PCR Array FAQ:
plate format |
Instrument provider |
QPCR instrument model |
A(384well) |
lifetechnologies |
7900,ViiA7(384 well block) |
B(96 well) |
lifetechnologies |
7300,7500,7700,7900(standard 96well),ViiA7(standard 96well) |
C(96 well) |
lifetechnologies |
7500(fast block),7900HT(fast block),stepone plus,ViiA 7(Fast block) |
D(96 well) |
Biorad |
iCycler,MyiQ, iQ5 |
E(96 well) |
Biorad |
CFX96,DNA Engine opticon,opticon 2,Chromo4 |
BioTNT PCR array的適用在哪里?
回答:適用現(xiàn)有的通路研究;
適用少樣本或中等樣本,多基因的QPCR 檢測;
在低樣本或中等樣本的情況下,費(fèi)用和時(shí)間遠(yuǎn)小于自行建立QPCR實(shí)驗(yàn);
使用方便,操作簡單,結(jié)果穩(wěn)定性好;
BioTNT PCR array的優(yōu)點(diǎn)是什么?
Ct值的平均差異只有0.25個(gè)循環(huán);
數(shù)據(jù)分析方便:專用軟件方便數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)與分析
從QPCR 得到實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)后,如何進(jìn)行后續(xù)的結(jié)果分析?需要配套的儀器設(shè)備嗎?
回答: 您可以用這個(gè)鏈接,
點(diǎn)擊分析工具,然后再點(diǎn)擊:分析軟件下載下載后進(jìn)行分析。不需要特殊的分析儀器。
BioTNT 的PCR array,如果自己使用,需要購買哪些配套產(chǎn)品?
PCR array 產(chǎn)品之外,您應(yīng)購買以下產(chǎn)品,對PCR array進(jìn)行配套使用:
建議使用高品質(zhì)的抽提試劑盒,推薦型號為:
如果使用其他公司的抽提試劑盒,如Trizol 法抽提試劑盒,能否使用BioTNT的PCR array 產(chǎn)品?
DNA 去除;使用PCR array 產(chǎn)品前,先進(jìn)行樣本質(zhì)量的驗(yàn)證。能夠通過樣本質(zhì)量驗(yàn)證的樣本,可以進(jìn)行PCR array實(shí)驗(yàn)。
如何進(jìn)行PCR array 實(shí)驗(yàn)前的樣本質(zhì)量驗(yàn)證?
PCR array實(shí)驗(yàn)的質(zhì)量,建議在使用前先進(jìn)行樣本質(zhì)量驗(yàn)證;
定量與質(zhì)量控制
使用無菌水(RNase-free)稀釋 RNA 樣本,檢測 260 nm 和 280 nm 吸光值,A260/280 應(yīng)大于 1.8。
使用公式A260× 40 ×稀釋倍數(shù) = XXXXμg/mL 計(jì)算 RNA 濃度。
使用瓊脂糖凝膠電泳檢測 RNA 完整性。
建議:RNA 質(zhì)量測定后,逆轉(zhuǎn)錄得到CDNA,建議用多個(gè)內(nèi)參基因自行驗(yàn)證CDNA 質(zhì)量;
biotnt 的樣本質(zhì)量驗(yàn)證引物套裝,可以在進(jìn)行QPCR 之前對樣本進(jìn)行驗(yàn)證(包含內(nèi)參引物,如human beta actin, GAPDH, 18sRNA等)
基因組DNA污染控制
Array板塊上的GDC(Genomic DNA Control)反應(yīng)孔專為檢測每個(gè)樣品進(jìn)行qPCR反應(yīng)時(shí)可能存在的基因組DNA污染而設(shè)置。如果該反應(yīng)孔的CT值小于35,則表明存在可檢測到的基因組DNA污染,應(yīng)采取措施予以解決。因此,必須從RNA樣品中去除基因組和其他全部殘余污染物。建議采用Qiagen 柱式抽提過程中加入DNAse去除基因組污染。
PCR array 之前購買BioTNT 樣本質(zhì)量驗(yàn)證引物套裝或者單獨(dú)的GDC 引物進(jìn)行基因組DNA 污染控制的質(zhì)量驗(yàn)證;驗(yàn)證結(jié)果CT 值如果小于35,則表明存在可檢測到的基因組DNA污染,應(yīng)采取措施予以解決。
如何進(jìn)行樣本的調(diào)平?
PCR array之前,對樣本需要進(jìn)行調(diào)平。具體調(diào)平方式為:
RNA 含量調(diào)平:實(shí)驗(yàn)樣本的RNA 盡量調(diào)到同一水平;加入RNA 酶free的水,調(diào)整RNA 濃度;
調(diào)平后的樣本:通過內(nèi)參引物進(jìn)行驗(yàn)證,根據(jù)CT 值,進(jìn)行二次調(diào)平。
BioTNT PCR array定制費(fèi)用如何?
BioTNT PCR array 提供您的定制,僅比預(yù)制產(chǎn)品增加了400元/板的定制費(fèi)用。您可以把您要檢測的指標(biāo)給我們,然后把您的儀器型號,以及sample 數(shù)量,重復(fù)數(shù)量提供給我們,我們?yōu)槟O(shè)置相應(yīng)的PCR array 形式,并核算相應(yīng)的費(fèi)用給您。
BioTNT PCR array的定制,方式靈活,1 plate起訂。
,點(diǎn)擊定制服務(wù)。
如果我沒有QPCR 儀器,BioTNT 能夠提供什么服務(wù)?
BioTNT PCR array service。
,點(diǎn)擊service。