上一期我們發(fā)表了MesenPlifyTM 無血清無異種成分人類間充質(zhì)干細(xì)胞擴(kuò)增培養(yǎng)基產(chǎn)品技術(shù)資料中產(chǎn)品介紹部分,讓大家充分了解我們的培養(yǎng)基,在后續(xù)的操作上提供一定的信息基礎(chǔ)。
產(chǎn)品技術(shù)資料(材料準(zhǔn)備部分)
MesenPlifyTM 干細(xì)胞擴(kuò)增培養(yǎng)基
所需材料
★TrypLE Express Enzyme(1X)重組胰蛋白酶或0.25% Trypsin-EDTA (1X)胰蛋白酶
★D-PBS(無 Ca++, 無 Mg++)
★Cuture dish and flasks培養(yǎng)皿和培養(yǎng)瓶
★Polypropylene conical tubes聚丙烯錐形管等
配置完全培養(yǎng)基
(注意:所有步驟需在生物安全柜中采用無菌技術(shù)執(zhí)行。)
01、在2-8°C下(過夜)解凍MesenPlifyTM sXF補(bǔ)充劑。急用時(shí),也可以在室溫下解凍,并立即使用。應(yīng)避免在37°C下解凍。
(TIPS:解凍后的補(bǔ)充劑可分裝后在-20°C下冷凍存儲,分裝保存的補(bǔ)充劑應(yīng)避免多次重復(fù)凍融。例如,將補(bǔ)充劑分裝為6mLx5支,使用前解凍并與94mL 基礎(chǔ)培養(yǎng)基混合。
02、將30mL的MesenPlifyTM sXF補(bǔ)充劑加入到470mL的MesenPlifyTM sXF基礎(chǔ)培養(yǎng)基中,總體積500mL,充分混合。
(TIPS:如有需要使用抗生素,可以添加到完全培養(yǎng)基最終體積的1%。)
03、將制備好的MesenPlifyTM sXF完全培養(yǎng)基儲存于2-8°C的陰涼處,避光,最長可保存2周。
(TIPS:也可以將配置好的完全培養(yǎng)基分裝,并在-20°C下冷凍存儲。分裝保存的完全培養(yǎng)基應(yīng)避免反復(fù)凍融。)
特別提示:按此步驟配制好的MesenPlifyTM sXF完全培養(yǎng)基可直接使用,無需再次進(jìn)行無菌化處理。如有需要,可用0.2微米濾膜進(jìn)行額外的過濾步驟,但不可以用高溫高壓的方式滅菌。
安全信息
所有人類源性材料(例如 hMSCs、hPL)可能會視為潛在傳染源。
請閱讀產(chǎn)品安全技術(shù)說明書(SDS),遵循生物安全級別2(BSL-2)的實(shí)踐方法,穿戴適當(dāng)?shù)膫(gè)人防護(hù)裝備,在經(jīng)過認(rèn)證的生物安全柜中使用這些材料。
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