是時候多加重視了！中國色譜“芯”之Protein A親和填料國產(chǎn)替代

導(dǎo)讀

以單抗藥物為代表的生物制品無疑是制藥行業(yè)最引人矚目的焦點之一，拿特瑞普利單抗為例，作為唯一上市的國產(chǎn)黑色素瘤PD-1產(chǎn)品，自2019年2月底開出首張?zhí)幏揭詠�，其良好的市場表現(xiàn)就給君實生物的業(yè)績提供了有力保障，中金公司分析認為特瑞普利有望在19年持續(xù)擴大市場份額，預(yù)計全年銷售可能會突破6億元！

2019全球TOP 10藥物銷售額預(yù)測（億美元）

資料來源：EvaluatePharma
 

此外，在2012-2019年間，陸續(xù)有6個重磅單抗專利相繼到期，也為生物類似藥打開機會大門，全球生物類似藥市場預(yù)計在 3 年內(nèi)突破 300 億美元。

全球生物類似藥市場規(guī)模（單位：億美元）

 

單抗市場如此多嬌，而反觀其研發(fā)生產(chǎn)現(xiàn)狀卻不難發(fā)現(xiàn)，在抗體領(lǐng)域的價格戰(zhàn)如火如荼的今天，其上游研發(fā)技術(shù)發(fā)展迅速，并且對于下游產(chǎn)出和生產(chǎn)效率的要求也隨之日益提高，可以說業(yè)內(nèi)對于經(jīng)濟高效的色譜填料一直有著精益求精的高標(biāo)準(zhǔn)需求。雖然國外也有不少優(yōu)秀的色譜填料產(chǎn)品供藥企選擇，但除了高昂的售價之外，近來動輒遭遇“禁令”卡脖子的實際現(xiàn)狀，也讓越來越多的企業(yè)認識到在色譜填料這個“色譜芯片”領(lǐng)域也亟待出現(xiàn)優(yōu)質(zhì)的國產(chǎn)替代產(chǎn)品來打破國外壟斷所造成的極端被動局面，在這方面納微科技為我們提供了成熟優(yōu)秀的解決方案，其中UniMab和NanoMab Protein A親和填料就是非常優(yōu)秀的例證。
 

篩選購買Protein A親和填料的關(guān)鍵考核要素

單分散基質(zhì)微球：Protein A親和填料價格昂貴，屬于色譜純化介質(zhì)中的“貴族之選”，現(xiàn)有的Protein A親和填料基本上都是基于多分散體系，不利于更好配合發(fā)揮Protein A親和的優(yōu)勢，單分散體系卻能帶來更好的裝柱體驗、傳質(zhì)效果好、洗脫集中、更低反壓等諸多顯著優(yōu)勢；

高載量：高載量能夠保證同等時間內(nèi)更高效的純化生產(chǎn)，若在較高流速下仍能保持高的動態(tài)結(jié)合載量，則更有利于兼顧生產(chǎn)效率和產(chǎn)量；

長壽命：層析介質(zhì)成本普遍較高，使用時間的長短會在一定程度上影響純化的經(jīng)濟性，也能從某種程度上避免更換填料帶來的潛在問題；

高耐堿性：耐受0.5 M NaOH溶液清洗，可以有效控制生物負荷，高效防止?jié)撛诘奈廴景l(fā)生，且在經(jīng)過100 Cycles清洗后，動態(tài)載量仍要維持在95%以上；

高機械強度：機械強度高可確保色譜介質(zhì)能承受更高流速和柱壓，高濃度樣品可直接上樣，可選生產(chǎn)條件更廣泛，生產(chǎn)效率也更高，且在工藝放大和生產(chǎn)中可裝填更高柱高，有效提升單批產(chǎn)能，減少批次數(shù)量和QC等部門檢驗數(shù)量等諸多成本，確保更高生產(chǎn)效率和企業(yè)效益；

純化重復(fù)穩(wěn)定性好：色譜介質(zhì)批次間穩(wěn)定性高，能夠確保滿足純化生產(chǎn)的工藝要求和純化效率，大大降低純化生產(chǎn)中變量因素的干擾，節(jié)約人力和時間成本。

技術(shù)服務(wù)及時方便：授人以魚更要授人以漁，優(yōu)質(zhì)的填料搭配專業(yè)及時的分離純化技術(shù)服務(wù)才能實現(xiàn)全方位為客戶服務(wù)的最佳效果，最大限度提升客戶的純化體驗，及時解決分離純化中出現(xiàn)的問題，高效且專業(yè)；

供應(yīng)鏈安全可靠：除了穩(wěn)定的供貨能力及產(chǎn)能，供應(yīng)商資質(zhì)健全規(guī)范等達標(biāo)外，還需要確保色譜介質(zhì)不會因為外在原因而存在斷供或禁令風(fēng)險等。

