CHO細(xì)胞是哺乳動物細(xì)胞中最常見的細(xì)胞系之一，CHO是Chinese Hamster Ovary（中國倉鼠卵巢）的縮寫。這種細(xì)胞系是從中國倉鼠的卵巢組織中獲得的。CHO細(xì)胞系在生物制藥和生物學(xué)研究中被廣泛應(yīng)用，特別是在重組蛋白的產(chǎn)生和藥物研發(fā)方面。它具有較高的細(xì)胞生長速度、良好的穩(wěn)定性和較強的表達(dá)能力，使其成為一種理想的工具細(xì)胞系。CHO細(xì)胞系的種類繁多，其中最常見的有CHO-S、CHO-K和CHO-DG44等3種。
一、CHO-S細(xì)胞系-CHO-K細(xì)胞系和 CHO-DG44細(xì)胞系的特點：
1. CHO-S細(xì)胞系：
CHO-S（CHO Suspension）是CHO細(xì)胞系中的一種，它是一種懸浮細(xì)胞系，具有較高的生長速度和產(chǎn)量。由于其適應(yīng)性廣泛，CHO-S細(xì)胞常被用于重組蛋白的大規(guī)模表達(dá)和生產(chǎn)。CHO-S細(xì)胞系的特點有：
- 生長速度快，能夠適應(yīng)高密度培養(yǎng)；
- 蛋白質(zhì)表達(dá)水平高，適合大規(guī)模表達(dá)；
- 適用于多種表達(dá)系統(tǒng)，如哺乳動物細(xì)胞表達(dá)系統(tǒng)、真核細(xì)胞和原核細(xì)胞表達(dá)系統(tǒng)；
- 可以通過基因工程進(jìn)行改造，如基因敲除或過表達(dá)特定基因。
 
2. CHO-K細(xì)胞系：
CHO-K（CHO K1）是CHO細(xì)胞系中的另一種常見細(xì)胞系。CHO-K細(xì)胞系是攜帶有豐富乳糜酶A（Lactate Dehydrogenase）的細(xì)胞系，主要用于產(chǎn)生病毒疫苗、重組疫苗和抗體等。CHO-K細(xì)胞系的特點有：
- 乳酸代謝能力強，適合大規(guī)模培養(yǎng)和發(fā)酵；
- 乳糖酶A活性高，能夠?qū)θ樘沁M(jìn)行降解；
- 在病毒疫苗和抗體藥物生產(chǎn)中的應(yīng)用廣泛；
- 可以通過基因工程進(jìn)行改造，如改變酶活性或增加對特定抗原的敏感性。
 
3. CHO-DG44細(xì)胞系：
CHO-DG44是一種雙倍體的CHO細(xì)胞系，常用于抗體的生產(chǎn)和分泌表達(dá)。CHO-DG44細(xì)胞系的特點有：
- 在有限培養(yǎng)條件下能夠?qū)崿F(xiàn)高重組抗體的產(chǎn)量；
- 可以進(jìn)行高密度培養(yǎng)和持續(xù)培養(yǎng)；
- 穩(wěn)定遺傳性強，能夠長期保持克隆的表達(dá)特性；
- 適合于抗體藥物生產(chǎn)和高通量篩選。
 
二、這三種細(xì)胞系在培養(yǎng)方法上的主要區(qū)別：
 
CHO-K細(xì)胞系、CHO-S細(xì)胞系和CHO-DG44細(xì)胞系是CHO細(xì)胞系的不同亞型，它們在培養(yǎng)方式上存在一些區(qū)別：
 
1. 細(xì)胞生長特性：
   - CHO-K細(xì)胞系：CHO-K細(xì)胞系是最常用的CHO細(xì)胞系之一，生長速度較快，適應(yīng)性較強。
   - CHO-S細(xì)胞系：CHO-S細(xì)胞系是另一種常用的CHO細(xì)胞系，生長速度相對較慢，但穩(wěn)定性較好。
   - CHO-DG44細(xì)胞系：CHO-DG44細(xì)胞系是一種具有較高表達(dá)能力的CHO細(xì)胞系，通常用于大規(guī)模蛋白質(zhì)表達(dá)。
 
2. 培養(yǎng)要求和介質(zhì)選擇：
   - CHO-K細(xì)胞系：CHO-K細(xì)胞系可以在常規(guī)的DMEM或RPMI 1640等常見培養(yǎng)基中生長，并且對血清的需求較低。
   - CHO-S細(xì)胞系：CHO-S細(xì)胞系通常在CD系列的無血清培養(yǎng)基中生長，如CD-CHO、CD OptiCHO等。
   - CHO-DG44細(xì)胞系：CHO-DG44細(xì)胞系通常在CD系列的無血清培養(yǎng)基中生長，如CD-DG44。
 
3. 表達(dá)能力和適用范圍：
   - CHO-K細(xì)胞系和CHO-S細(xì)胞系在蛋白質(zhì)表達(dá)方面具有較高的潛力，可用于表達(dá)多種重組蛋白。
   - CHO-DG44細(xì)胞系在高效表達(dá)重組蛋白方面表現(xiàn)出色，常用于生產(chǎn)大規(guī)模的重組蛋白。
 
雖然這些細(xì)胞系在培養(yǎng)方法上存在差異，但都需要培養(yǎng)在無菌、溫度恒定、氣體調(diào)節(jié)等條件下，并使用適當(dāng)?shù)呐囵B(yǎng)基、補充物和培養(yǎng)方法來維持細(xì)胞的健康生長和增殖。具體的培養(yǎng)方法應(yīng)根據(jù)細(xì)胞系的特性和要求進(jìn)行調(diào)整和優(yōu)化。
 
二、CHO-S細(xì)胞系的應(yīng)用。
 
CHO-S細(xì)胞系作為一種常用的啟動細(xì)胞系，廣泛應(yīng)用于生物制藥領(lǐng)域。以CHO-S細(xì)胞系為基礎(chǔ)，通過基因工程技術(shù)和相應(yīng)的培養(yǎng)條件調(diào)控，可以實現(xiàn)特定重組蛋白的高效表達(dá)和產(chǎn)量提高。例如，CHO-S細(xì)胞系被用于生產(chǎn)一些世界知名的生物藥物，如抗體藥物 trastuzumab（赫賽珠單抗）和 rituximab（利妥昔單抗）等。
 
此外，CHO-S細(xì)胞系的研究和應(yīng)用也涉及到基因編輯和基因調(diào)控等前沿領(lǐng)域。近年來，人們利用CRISPR-Cas9基因編輯技術(shù)成功實現(xiàn)了對CHO-S細(xì)胞系中特定基因的功能敲除或過表達(dá)，從而進(jìn)一步優(yōu)化細(xì)胞的性狀和產(chǎn)物的表達(dá)。
 
總體而言，CHO細(xì)胞系在生物制藥領(lǐng)域發(fā)揮了重要的作用，其應(yīng)用不僅限于蛋白質(zhì)表達(dá)和生產(chǎn)，還涉及基因編輯和基因調(diào)控研究。CHO-K細(xì)胞系、CHO-S細(xì)胞系和CHO-DG44細(xì)胞系在細(xì)胞生長特性、培養(yǎng)要求和介質(zhì)選擇以及表達(dá)能力和適用范圍上存在一些差異。選擇合適的CHO細(xì)胞系應(yīng)根據(jù)實驗或生產(chǎn)需求和目標(biāo)蛋白的特性來確定。