目前，機(jī)械灌注對于移植腎保護(hù)作用的機(jī)制尚不明確，而機(jī)械灌注所提供的流體剪切力（Flow Shear Stress, FSS）對供腎血管內(nèi)皮細(xì)胞的具體作用有必要深入研究。此外，已有多項(xiàng)研究證明使用體外 FSS 系統(tǒng)可模仿體內(nèi)血流通過血管內(nèi)皮的生理狀態(tài)，并能夠直接影響內(nèi)皮細(xì)胞酶的活性、蛋白功能及轉(zhuǎn)錄因子表達(dá)情況。

實(shí)驗(yàn)結(jié)果
 

（1）Western blot結(jié)果發(fā)現(xiàn)，F(xiàn)SS可上調(diào)人臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞（humanumbilical vein endothelial cell，HUVEC）細(xì)胞內(nèi)p-腺苷酸活化蛋白激酶（adenosine monophosphate activated protein kinase，AMPK）的相對表達(dá)，并隨時(shí)間延長而升高（p<0.05）；HUVEC細(xì)胞加載12dyn/cm2力適應(yīng)2h后，去力培養(yǎng)，細(xì)胞內(nèi)p-AMPK的相對表達(dá)隨時(shí)間延長逐漸降低（p<0.05）；二甲雙胍可明顯激活A(yù)MPK活性，并隨濃度的增加而升高（p<0.05）。

（2）免疫組化染色結(jié)果發(fā)現(xiàn)，HMP組腎臟組織內(nèi)p-AMPK含量明顯高于CS組（p<0.05），且HMP與Normal組相比無統(tǒng)計(jì)學(xué)差異（p>0.05）；Met-CS組p-AMPK的相對表達(dá)水平也顯著高于CS組（p<0.05）；低溫持續(xù)灌注后腎臟組織內(nèi)p-AMPK的表達(dá)主要分布于腎小管處，少數(shù)于腎小球內(nèi)皮細(xì)胞和血管處。

（3）RT-PCR結(jié)果顯示加載12dyn/cm2力1h后，HUVEC細(xì)胞內(nèi)KLF-2 mRNA的相對表達(dá)顯著高于CTL組（p<0.05），且1hFSS組細(xì)胞內(nèi)Bcl-2/Bax比值低于CTL組（p<0.05），而兩組內(nèi)p53 mRNA的相對表達(dá)無明顯差異（p>0.05）。體內(nèi)實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示HMP組和Met-CS組凋亡率明顯低于CS組（p<0.05）；同樣，HE染色發(fā)現(xiàn)CS組腎臟組織損傷嚴(yán)重，腎小管明顯水腫；Met-CS組腎小管水腫減輕，而HMP組大鼠腎臟損傷不明顯，無水腫，腎小管輕度擴(kuò)張。

實(shí)驗(yàn)結(jié)論
 

綜上所述，流體剪切力的改變可能通過AMPK途徑影響腎臟損傷，而持續(xù)灌注保存提供的流體剪切力可以通過激活A(yù)MPK/KLF-2信號通路，抑制組織細(xì)胞凋亡，減輕腎臟缺血再灌注損傷進(jìn)而起到器官保護(hù)作用。二甲雙胍可以有效激活A(yù)MPK活性，也能夠減少供腎靜態(tài)低溫保存過程中冷缺血所導(dǎo)致的腎臟損傷。AMPK可能成為治療FSS缺失后IR損傷的潛在藥物靶點(diǎn)。

參考文獻(xiàn)：王誠. 流體剪切力在供腎持續(xù)灌注保存中的作用機(jī)制研究[D].蘭州大學(xué),2018.

文章來源：http://www.naturethink.com/?news/143.html

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