應(yīng)該說長久以來色譜層析介質(zhì)的研發(fā)和生產(chǎn)技術(shù)一直壟斷在外國人的手里，這種壟斷性經(jīng)營不是國人在色譜領(lǐng)域發(fā)表幾篇學(xué)術(shù)論文或者取得幾項突破進展就能夠扭轉(zhuǎn)的，盡管此前有報道稱中國在色譜純化領(lǐng)域的論文發(fā)表量已經(jīng)躍居世界第一。近年來，我們屢屢見諸報道的是西方世界在芯片等高科技領(lǐng)域?qū)ξ覀冞M行“卡脖子”式的封鎖和斷供，越來越多的企業(yè)開始意識到掌握自主可控的核心技術(shù)的重要性：在色譜層析領(lǐng)域，納微科技就是一家這樣的企業(yè)，下面我們就以Protein A親和填料為例，看看我們的高科技國產(chǎn)填料具備哪些優(yōu)秀的特性可以在滿足上述關(guān)鍵考核要素的情況下，去對昂貴的國外壟斷產(chǎn)品展開自主可控的替代。

 

單分散UniMab® 特色一：高機械強度和高動態(tài)載量

如上圖，單分散UniMab層析介質(zhì)與多分散軟膠基質(zhì)Protein A親和層析介質(zhì)的壓力流速線性關(guān)系對比可見UniMab機械強度更好，高機械強度可以在使用中帶來以下優(yōu)點：

① 提高生產(chǎn)效率和流速，縮短純化周期；

② 可裝填長柱，提高批次處理量，更短的時間處理更多的樣品；

③ 可重復(fù)裝柱，延長使用壽命；

④ 直接上高濃度、高粘度樣品；

⑤ 減少碎片避免篩板堵塞，降低壓力；

⑥ 更寬的操作空間。

此外，上圖還對比了在不同保留時間下，兩款填料的DBC（動態(tài)結(jié)合能力）數(shù)值變化，可以明顯的看出UniMab在同等保留時間下對目標(biāo)蛋白的動態(tài)載量更高，由于層析都是在一定流速下進行的，因此填料的動態(tài)載量更能有效地用于指導(dǎo)確定上樣量。從圖中我們可以看出，盡管兩種層析介質(zhì)在低流速度條件下載量差不多，但在高流速條件下UniMab 載量比Agarose Type Protein A Resin 高很多。正是由于單分散的UniMab粒徑均一，孔道穿透性好，抗體與Protein A 配基結(jié)合快，因此UniMab 在高流速（柱保留時間短）條件下具有更高載量，這將非常有利于客戶提高生產(chǎn)效率、降低生產(chǎn)成本。

 

單分散 UniMab® 特色二：動態(tài)載量穿透曲線圖

相較軟膠基質(zhì)Protein A親和層析介質(zhì)，納微 UniMab有更陡的動態(tài)載量流穿曲線說明納微填料的孔道結(jié)構(gòu)更有利于抗體快速傳質(zhì)。

 

單分散 UniMab® 特色三：等保留時間放大，裝更高柱床

高機械強度讓UniMab可以裝填更高柱床，以提高批次處理量，降低緩沖液用量，從而提高生產(chǎn)效率，節(jié)約生產(chǎn)成本和能耗。

關(guān)于UniMab層析介質(zhì)采用等保留時間進行工藝放大生產(chǎn)，可詳見本公眾號于2018年1月5日發(fā)布的文章《提高單抗純化產(chǎn)率，只有等高放大嗎》或直接撥打熱線電話與我們溝通交流。

 

單分散 UniMab® 特色四：配基鍵合穩(wěn)定，循環(huán)使用較少脫落

在多次循環(huán)使用Protein A親和層析介質(zhì)進行抗體純化后，如果層析介質(zhì)上鍵合的Protein A脫落少說明層析填料的基質(zhì)和配基鍵合的穩(wěn)定性更好，這對于控制純化抗體的品質(zhì)和純度非常重要。從上表中的實驗數(shù)據(jù)來看，UniMab Protein A親和層析介質(zhì)的配基穩(wěn)定性明顯好于軟膠基質(zhì)的同類填料。

 

單分散 UniMab® 特色五：使用壽命長，生產(chǎn)成本低

如圖，UniMab Protein A親和層析介質(zhì)在10%的流穿條件下，經(jīng)過100次循環(huán)使用后，其動態(tài)結(jié)合載量依然能保持在90%左右。這樣一來不僅能明顯降低客戶的生產(chǎn)成本，也從側(cè)面更好地印證了UniMab親和填料的配基鍵合穩(wěn)定，脫落極低，能夠更好地確保純化生產(chǎn)穩(wěn)定有序地進行。

