你是否還在因?yàn)槭止ぶ苽鋯渭?xì)胞懸液的繁瑣操作而耗費(fèi)大量時(shí)間精力,影響實(shí)驗(yàn)進(jìn)度?
你是否還在面對(duì)批量制備單細(xì)胞懸液時(shí),細(xì)胞活率有高有低,難以保證實(shí)驗(yàn)結(jié)果的一致性而煩惱?
單細(xì)胞懸液制備儀適用于人和小鼠的各類(lèi)細(xì)胞系、原代細(xì)胞以及干細(xì)胞的培養(yǎng)等,F(xiàn)有兩種系列的單細(xì)胞制備儀可選擇應(yīng)用,分別是JX-CKSM系列和JX-DLDXB系列。
JX-CKSM系列制備儀擁有自行研發(fā)的運(yùn)動(dòng)方式和大量實(shí)驗(yàn)驗(yàn)證的優(yōu)秀程序,針對(duì)不同細(xì)胞類(lèi)型進(jìn)行程序選擇,適合臨床穿刺等少量樣本,或成批做的少量樣本;實(shí)驗(yàn)設(shè)備能夠?qū)崿F(xiàn)高效的批量處理,為單細(xì)胞制備提供強(qiáng)大助力。
JX-DLDXB系列制備儀的處理量更大,適合處理組織量大、或處理組織種類(lèi)多,需要每個(gè)通道單獨(dú)運(yùn)行的樣本;該實(shí)驗(yàn)設(shè)備的每個(gè)管道均可獨(dú)立運(yùn)行,且能輕松應(yīng)對(duì)大規(guī)模的單細(xì)胞制備任務(wù)。
針對(duì)不同的實(shí)驗(yàn),選擇適合的儀器,單細(xì)胞懸液制備儀器為科研實(shí)驗(yàn)人員提供高質(zhì)量的單細(xì)胞懸液。
單細(xì)胞懸液制備的方案:
實(shí)驗(yàn)案例:
1.組織取樣:采用頸椎脫位法處理小鼠后固定于手術(shù)臺(tái),于腹部噴灑 75%乙醇消毒,對(duì)皮膚和肌肉層進(jìn)行中線切口,取要制備的實(shí)驗(yàn)樣本,放入1XPBS溶液中,置于冰上,清洗組織表面血液。
2.預(yù)處理:將清洗后的組織,轉(zhuǎn)移到新的1XPBS溶液或1640培養(yǎng)基中,用眼科剪剪碎至1-3mm小塊(如果是腸道樣本需剪開(kāi),用1XPBS清洗內(nèi)容物,如果制備心肌細(xì)胞,需要出生不超過(guò)3天的乳鼠)。
3.加入消化酶:選擇適合后續(xù)實(shí)驗(yàn)要求的消化酶,冷水解凍,將剪碎的樣本放入消化管、加入消化酶,進(jìn)行程序選擇。
4.上機(jī)選擇程序:將消化管放入儀器后,選擇合適的程序,不同的樣本均有其對(duì)應(yīng)的程序,選擇程序后,啟動(dòng)儀器即可。(JX-CKSM系列需要預(yù)熱步驟,JX-DLDXB系列加熱套直接加熱,無(wú)需提前預(yù)熱)
5.終止消化、過(guò)濾、離心、重懸:下機(jī)后,用消化酶配套的終止液進(jìn)行終止,終止后用細(xì)胞篩進(jìn)行過(guò)濾。流式分析、單細(xì)胞測(cè)序等需要確保單獨(dú)的一個(gè)個(gè)的細(xì)胞,無(wú)細(xì)胞團(tuán),可用40um細(xì)胞篩或370-400目的紗布;原代培養(yǎng)等可用70-100um細(xì)胞篩或150-250目的紗布,在原代培養(yǎng)中有些量細(xì)胞團(tuán)是可以的。過(guò)濾后采用230g的離心力,離心7min,棄上清,保留細(xì)胞沉淀,用dPBS進(jìn)行重懸。
6.檢測(cè)細(xì)胞活率和得率
實(shí)驗(yàn)室常用的檢測(cè)細(xì)胞得率和活率的方法有三種:
1.細(xì)胞計(jì)數(shù)儀:可用臺(tái)盼藍(lán)進(jìn)行染色,用細(xì)胞計(jì)數(shù)儀檢測(cè)細(xì)胞得率和活率
2.流式分析:用死活染料進(jìn)行染色(例如PI等),上流式細(xì)胞儀分析,圈門(mén)圈出死活細(xì)胞,查看細(xì)胞活率。
3.鏡檢:顯微鏡下查看細(xì)胞的狀態(tài),也可用死活染料染色,染上顏色的是死細(xì)胞,未染上的是活細(xì)胞,以此來(lái)判斷視野中細(xì)胞的活率。
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