2020年6月3日,由Lena Landaverde等在《Analytical and Bioanalytical Chemistry》期刊中發(fā)表了《Method for the elucidation of LAMP products captured on lateral flow strips in a point of care test for HPV 16》的文章,文中介紹了一種使用熒光染色的方法對LAMP產(chǎn)物進行表征,Azure Sapphire對5'-FAM標記的產(chǎn)物在488 nm光源下掃描成像來進行驗證。
摘要:
環(huán)介導擴增(LAMP)是一種等溫擴增技術(shù),因其高靈敏度和在等溫條件下運行的能力而在診斷工作中受到青睞,LAMP反應產(chǎn)生的擴增子的長度和形狀各不相同,因此在雙鏈DNA嵌入染料染色的凝膠上無法辨別。標準表征技術(shù)也無法識別哪些擴增子與LFS特異性結(jié)合,從而產(chǎn)生視覺讀數(shù)。我們的目標是在分析開發(fā)過程中通過使用熒光素亞酰胺(FAM)和生物素標記的環(huán)正向和反向引物來標準化我們在分析開發(fā)過程中對LAMP產(chǎn)物的表征。將pvuII限制酶消化物應用于LAMP產(chǎn)物,F(xiàn)AM標簽帶與LFS視覺讀數(shù)直接相關(guān),我們將這種檢測開發(fā)流程應用于質(zhì)粒DNA和臨床樣品的HPV 16檢測。
文中使用Azure Sapphire對5'-FAM標記的產(chǎn)物在488 nm光源下掃描成像。
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