Countstar Rigel熒光成像法嫁接FCS軟件實(shí)現(xiàn)細(xì)胞周期、凋亡檢測(cè)研究
瀏覽次數(shù):2380 發(fā)布日期:2021-5-12
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在細(xì)胞實(shí)驗(yàn)中,細(xì)胞活率、濃度、凋亡、周期等均是細(xì)胞檢測(cè)的重要部分。Countstar Rigel熒光細(xì)胞分析儀集合了定焦專(zhuān)利技術(shù)、高清成像系統(tǒng)、一體機(jī)、觸屏式操作、合規(guī)性等多方面優(yōu)勢(shì),功能強(qiáng)大、操作便捷、重復(fù)性高深受科研工作者的喜愛(ài)。
圖1、Countstar Rigel 采用AO/PI、臺(tái)盼藍(lán)方法的準(zhǔn)確性和穩(wěn)定性
但是大家對(duì)Countstar Rigel熒光細(xì)胞分析儀傳統(tǒng)的印象還停留在細(xì)胞計(jì)數(shù)功能上,近年來(lái)隨細(xì)胞治療技術(shù)的突飛猛進(jìn),國(guó)外De Novo公司開(kāi)發(fā)的對(duì)細(xì)胞熒光圖像進(jìn)行量化分析的軟件FCS,為細(xì)胞各類(lèi)實(shí)驗(yàn)的檢測(cè)分析提供了新的手段,同時(shí)Countstar Rigel優(yōu)異的軟硬件基礎(chǔ)也為拓展其新的應(yīng)用搭載上了這輛順風(fēng)車(chē)。
圖2、De Novo公司開(kāi)發(fā)的FCS軟件
傳統(tǒng)的周期、凋亡檢測(cè)借助流式細(xì)胞儀,通過(guò)單個(gè)細(xì)胞的熒光信號(hào)轉(zhuǎn)化為脈沖電信號(hào)進(jìn)行數(shù)據(jù)的統(tǒng)計(jì)及分析,而Countstar Rigel自身的熒光成像法嫁接上FCS軟件之后,通過(guò)細(xì)胞熒光圖像量化分析也可以得到細(xì)胞周期、凋亡的數(shù)據(jù)。相比于流式的方法這種熒光方法可以看到每個(gè)細(xì)胞的熒光成像,為我們數(shù)據(jù)的分析提供可靠的依據(jù)。
圖3、Countstar Rigel檢測(cè)細(xì)胞凋亡單個(gè)細(xì)胞熒光成像
傳統(tǒng)的流式方法雖廣為流傳,但是流式細(xì)胞儀的成本昂貴,一般是好幾個(gè)中心實(shí)驗(yàn)室平臺(tái)公用一臺(tái),然而眾多使用者造成供不應(yīng)求,實(shí)驗(yàn)需要根據(jù)儀器的空閑度來(lái)調(diào)節(jié),而且儀器維護(hù)成本高,需要定期用專(zhuān)用清洗液、鞘液等,而我們Countstar Rigel可以借助FCS解除流式的困境,同樣可以得到類(lèi)似流式的數(shù)據(jù)。
圖4、Countstar Rigel 結(jié)合FCS得到的細(xì)胞周期結(jié)果
Countstar Rigel與流式細(xì)胞儀檢測(cè)細(xì)胞周期和凋亡時(shí),可公用周期檢測(cè)試劑盒、凋亡檢測(cè)試劑盒。Countstar Rigel為周期和凋亡的數(shù)據(jù)分析提供了分析模板,采用Countstar Rigel檢測(cè)周期或凋亡后,到處FCS格式的數(shù)據(jù),導(dǎo)入FCS軟件內(nèi)即可借助粗略的分析模板根據(jù)樣品的實(shí)際情況微調(diào)得到最終的分析結(jié)果,如圖5所示,每部分細(xì)胞具體的熒光情況均可以看到,圈門(mén)的過(guò)程中我們可以參考多種信息。
圖5、FCS分析Countstar Rigel凋亡數(shù)據(jù)結(jié)果圖
對(duì)比不同類(lèi)型不同條件處理的細(xì)胞,采用Countstar Rigel檢測(cè),結(jié)果如下圖6,可以明顯的區(qū)別各部分的占比。
圖6、FCS分析Countstar Rigel檢測(cè)不同凋亡樣本數(shù)據(jù)
試想一下,Countstar Rigel既然能得到流式類(lèi)似的結(jié)果,而且原理簡(jiǎn)單易懂,那我們?nèi)粘?shí)驗(yàn)的開(kāi)展豈不是又充滿(mǎn)歡聲笑語(yǔ)。