2020年4月21日,由Tara N. Guhr Lee等在《Journal of Cystic Fibrosis》期刊中發(fā)表了《Accumulation and persistence of ivacaftor in airway epithelia with prolonged treatment》的文章,文中使用Azure Sapphire對IRDye 680孵育的印跡膜掃描成像,對CFTR蛋白進(jìn)行定量分析。
背景:
囊性纖維化(CF)的基本缺陷反映了囊性纖維化跨膜電導(dǎo)調(diào)節(jié)劑(CFTR)的功能喪失,囊性纖維蛋白是參與氯離子和碳酸氫鹽跨細(xì)胞膜轉(zhuǎn)運(yùn)的質(zhì)膜蛋白。CF的一個關(guān)鍵治療方法是CFTR調(diào)節(jié)劑,即用于改善異常CFTR功能的藥物。
CFTR調(diào)節(jié)劑的當(dāng)前劑量策略基于血清藥代動力學(xué),但靶組織(如氣道上皮)中的藥物濃度尚不清楚。先前的數(shù)據(jù)表明,CFTR調(diào)節(jié)劑可能在氣道上皮中積聚,血清藥代動力學(xué)可能無法準(zhǔn)確預(yù)測慢性治療的效果。
方法:
在治療和沖洗階段的各個時間間隔,通過質(zhì)譜法測量藥物濃度,在Ussings室中評估電生理功能,并通過Western印跡定量成熟的CFTR蛋白。
結(jié)果:
與lumacaftor或tezacaftor相比,CF-HBEs中ivacaftor的累積程度要大得多,并且在沖洗14天后仍然持續(xù)升高。CFTR活性在治療7天達(dá)到峰值,但隨著ivacaftor的進(jìn)一步積累而降低,盡管沖洗后仍保持在基線以上。
結(jié)論:
慢性治療期間和之后,CFTR調(diào)節(jié)劑的細(xì)胞內(nèi)累積和持續(xù)存在提示氣道上皮內(nèi)復(fù)雜的藥代動力學(xué)和藥效學(xué)特性不能由血清藥代動力學(xué)預(yù)測?赡苄枰苯訙y量靶組織中的藥物以優(yōu)化劑量策略,并且治療停止后CFTR調(diào)節(jié)劑的持續(xù)存在對個性化藥物治療方法具有重要意義。
Sapphire 雙模式多光譜激光成像系統(tǒng)可完成NIR和RGB熒光,化學(xué)發(fā)光和磷屏成像等多種檢測。無論您的實(shí)驗(yàn)室進(jìn)行哪種成像,例如普通的Western Blot、Southern印跡、2D和2D DIGE、可視化組織或小型模式動物成像都可高質(zhì)量實(shí)現(xiàn)。