Overview
白皮書《采用活細(xì)胞分析系統(tǒng)最大限度地洞察細(xì)胞生長》展示如何利用Incucyte系統(tǒng)的活細(xì)胞分析能力更快、更深入、更高通量地提供對生物學(xué)事件的新見解,從細(xì)胞凋亡、免疫細(xì)胞殺傷、神經(jīng)突生長和吞噬作用,到3D 腫瘤球生長和活性等各種應(yīng)用場景。
這為研究人員提供了實(shí)驗(yàn)設(shè)計新方法,用來解決之前無法解決的問題;罴(xì)胞分析監(jiān)測細(xì)胞行為隨著時間的變化,增加了動力學(xué)測量數(shù)據(jù)的潛力,而不再受單一時間點(diǎn)終點(diǎn)分析的影響,簡化了各種應(yīng)用的實(shí)驗(yàn)操作流程,包括細(xì)胞健康和活性、免疫學(xué)和免疫腫瘤學(xué)、細(xì)胞療法和神經(jīng)科學(xué)。
Incucyte® 活細(xì)胞分析系統(tǒng)
可以預(yù)見,隨著人工智能和機(jī)器學(xué)習(xí)能力的不斷增強(qiáng),未來將有可能在細(xì)胞層面實(shí)現(xiàn)更深入的理解。使用活細(xì)胞分析系統(tǒng),任何用戶都可以動態(tài)地了解其細(xì)胞模型的健康、形態(tài)、運(yùn)動和功能,并能夠實(shí)時、全天候地對細(xì)胞類型特異性和時間依賴性的生物活動進(jìn)行分析。至關(guān)重要的是,Incucyte獨(dú)特的技術(shù)結(jié)合細(xì)胞非干擾試劑,可確保細(xì)胞培養(yǎng)不受外界影響,并獲取高質(zhì)量的結(jié)果。
無標(biāo)記分析
- 相差成像
該方法最適合在2D模型中對細(xì)胞生長和形態(tài)進(jìn)行測量;Incucyte采用專有技術(shù)獲取高清的相差圖像,確保得到細(xì)胞增殖定量的可靠結(jié)果。
- 明場成像
采用活細(xì)胞分析成像可直觀地監(jiān)測球體大小隨著時間的變化,而不會破壞組織培養(yǎng)物,并有助于了解有絲分裂過程中細(xì)胞生物量的積累。與2D 單層模型相比,這些3D 細(xì)胞模型更能代表和預(yù)測體內(nèi)條件,可提供更多體內(nèi)相關(guān)性和轉(zhuǎn)化性的觀察結(jié)果。
細(xì)胞熒光標(biāo)記
- 單獨(dú)細(xì)胞的標(biāo)記
熒光標(biāo)記可有力地驗(yàn)證之前所述的無標(biāo)記技術(shù),反之亦然,無標(biāo)記技術(shù)對于確認(rèn)潛在的熒光探針是否對細(xì)胞無干擾,并優(yōu)化細(xì)胞培養(yǎng)的實(shí)驗(yàn)至關(guān)重要。
- 混合培養(yǎng)物中的細(xì)胞標(biāo)記
活細(xì)胞ICC可用于識別混合培養(yǎng)中的特定細(xì)胞群,使人們對細(xì)胞過程(如細(xì)胞生長)有更深入的了解。
- 復(fù)雜共培養(yǎng)
活細(xì)胞分析系統(tǒng)可以獲得比以往更多的細(xì)節(jié),產(chǎn)生有價值的縱向數(shù)據(jù),以了解細(xì)胞之間的相互作用和過程,例如免疫細(xì)胞激活和免疫細(xì)胞殺傷腫瘤。
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數(shù)據(jù)結(jié)果搶先看
無標(biāo)記細(xì)胞增殖的動力學(xué)分析——將MDA-MB-231(A&B)或A549(C&D)細(xì)胞以不同密度接種在96孔板中,采集圖像,并用Incucyte®活細(xì)胞分析系統(tǒng)對其進(jìn)行分析,通過basic模塊分析計算匯合度(A&B)或cell-by-cell模塊分析計數(shù)細(xì)胞(C&D)。圖像顯示了匯合度mask(A)或cell-by-cell mask(C),曲線(B&D)顯示了細(xì)胞隨著時間變化的增殖情況。數(shù)據(jù)顯示為4個孔的均值± SEM。
3D 結(jié)構(gòu)的明場成像。示例顯示了MDA-MB-231 細(xì)胞形成的單球體明場圖像,A549 細(xì)胞作為多球體培養(yǎng)物接種在Matrigel™ 上,以及嵌入在Matrigel 膠滴中的小鼠胰腺類器官。mask 以黃色顯示,以用來定量細(xì)胞增殖隨時間的變化。定量結(jié)果如曲線圖所示。
在共培養(yǎng)前熒光標(biāo)記細(xì)胞。將相同數(shù)量的AU565-Nuclight green 細(xì)胞和MDA-MB-231-Nuclight Near IR 細(xì)胞接種到96 孔板中,并用谷氨酰胺酶抑制劑CB-839(1 μM)處理。之前已經(jīng)證明三陰性細(xì)胞(例如MDA-MB-231)對這種化合物敏感。使用Incucyte 活細(xì)胞分析系統(tǒng)中,持續(xù)四天采集相差和熒光圖像。綠色和Near IR 熒光(A)的圖像顯示,在正常情況下,兩種細(xì)胞類型均會增殖,而在CB-839 情況下,Near IR 細(xì)胞明顯減少。隨著時間進(jìn)展,AU565 細(xì)胞生長受到極輕微的影響(B),而MDA-MB-231 細(xì)胞增殖明顯受到抑制(C)。此外還發(fā)現(xiàn),與MDA-MB-231 細(xì)胞相比,AU565細(xì)胞生長速率較慢。