液體活檢在CTCs檢測的應(yīng)用
瀏覽次數(shù):2209 發(fā)布日期:2019-11-15
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2015年,液體活檢被《麻省理工大學科技評論》評選為年度十大突破技術(shù),據(jù)Piper Jaffray預(yù)測,2026年廣義液體活檢全球市場總?cè)萘考s326億美元,包括癌癥領(lǐng)域286億美元、無創(chuàng)產(chǎn)前診斷(NIPT)20億美元、器官移植20億美元。在眾多應(yīng)用場景中,液體活檢在癌癥領(lǐng)域的應(yīng)用占據(jù)超過85%的市場份額,大約為150億美元。
作為體外診斷的一個分支,液體活檢一般是指通過檢測血液中的CTC(循環(huán)腫瘤細胞,Circulating Tumor Cell)和ctDNA(循環(huán)腫瘤DNA,Circulating Tumor DNA)獲取患者腫瘤病變信息,用以幫助診斷和治療。與傳統(tǒng)的組織活檢相比其優(yōu)勢在于能通過非侵入性取樣降低活檢的危害,而且有效延長患者生存期。目前液體活檢的主要檢測物包括檢測血液中游離的循環(huán)腫瘤細胞(CTCs),循環(huán)腫瘤DNA(ctDNA)碎片,循環(huán)RNA(Circulating RNA)和外泌體(攜帶有細胞來源相關(guān)的多種蛋白質(zhì),脂類,DNA,RNA等)。
循環(huán)腫瘤細胞(Circulating Tumor Cell,CTC)來源于原發(fā)腫瘤或轉(zhuǎn)移腫瘤,獲得脫離基底膜的能力并通過組織基質(zhì)進入血管的腫瘤細胞。目前,CTCs是指存在于外周血中的各種腫瘤細胞的統(tǒng)稱。
循環(huán)游離DNA(Cell-free DNA,cfDNA),或者叫血漿游離DNA,是血漿中游離存在的DNA,有的來自于正常細胞,有的來自于異常細胞(如腫瘤細胞)還有部分來自于外部(如病毒DNA)。循環(huán)腫瘤DNA(Cell-free Circulating Tumor,ctDNA),是指人體血液循環(huán)系統(tǒng)中不斷流動的攜帶一定特征(包括突變、缺失、插入、重排、拷貝數(shù)變異、甲基化等)來自腫瘤基因的DNA片段。被認為是極具臨床應(yīng)用前景的腫瘤標記物。CtDNA的主要來源包括:1.來自壞死的腫瘤細胞2.來自凋亡的腫瘤細胞3.循環(huán)腫瘤細胞4.來自腫瘤細胞分泌的外泌體。
對CTCs檢測包含細胞富集和細胞檢測兩部分,可以進行不同的組合,形成不同的技術(shù)。最常見的富集方法是抗體介導(dǎo)或物理方法富集。
對ctDNA檢測主要有ARMS技術(shù)(包括Super-ARMS)、第二代測序(NGS)和數(shù)字PCR。
液體活檢技術(shù)使得癌癥早篩成為可能,無論是在腫瘤診斷,治療還是監(jiān)控領(lǐng)域,液體活檢的優(yōu)勢都使其成為最具發(fā)展?jié)摿Φ哪[瘤無創(chuàng)診斷手段,具有極高的臨床應(yīng)用價值和市場前景。
法國Stilla Technologies的Naica
TM微滴芯片數(shù)字PCR系統(tǒng),利用cutting-edge微流體創(chuàng)新型芯片——Sapphire芯片作為數(shù)字PCR過程的唯一耗材。樣品通過毛細通道網(wǎng)格以30,000個微滴的形式進入2D芯片中。并且還是首款3色熒光檢測儀器,整個流程只需要兩個半小時。結(jié)合強大的圖像分析技術(shù)和直觀可視的檢測功能,從而達到了數(shù)字PCR定量卓越的置信水平,獲得的數(shù)據(jù)真實可信。