石蠟包埋組織樣本提取出高質(zhì)量DNA/RNA的難點和注意事項
瀏覽次數(shù):4017 發(fā)布日期:2019-12-5
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從石蠟包埋組織本中提取可用于下游應(yīng)用的高質(zhì)量的生物分子是比較困難的,存在的主要難題是DNA的斷裂和脫蠟過程中樣品的丟失。那么如何從石蠟包埋的組織樣本中提取出高質(zhì)量的DNA/RNA就成了關(guān)鍵問題,這里推薦專用的BIOG石蠟包埋組織DNA抽提試劑盒。
BIOG石蠟包埋組織DNA提取試劑盒(BIOG DNA FFPE Tissue Kit)專為快速高效的從福爾馬林固定、石蠟包埋的組織樣本中提取DNA而設(shè)計。BIOG石蠟包埋組織DNA提取試劑盒使用BIODAI特別研制的裂解液釋放組織中的DNA,并使用反復(fù)優(yōu)化的消化液去除DNA交聯(lián)和已經(jīng)降解的小片段DNA。BIOG DNA FFPE Tissue Kit采用進口離子膜吸附DNA,而大多數(shù)蛋白質(zhì)、多糖和脂類物資則被去除。與其它品牌的同類產(chǎn)品相比,使用BIOG石蠟包埋組織DNA提取試劑盒提取得到的DNA純度更高,可以直接應(yīng)用于各種PCR、Southern Blotting和限制性酶切實驗等。
下面簡單介紹BIOG石蠟包埋組織DNA提取試劑盒部分操作步驟:
1.請自行準備:無水乙醇、生理鹽水、二甲苯及1.5mL離心管。
(詳細步驟見BIOG石蠟包埋組織DNA提取試劑盒說明書)
12.取出吸附柱,放入新的1.5 mL 離心管內(nèi),加入50-100 μL 洗脫液,靜置3分鐘,12,000 rpm 4℃離心2分鐘,收集DNA溶液。提取的DNA即可用于下一步實驗或-20℃保存。
BIOG石蠟包埋組織DNA提取試劑盒操作注意事項:
本試劑盒提取DNA品質(zhì)有賴于樣本本身的質(zhì)量,組織是否及時固定、固定時間、固定劑種類等均影響DNA的完整性。裂解液、析出液、消化液、洗滌液含有刺激性化學(xué)物質(zhì),操作過程請做好防護措施,避免直接接觸皮膚,防止吸入口鼻。如不慎沾染皮膚或眼睛,請立即用清水或生理鹽水沖洗,必要時請就醫(yī)。裂解液如有白色絮狀物析出屬正常現(xiàn)象,置于37℃水浴中溶解即可。
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