① BV2是一種半貼壁半懸浮細(xì)胞,它的形態(tài)并不規(guī)則,存在圓形和梭形兩種。懸浮細(xì)胞為圓形,貼壁細(xì)胞既有圓形也有梭形。由于圓形細(xì)胞折光率高,它的邊緣看起來(lái)是發(fā)亮的;梭形細(xì)胞則向兩端伸出黑色突起。
② BV2細(xì)胞傳代比例1:3-1:6,傳代周期2-3天,中途每2~3天需要進(jìn)行補(bǔ)液或者換液,維持細(xì)胞所需營(yíng)養(yǎng)。① BV2細(xì)胞凍存復(fù)蘇細(xì)胞貼壁性差,基本處于懸浮細(xì)胞狀態(tài),細(xì)胞培養(yǎng)48小時(shí)后收集懸浮細(xì)胞和貼壁細(xì)胞,再次分瓶傳代,細(xì)胞會(huì)呈現(xiàn)多邊形貼壁細(xì)胞和懸浮細(xì)胞兩種形態(tài)。
② BV2細(xì)胞正常細(xì)胞形態(tài)為半懸半貼,傳代時(shí)收集懸浮細(xì)胞在和通過(guò)胰酶消化后的貼壁細(xì)胞合并一起分瓶傳代培養(yǎng)。
解決方案:給細(xì)胞換上新鮮配制的培養(yǎng)基,并使用透氣瓶。
異常形態(tài)2:細(xì)胞形態(tài)變?yōu)榘⒚装蜆?/span>
解析:小膠質(zhì)細(xì)胞是一種可塑性極高的細(xì)胞,可通過(guò)特定因素激活,從而發(fā)揮其免疫功能。從靜息態(tài)變?yōu)榧せ顟B(tài)的過(guò)程中,小膠質(zhì)細(xì)胞形態(tài)也隨之發(fā)生改變。
實(shí)驗(yàn)中常用細(xì)菌脂多糖(LPS)和干擾素-γ(IFNγ),分別模擬細(xì)菌和病毒感染,來(lái)刺激小膠質(zhì)細(xì)胞激活。受到刺激的小膠質(zhì)細(xì)胞突起縮短變厚,胞體增大,呈現(xiàn)阿米巴樣,如果細(xì)胞沒有受到任何刺激,就已經(jīng)呈現(xiàn)阿米巴樣,那么細(xì)胞有可能發(fā)生了自分化。
其原因可以從以下幾點(diǎn)考慮:
① 存在潛在微生物污染,刺激細(xì)胞自分化。
解決方案:通過(guò)去掉培養(yǎng)基中的抗生素確定污染類型,并排查污染源頭。
② 使用的胎牛血清內(nèi)毒素高,內(nèi)毒素刺激細(xì)胞自分化。
解決方案:嘗試使用其他胎牛血清品牌,或許能得到改善。
異常形態(tài)3:全都是分枝狀細(xì)胞,圓形細(xì)胞少
解析:這種形態(tài)往往伴隨著細(xì)胞生長(zhǎng)慢或生長(zhǎng)停滯的情況。由于圓形細(xì)胞增殖速度較快,在圓形細(xì)胞缺失的狀況下,整體增殖速度就會(huì)減慢。
解決方案:由于BV2是一種半貼壁半懸浮細(xì)胞,貼壁和懸浮細(xì)胞的比例并不固定,當(dāng)懸浮細(xì)胞較多時(shí),換液和傳代時(shí)要將懸浮細(xì)胞收集,避免圓形細(xì)胞的大量損失。