此外，納微新推出的UniMab Pro Protein A親和層析介質(zhì)作為全面升級版，在使用壽命方面表現(xiàn)更加出眾，有圖有真相！

 

單分散 UniMab® 特色六：色譜重現(xiàn)性良好，純化生產(chǎn)穩(wěn)定性高

上圖是用UniMab填料進行抗體純化150次后的制備色譜圖，可以很直觀地看出多次分離純化的圖譜能夠?qū)崿F(xiàn)完整得重合，可見其色譜重現(xiàn)性非常良好，不僅能夠滿足研發(fā)生產(chǎn)等環(huán)節(jié)的工藝要求和純化效率，而且大大降低了純化生產(chǎn)中變量因素的干擾，節(jié)約人力和時間成本。

 

單分散 UniMab® 特色七：提高生產(chǎn)效率和經(jīng)濟效益

UniMab是基于單分散聚甲基丙烯酸酯多孔微球合成的，其具有高度的粒徑均勻性，且孔道穿透性好，因此抗體與Protein A 配基結(jié)合快。UniMab在高流速下（柱保留時間短）具有更高載量，因此其可以在進行工藝放大時裝更高柱床，提高抗體的批處理量和生產(chǎn)效率。此前有研究稱，當(dāng)Protein A重復(fù)使用30次以上，流動相成本就會開始逐漸高于Protein A介質(zhì)的成本，而使用UniMab可以顯著降低流動相消耗，從而降低生產(chǎn)成本和廢液處理的環(huán)保成本。

總之，單分散UniMab Protein A親和層析介質(zhì)不僅對抗體的分離效率高，能夠以高回收率獲得純度高的抗體，還能顯著降低包括緩沖液用量及人力、時間等在內(nèi)的生產(chǎn)成本，目前已經(jīng)成為抗體及重組蛋白等生物大分子分離純化的首選之一。

 

納微 Protein A親和層析介質(zhì)：國產(chǎn)高科技色譜填料創(chuàng)新領(lǐng)先之選

今天，國內(nèi)企業(yè)普遍認識到我們應(yīng)當(dāng)以技術(shù)創(chuàng)新和產(chǎn)業(yè)化發(fā)展來針對國外壟斷的眾多關(guān)鍵技術(shù)領(lǐng)域進行快速突圍，把高科技自主可控的主動權(quán)和企業(yè)命脈牢牢掌握在自己手里，才能一勞永逸地解決“卡脖子”的問題。納微科技十多年如一日的科研攻關(guān)自主創(chuàng)新，最終成就了自身在納米微球精準(zhǔn)制造方面的隱形冠軍，應(yīng)該是值得國人為之驕傲和自豪的成就，而且目前連續(xù)流色譜層析新技術(shù)正日益受到國內(nèi)外企業(yè)的推崇，而納微單分散系列的色譜填料針對這項新技術(shù)的適配性非常良好，遠優(yōu)于傳統(tǒng)的多分散軟膠系列，如此看來我們不僅實現(xiàn)了對國外壟斷領(lǐng)域的突破，甚至在新技術(shù)應(yīng)用方面實現(xiàn)了趕超式的發(fā)展。

關(guān)于納微UniMab親和填料在雙柱連續(xù)流層析中的具體應(yīng)用表現(xiàn)，浙江大學(xué)化學(xué)工程與生物工程學(xué)院的林東強教授課題組還專門對比國際知名企業(yè)GE公司的MabSelect SuRe親和填料進行了深入研究，研究成果發(fā)表在中文核心期刊《高�；瘜W(xué)工程學(xué)報》上，論文題為《雙柱連續(xù)流層析親和分離抗體的過程設(shè)計與應(yīng)用》。林教授課題組通過認真翔實的全方面研究和數(shù)據(jù)分析，肯定了UniMab親和填料的出眾表現(xiàn)，可謂是為中國色譜“芯”的國產(chǎn)替代提供了又一力證。在此筆者附上這篇文章的網(wǎng)頁預(yù)覽圖，感興趣的讀者可以點擊論文網(wǎng)頁圖片，即可閱讀全文。

納微 Protein A親和層析介質(zhì)優(yōu)勢：

• 高機械強度，高流速下動態(tài)載量高，可以大幅提高生產(chǎn)效率

• 耐堿性良好，可以滿足CIP&SIP要求

• 使用壽命長，生產(chǎn)成本較低

• 緩沖液使用量顯著降低，進一步縮減生產(chǎn)成本

• 回收率高，目標(biāo)抗體純度高，低HCP殘留和Protein A配基脫落等優(yōu)異分離純化性能

• 世界首個可大規(guī)模生產(chǎn)的單分散Protein A親和層析介質(zhì)，是理想的連續(xù)層析介質(zhì)

 

納微提供高性價比抗體純化全套解決方案

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