu),并繼續(xù)進(jìn)行增殖。
 
圖2  U87細(xì)胞在含有呈啞鈴形PCL顆粒/膠質(zhì)包被的24孔板培養(yǎng)48小時的細(xì)胞圖片
(黑色物質(zhì)為呈啞鈴形PCL顆粒)

 
如下視頻1、視頻2源于該文章的supplement附錄部分,真實(shí)反映了U87細(xì)胞模型的動態(tài)變化過程。

視頻1  U87細(xì)胞在含有呈啞鈴形PCL顆粒/膠質(zhì)包被的24孔板培養(yǎng)72小時的細(xì)胞視頻

視頻2:  U87細(xì)胞在膠質(zhì)包被的24孔板培養(yǎng)72小時的細(xì)胞視頻

這些結(jié)果清楚地揭示了啞鈴形的聚ε-己內(nèi)酯(PCL)微粒子,其結(jié)構(gòu)可有效地模擬細(xì)胞外間質(zhì)的生物特性,在組織工程領(lǐng)域具有非凡潛力,如注射、生物制造、化妝品和醫(yī)用填充等,不斷開拓新材料的應(yīng)用前景。

德國InnoME公司自主研發(fā)和生產(chǎn)的zenCELL owl活細(xì)胞動態(tài)成像及分析系統(tǒng),基于非標(biāo)記、非侵入方法,原位記錄細(xì)胞實(shí)時生長和定量的分析數(shù)據(jù)。zenCELL owl體積小巧,耐溫耐濕,可在細(xì)胞培養(yǎng)箱內(nèi)長時間連續(xù)工作;通過24個顯微成像鏡頭,對24個視野進(jìn)行連續(xù)的動態(tài)監(jiān)測和圖像獲取。zenCELL owl為用戶提供高質(zhì)量圖像、視頻、統(tǒng)計(jì)學(xué)曲線和定量數(shù)據(jù),實(shí)現(xiàn)細(xì)胞增殖/增殖抑制、細(xì)胞培養(yǎng)質(zhì)控/培養(yǎng)優(yōu)化、遷移/侵襲等諸多活細(xì)胞動態(tài)過程的監(jiān)測。

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