我們知道,細(xì)胞體外培養(yǎng)時(shí)需要在培養(yǎng)基中加入血清,以維持細(xì)胞的生長(zhǎng)和存活。血清,尤其是牛血清,因成分復(fù)雜、批間差大和存在病原體污染的可能性等原因廣為人們所詬病,而無(wú)血清培養(yǎng)基添加物卻日益受到科研和生物制藥用戶的青睞。BioGems(PeproTech旗下品牌)為您提供多種無(wú)血清培養(yǎng)基添加物 (見(jiàn)下表)。 |
≡ ITS ≡ |
ITS (Insulin-Transferrin-Selenium 胰島素-轉(zhuǎn)鐵蛋白-硒)是BioGems推出的第一種無(wú)血清培養(yǎng)基添加物混合裝,除含有胰島素和轉(zhuǎn)鐵蛋白外,還含有另一種無(wú)血清培養(yǎng)基必須添加物---硒 (Selenium)。硒是一種微量元素,是谷胱甘肽過(guò)氧化物酶、硫氧還蛋白還原酶和其他抗氧化物酶的關(guān)鍵組分。 |
≡ ITSE ≡ |
≡ 胰島素//Insulin ≡ |
胰島素(Insulin)由Sir Frederick Grant Banting和Charles H Best于1921年發(fā)現(xiàn),因其特異性由胰島β細(xì)胞分泌而得名。 |
Insulin結(jié)構(gòu)圖 |
無(wú)血清培養(yǎng)基中,胰島素為必加組分,它可以促進(jìn)無(wú)血清細(xì)胞培養(yǎng)液中細(xì)胞的生長(zhǎng),調(diào)節(jié)細(xì)胞對(duì)葡萄糖、氨基酸和脂類的攝取、利用和儲(chǔ)存,同時(shí)抑制糖原、蛋白質(zhì)和脂肪的分解。需要注意的是,胰島素對(duì)細(xì)胞的促生長(zhǎng)作用主要是通過(guò)其與細(xì)胞膜上胰島素樣生長(zhǎng)因子(Insulin-like growth factors, IGFs)受體相互作用而介導(dǎo)的;而對(duì)細(xì)胞的代謝調(diào)節(jié)作用主要是通過(guò)其與細(xì)胞膜上的胰島素受體(Insulin receptor, IR)相互作用而介導(dǎo)的。此外,胰島素也可通過(guò)IGFR與IR的介導(dǎo),發(fā)揮抗凋亡作用。
體外培養(yǎng)不同類型細(xì)胞時(shí),無(wú)血清培養(yǎng)基中所添加的胰島素量也有所區(qū)別,一般在1-10mg/L之間。
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≡ 轉(zhuǎn)鐵蛋白//Transferrin ≡ |
轉(zhuǎn)鐵蛋白(Transferrin)于1945年首先在人血清中發(fā)現(xiàn),為無(wú)血清培養(yǎng)基必需添加物組分,通過(guò)與轉(zhuǎn)鐵蛋白受體(Transferrin Receptor , TfR) 相互作用,在無(wú)血清細(xì)胞培養(yǎng)過(guò)程中發(fā)揮重要功能。轉(zhuǎn)鐵蛋白能與三價(jià)鐵離子可逆性結(jié)合,調(diào)節(jié)鐵離子轉(zhuǎn)運(yùn)及代謝,維持細(xì)胞內(nèi)的鐵平衡。我們對(duì)轉(zhuǎn)鐵蛋白的轉(zhuǎn)鐵作用都很了解,但其實(shí)它最重要的意義在于維持細(xì)胞的生長(zhǎng)和增殖,也就是說(shuō)它有類似于生長(zhǎng)因子的功能。而且,轉(zhuǎn)鐵蛋白也是一種重要的胞外抗氧化劑,可以避免細(xì)胞外環(huán)境中自由基的產(chǎn)生,防止細(xì)胞受到傷害。 |
Transferrin結(jié)構(gòu)圖 |
BioGems的Transferrin 為Holo-transferrin, Holo-transferrin 除發(fā)揮轉(zhuǎn)鐵作用外,自身即可作為細(xì)胞的鐵源,無(wú)需在培養(yǎng)基中添加外源性鐵。不同細(xì)胞,對(duì)轉(zhuǎn)鐵蛋白的需求量不同,一般原代細(xì)胞的推薦濃度為5 -100mg/L;中國(guó)倉(cāng)鼠卵巢細(xì)胞(CHO)推薦濃度為10 -50mg/L;雜交瘤和Vero細(xì)胞推薦濃度為5 -20mg/L。具體使用濃度還是要根據(jù)細(xì)胞的種類、狀態(tài)和想要實(shí)現(xiàn)的功能來(lái)通過(guò)實(shí)驗(yàn)確定。 |
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