應(yīng)用范圍: ·PBMCs, 全血, Car-T ·干細(xì)胞
·脾細(xì)胞
·單核細(xì)胞
·其它原代細(xì)胞
·T/NK 細(xì)胞介導(dǎo)的細(xì)胞毒性 |
三步法:
Countstar® Rigel系統(tǒng)通過簡單的三步操作,僅需20微升樣品,即可從樣品到結(jié)果,每個計(jì)數(shù)樣本都會自動顯示細(xì)胞總數(shù)、濃度和平均直徑等信息。+結(jié)果顯示界面。
快速和穩(wěn)定的檢測結(jié)果
Countstar® Rigel系統(tǒng)可以一次自動檢測5個樣品,這樣可以大大提高檢測效率和降低成本。同時結(jié)合專利的“固定焦距”,結(jié)果會更加穩(wěn)定和可靠。
符合GMP要求以及FDA 21 CFR Part 11
Countstar® Rigel系統(tǒng)是為了滿足現(xiàn)代制藥需求而設(shè)計(jì)。軟件符合21 CFR Part 11,包括電子簽名,電子記錄,審計(jì)追蹤功能等。于此同時,我們提供IQ/OQ服務(wù)以及PQ支持,幫助用戶建立一個可靠的檢測系統(tǒng)。
用戶友好和靈活的軟件系統(tǒng)
APP式管理,每一個實(shí)驗(yàn)類型可以被復(fù)制,不同的項(xiàng)目和不同的操作者可以有獨(dú)立的實(shí)驗(yàn)類型,數(shù)據(jù)會按照APP進(jìn)行分類,這樣可以使數(shù)據(jù)管理的工作大大簡化。Countstar® Rigel的軟件可以自動生成PDF報(bào)告。報(bào)告包含有關(guān)記錄數(shù)據(jù)的最關(guān)鍵信息的摘要。
4.Countstar® Rigel在免疫治療領(lǐng)域的應(yīng)用
免疫療法,如CAR-T治療包括從病人收集外周血單核細(xì)胞(PBMC),然后分離所需的T細(xì)胞亞群,通過基因改造產(chǎn)生工程CAR-T細(xì)胞,CAR-T細(xì)胞在體外大規(guī)模擴(kuò)增后再回輸?shù)交颊摺?Countstar® Rigel系統(tǒng)可以對整個CAR-T生產(chǎn)過程中細(xì)胞濃度,活率進(jìn)行監(jiān)測,并且符合GMP的要求。
AO/PI雙熒光法檢測活率:
吖啶橙和碘化丙啶是可以和細(xì)胞核核酸結(jié)合的熒光染料。AO可以穿透活細(xì)胞和死細(xì)胞對細(xì)胞核進(jìn)行染色并發(fā)出綠色熒光,PI進(jìn)入死細(xì)胞對細(xì)胞和進(jìn)行染色并發(fā)出紅色熒光。因此AO/PI為細(xì)胞核染料,可以準(zhǔn)確區(qū)分活細(xì)胞與死細(xì)胞,而且可以排除雜質(zhì)或者非特異細(xì)胞的干擾,進(jìn)行精準(zhǔn)的濃度活率檢測。
T/NK 細(xì)胞介導(dǎo)的細(xì)胞毒性
CAR-T療法,用基因工程的方法對T細(xì)胞進(jìn)行基因改造以產(chǎn)生可以直接和靶標(biāo)腫瘤細(xì)胞結(jié)合并攻擊的CAR-T細(xì)胞。
對靶標(biāo)細(xì)胞用無毒的無放射性的鈣黃綠素進(jìn)行標(biāo)記(或者GFP轉(zhuǎn)染標(biāo)記),我們可以觀察CAR-T細(xì)胞對腫瘤細(xì)胞殺傷效應(yīng)。活的腫瘤細(xì)胞會含有鈣黃綠素或者GFP,死的腫瘤細(xì)胞不含有鈣黃綠素或者GFP。Hoechst33342被用來染色所有的細(xì)胞(包含T細(xì)胞和腫瘤細(xì)胞),PI用來染色所有的死細(xì)胞(包含T細(xì)胞和腫瘤細(xì)胞)。這種染色策略可以讓我們對細(xì)胞進(jìn)行精準(zhǔn)的區(qū)分。
細(xì)胞毒性%=(對照組的活細(xì)胞數(shù) – 實(shí)驗(yàn)組的活細(xì)胞數(shù))/(對照組的活細(xì)胞數(shù)x 100)
E:T比率對K562的細(xì)胞毒性研究
隨著E:T比率增加,所得熒光圖像顯示Hoechst + CFSE + PI +靶細(xì)胞的增加
細(xì)胞凋亡:
細(xì)胞凋亡的測定是通過測量細(xì)胞早期凋亡激活的標(biāo)記來了解細(xì)胞如何死亡。這些是凋亡細(xì)胞的特定生物化學(xué)和形態(tài)學(xué)標(biāo)記,而在正常細(xì)胞和壞死細(xì)胞中不發(fā)生的此變化。使用Countstar FL通過Hoechst 33342,AnnexinV-FITC,PI標(biāo)記細(xì)胞, 可以將細(xì)胞分成不同的階段。該Counstar軟件可以通過直接計(jì)數(shù)提供即時結(jié)果。
GFP轉(zhuǎn)染
GFP可通過轉(zhuǎn)基因技術(shù)引入動物細(xì)胞或其他微生物。 Countstar Rigel S3為檢測GFP轉(zhuǎn)染提供了一種快速簡便的檢測方法。用Hoechst 33342和碘化丙啶(PI)染色來確定總細(xì)胞群和死細(xì)胞群以及檢測表達(dá)GFP的群體。該軟件可以通過直接計(jì)數(shù)給出即時結(jié)果(包括GFP陽性百分比,濃度和活率)
臺盼藍(lán)細(xì)胞濃度和活率分析
Countstar® Rigel也可以通過臺盼藍(lán)染色法對細(xì)胞進(jìn)行活率和濃度的測定。這里顯示的是細(xì)胞系的放大代表圖像。由于所有細(xì)胞都用臺盼藍(lán)染色,顯示細(xì)胞臺盼藍(lán)染色圖像以及Countstar S1細(xì)胞識別圖像。