全球范圍內(nèi)，生物藥，尤其是抗體類藥物，經(jīng)過多年的基礎研究和技術積累，已經(jīng)開始迸發(fā)其生命力，成為藥物領域中最有活力和前景的一個分支。在全球范圍已經(jīng)獲批上市的抗體類抗體藥至少有80多個，在新冠肺炎抗體藥研發(fā)中， 現(xiàn)在現(xiàn)已確立了7個抗冠狀病毒靶點，同時也是藥物篩選靶點。包括：(1) 病毒配體Spike蛋白；(2) 病毒受體ACE2蛋白；(3) 毒蛋白酶PLpro(papain-like protease)；(4) Mpro(3C-like protease或main protease）；(5) 介導病毒RNA帽子的甲基化修飾的nsp16；(6) 毒轉(zhuǎn)錄復制相關的RdRp(RNA-dependent RNA polymerase)；(7) 和潛在的病毒用于干擾宿主免疫的X domain蛋白。另外新發(fā)現(xiàn)一個靶點絲氨酸蛋白酶TMPRSS2(Ⅱ型跨膜絲氨酸蛋白酶(TTSP))。新冠肺炎的靶點與抗癌藥比較相對較少。

抗體藥的研發(fā)策略

藥物靶點篩選中需要在基因水平、轉(zhuǎn)錄水平和蛋白水平上進行檢測

Sapphire的分辨率可達10μm 、分辨率更高、可進行DNA、蛋白陣列等掃描成像、面積可達25X25cm可進行多張芯片的掃描。
 

Sapphire可進行多重熒光定量Western Blot檢測

定量Western Blot是RNAi干擾技術研究中必不可少的檢測方法。使用定量Western Blot可以：
• 確定靶基因的敲低水平。
• 確定靶基因敲低對表型的影響，例如細胞增殖，細胞遷移，細胞周期或細胞信號通路。
★ Sapphire能夠同時檢測四種蛋白，大大提高了Western Blot的效率。
★ 熒光信號穩(wěn)定，影響因素少，定量精準。
★ 大平臺，可同時進行多張印跡膜的檢測。
 

抗體藥藥效評價

抗體藥在進行藥效評價時，主要進行細胞凋亡，細胞增殖，毒性等等分析。In Cell Western（ICW）分析是在微孔板中進行的定量免疫熒光分析（可進行96或384孔），結(jié)合了Western印跡的特異性和ELISA的可重復性和通量。
 

抗體藥生產(chǎn)和質(zhì)控-HCP ELISA抗體覆蓋率的檢測

疫苗、抗體、重組蛋白藥物等生物制品的生產(chǎn)主要利用某些細胞諸如非洲綠猴腎細胞(Vero細胞)和中國倉鼠卵巢(CHO)細胞，大腸桿菌等，這些細胞稱為宿主細胞，在純化工藝中會有宿主細胞分泌至培養(yǎng)基中的蛋白質(zhì)或死亡破碎細胞結(jié)構(gòu)蛋白殘留在生物制品中，

HCP ELISA的存在的風險：

♦ ELISA酶標板包被的抗體結(jié)合量低，會限制HCP檢出限。
♦ 不是所有HCPs都可以作為抗原產(chǎn)生抗體，因此會有“漏檢”，所以需要評估HCP ELISA抗體的覆蓋率（Coverage）。
HCP ELISA抗體覆蓋率的評估方法一般會采用雙向電泳（two-dimensional electrophoresis,2-DE）和蛋白質(zhì)免疫印跡（Western Blot，WB）技術結(jié)合的辦法或者2D DIGE的方法。
Saphire掃描面積大，多達四激光光源，分辨率可在10μm-1000μm可調(diào)，通過Sapphire對2D膠進行掃描，靈敏度高，圖像質(zhì)量好，軟件操作步驟少，實驗人員上手操作快。