“喂好傲嬌的細(xì)胞,口糧選擇很重要”
培養(yǎng)基供給細(xì)胞營養(yǎng),
促使細(xì)胞增殖,
也是細(xì)胞賴以生長的環(huán)境。
細(xì)胞要吃什么?
選擇什么樣的培養(yǎng)基?
是細(xì)胞培養(yǎng)能否成功的重要因素
經(jīng)典培養(yǎng)基包括
MEM、DMEM、RPMI1640、DMEM:F12
McCoy's 5A 、M-199
它們各自有什么成分?
適用于什么細(xì)胞?
我們又該如何選擇?
結(jié)合BI生產(chǎn)的基礎(chǔ)培養(yǎng)基,我們對(duì)以上問題做了如下總結(jié):
1. MEM
Minimal Essential Medium是最基本的培養(yǎng)基, 設(shè)計(jì)之初是為了培養(yǎng)HeLa細(xì)胞以及部分哺乳類的成纖維細(xì)胞。MEM含有12種必需氨基酸、谷氨酰胺和8種維生素,適合多種細(xì)胞單層生長。以MEM為基礎(chǔ),Stanner利用Earle'sBalanced Salts和非必需胺基酸(NEAA)進(jìn)一步配制成MEM-Alpha培養(yǎng)基,可廣泛用于哺乳動(dòng)物細(xì)胞的培養(yǎng)。
2. DMEM
Dulbecco’s Modified Eagle Medium(DMEM)是目前最常使用的改良式Eagle's培養(yǎng)基。DMEM與MEM含有相同的營養(yǎng)成分,但濃度高出2~4倍。主要用于快速生長的細(xì)胞,分低糖(1000mg/L)、高糖(4500mg/L)兩種。DMEM含更高濃度的NaHCO3,要用10%的CO₂來平衡,當(dāng)然也可以在較低CO₂濃度下使用。
DMEM-高糖(標(biāo)準(zhǔn)型)更適合高密度懸浮細(xì)胞培養(yǎng)。適用于附著性較差,但又不希望它脫離原來生長點(diǎn)的克隆培養(yǎng),也可用于雜交瘤中骨髓瘤細(xì)胞和DNA轉(zhuǎn)染的轉(zhuǎn)化細(xì)胞的培養(yǎng)。
DMEM-低糖(標(biāo)準(zhǔn)型)適于依賴性貼壁細(xì)胞培養(yǎng),特別適用于生長速度快、附著性較差的腫瘤細(xì)胞培養(yǎng)。
3. RPMI-1640
RPMI-1640營養(yǎng)成分比較簡單,比DMEM少一點(diǎn)糖和谷光甘肽,廣泛應(yīng)用于許多種正常細(xì)胞和腫瘤細(xì)胞、特殊造血細(xì)胞、正;驉盒栽錾陌准(xì)胞,雜交瘤細(xì)胞的培養(yǎng)。其它像K-562、HL-60、Jurkat、Daudi、IM-9等成淋巴細(xì)胞、T細(xì)胞淋巴瘤細(xì)胞以及HCT-15上皮細(xì)胞等均可參考使用。
4. DMEM :F12
F12培養(yǎng)基成分豐富,含有多種微量元素,和DMEM以1:1結(jié)合,稱為DMEM:F12培養(yǎng)基,作為無血清培養(yǎng)基的基礎(chǔ),以利用了F12含有較豐富的成分和DMEM含有較高濃度的營養(yǎng)成分為優(yōu)點(diǎn)。
該培養(yǎng)基適用于血清含量較低條件下哺乳動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)。為了增強(qiáng)該培養(yǎng)基的緩沖能力,可以在DMEM:F12(1:1)中加入15mM HEPES緩沖液。
5. McCoy's 5A
McCoy's 5A Medium 最早是用于肉瘤細(xì)胞的培養(yǎng)所設(shè)計(jì),可支持多種(如骨髓、皮膚、肺和脾臟等)的原代細(xì)胞的生長。除適于一般的原代細(xì)胞培養(yǎng)外,主要用于作組織活檢培養(yǎng)、一些淋巴細(xì)胞培養(yǎng)以及一些難培養(yǎng)細(xì)胞的生長支持。
6. M - 199
M-199培養(yǎng)基由Morgan等人研制,是第一個(gè)具有確定化學(xué)成分的細(xì)胞培養(yǎng)液,原本是用來研究雞胚原代細(xì)胞。除BSS外,含有53種成分,為全面培養(yǎng)基,此培養(yǎng)液必須輔以血清才能支持長期培養(yǎng)。主要用于雞胚成纖維細(xì)胞培養(yǎng)。M-199可用于培養(yǎng)多種種屬來源的細(xì)胞,并能培養(yǎng)轉(zhuǎn)染的細(xì)胞,廣泛用于病毒學(xué)、疫苗生產(chǎn)。
除了上述培養(yǎng)液,BI還提供DPBS、PBS、D-Hanks和細(xì)胞培養(yǎng)用水。一般細(xì)胞培養(yǎng)時(shí)用PBS/DPBS就可以了,Hanks/DHanks一般用到原代細(xì)胞消化分離操作實(shí)驗(yàn)中,如果分離時(shí)消化時(shí)間較長,建議Hanks。
Biological Industries(BI)是國際知名的以色列生物科技公司,BI公司不僅具有強(qiáng)大的研發(fā)能力,還和以色列及海外各大生命科學(xué)研究中心保持緊密聯(lián)系,并于1991年開發(fā)出第一款無血清培養(yǎng)基BIOGRO。BI公司產(chǎn)品主要涵蓋四大方面:細(xì)胞及組織培養(yǎng),細(xì)胞遺傳學(xué),分子生物學(xué),細(xì)胞因子、生長因子及蛋白激素類產(chǎn)品。
BI 基礎(chǔ)培養(yǎng)基
品質(zhì)卓越,批次穩(wěn)定—產(chǎn)品生產(chǎn)和質(zhì)檢嚴(yán)格按照國際cGMP標(biāo)準(zhǔn)執(zhí)行,每種產(chǎn)品都通過微生物檢測、pH測試、滲透壓和內(nèi)毒素檢測、以及細(xì)胞生長實(shí)驗(yàn),質(zhì)量穩(wěn)定可靠。
專業(yè)定制,值得信賴—根據(jù)您的需求,定制特殊細(xì)胞培養(yǎng)基及不同規(guī)格包裝,從500ml 至200L,提供適合您實(shí)驗(yàn)和生產(chǎn)所需的高品質(zhì)培養(yǎng)基。
種類齊全,現(xiàn)貨供應(yīng)—以下各種基礎(chǔ)培養(yǎng)基均備有現(xiàn)貨,貨源充足,供應(yīng)及時(shí)。
BI液體培養(yǎng)基相關(guān)信息:
此外,BI還擁有多種細(xì)胞輔助試劑,如下:
(部分文字引用)
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