環(huán)凱推出恒溫擴(kuò)增熒光法檢測試劑盒

瀏覽次數(shù)：16153　發(fā)布日期：2017-11-7　來源：www.huankai.com

環(huán)凱近期推出全新高通量快速檢測試劑盒，該試劑盒基于基于環(huán)介導(dǎo)恒溫擴(kuò)增技術(shù)(LAMP)熒光法檢測技術(shù)，無需常規(guī)PCR中變性、退火、延伸等步驟不同溫度設(shè)計要求，只需提供一個適宜的恒定溫度即可。

一、技術(shù)原理：

試劑盒基于環(huán)介導(dǎo)恒溫擴(kuò)增技術(shù)(LAMP)熒光法檢測，利用兩對特殊引物和具有鏈置換活性的Bst DNA聚合酶，使模板兩端引物結(jié)合處循環(huán)出現(xiàn)環(huán)狀單鏈結(jié)構(gòu)，引物順利與模板結(jié)合并進(jìn)行鏈置換擴(kuò)增反應(yīng)，實(shí)現(xiàn)在恒溫條件下（60-65℃）進(jìn)行連續(xù)快速擴(kuò)增。反應(yīng)體系中加入了顯色指示劑，陰陽性結(jié)果顯色差異顯著，擴(kuò)增結(jié)束后可以通過觀察熒光顯色劑的顏色變化判讀結(jié)果，無需開蓋避免了擴(kuò)增產(chǎn)物交叉感染性的可能性。LAMP是一種新型的恒溫核酸擴(kuò)增技術(shù)，與常規(guī)PCR相比，LAMP技術(shù)更適合現(xiàn)場高通量快速檢測，具有簡單、快速、特異性強(qiáng)的特點(diǎn)。

二、應(yīng)用范圍

恒溫擴(kuò)增熒光法檢測技術(shù)可運(yùn)用于快速檢測食品中的沙門氏菌、金黃色葡萄球菌、志賀氏菌、單核增生李斯特菌、副溶血弧菌、大腸桿菌O157：H7、阪崎腸桿菌、小腸結(jié)腸耶爾森氏菌、銅綠假單胞菌、糞腸球菌、產(chǎn)氣莢膜梭菌等微生物檢測。

應(yīng)用于食品快速檢測有兩種方式：

1、快速篩查。對食品樣品快速增菌后，直接采用基因檢測試劑盒來快速篩查有沒可疑致病菌（對大多數(shù)致病菌在13小時內(nèi)即可完成篩查）；

2、快速鑒定。對食品樣品進(jìn)行增菌，平板分離，使用基因檢測試劑盒對可疑菌落進(jìn)行快速準(zhǔn)確的鑒定（1小時內(nèi)完成鑒定）。

三、快速篩查食品中致病菌操作流程

四、快速鑒定可疑菌落操作流程

菌落檢測流程

五、環(huán)凱恒溫擴(kuò)增試劑盒特點(diǎn)

操作簡單：通過幾部加樣后，60-65℃范圍內(nèi)恒溫條件下即可完成擴(kuò)增。

使用便捷：一管式凍干，免去繁瑣的配制步奏。

儀器簡單：擴(kuò)增條件簡單，能提供恒溫裝置即可。

特異性高：比傳統(tǒng)PCR靈敏度高10-100倍，可檢測5-20個拷貝。

快速判讀：使用合適的增菌液收集到足夠菌體后，40-60分鐘內(nèi)可完成檢測，肉眼觀察顏色變化即可判讀結(jié)果。全部檢驗流程僅需約13h（詳細(xì)檢驗流程參見說明書）。

六、環(huán)凱恒溫擴(kuò)增試劑盒組成

七、環(huán)凱恒溫擴(kuò)增試劑盒操作指南

八、恒溫擴(kuò)增試劑盒產(chǎn)品列表

食源性致病微生物檢測系列	貨號	規(guī)格	最低檢驗限
沙門氏菌核酸檢測試劑盒（恒溫?zé)晒夥ǎ?/P>	KJD05L	24tests	14 CFU/Test
金黃色葡萄球菌核酸檢測試劑盒（恒溫?zé)晒夥ǎ?/P>	KJD04L	24tests	15 CFU/Test
志賀氏菌核酸檢測試劑盒（恒溫?zé)晒夥ǎ?/P>	KJD06L	24tests	6 CFU/Test
單核增生李斯特菌核酸檢測試劑盒（恒溫?zé)晒夥ǎ?/P>	KJD07L	24tests	8 CFU/Test
副溶血弧菌核酸檢測試劑盒（恒溫?zé)晒夥ǎ?/P>	KJD08L	24tests	4 CFU/Test
大腸桿菌O157：H7核酸檢測試劑盒（恒溫?zé)晒夥ǎ?/P>	KJD09L	24tests	29 CFU/Test
阪崎腸桿菌核酸檢測試劑盒（恒溫?zé)晒夥ǎ?/P>	KJD10L	24tests	23 CFU/Test
小腸結(jié)腸耶爾森氏菌核酸快速檢測試劑盒（恒溫?zé)晒夥ǎ?/P>	KJD11L	24tests	18 CFU/Test

水源性致病微生物檢測系列	貨號	規(guī)格	最低檢驗限
銅綠假單胞菌核酸檢測試劑盒（恒溫?zé)晒夥ǎ?/P>	KJD01L	24tests	8 CFU/Test
糞腸球菌核酸檢測試劑盒（恒溫?zé)晒夥ǎ?/P>	KJD02L	24tests	9 CFU/Test
產(chǎn)氣莢膜梭菌核酸檢測試劑盒（恒溫?zé)晒夥ǎ?/P>	KJD03L	24tests	11 CFU/Test

九、恒溫擴(kuò)增快速檢測所需配套增菌培養(yǎng)基列表

檢測項目	貨號	品種名稱		規(guī)格
銅綠假單胞菌	027047		銅綠假單胞菌增菌肉湯	250g/瓶
糞鏈球菌	028340		疊氮化鈉葡萄糖液態(tài)培養(yǎng)基	250g/瓶
產(chǎn)氣莢膜梭菌	027145		梭菌增菌培養(yǎng)基	250g/瓶
金黃色葡萄菌	024052		7.5%氯化鈉胰酪胨大豆肉湯	250g/瓶
沙門氏菌	023030		四硫磺酸鈉煌綠增菌液（TTB）	250g/瓶
	SR0040		TTB配套試劑	2×5支/盒
志賀氏菌	023141		志賀氏菌增菌肉湯	250g/瓶
	SR0380		志賀氏菌增菌肉湯配套試劑	10支/盒
單增李斯特菌	026040		李氏增菌肉湯（LB1，LB2）基礎(chǔ)	250g/瓶
	SR0100		李氏增菌肉湯LB1配套試劑	2×5支/盒
副溶血性弧菌	025015		3%氯化鈉堿性蛋白胨水	250g/瓶
大腸桿菌0157：H7	028112		改良EC肉湯基礎(chǔ)	250g/瓶
	SR0030		改良EC肉湯配套試劑（新生霉素）	10支/盒
阪崎腸桿菌	022212		改良月桂基硫酸鹽胰蛋白胨肉湯基礎(chǔ)（MLST）	250g/瓶
	SR0180		改良月桂基硫酸鹽胰蛋白胨肉湯配套試劑	10支/盒
小腸結(jié)腸耶爾森氏菌	029905		改良磷酸鹽緩沖液（PSB）	250g/瓶