即用型水凝膠在成人小腸類器官的培養(yǎng)與分化中的應用
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VitroGel™是一種即用型、無外源性(Xeno-Free)的多糖水凝膠體系，可模擬天然的細胞外基質(extracellularmatrix，ECM)環(huán)境。VitroGel™使用方便操作簡單，只需與細胞培養(yǎng)基混合即可轉變?yōu)榭烧{的水凝膠基質。VitroGel™優(yōu)點眾多，應用廣泛，有效的彌補了體內外研究的鴻溝。本文主要為大家詳細介紹VitroGel™。 |
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| ☰ 工作原理 | |||||||||||||
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20分鐘快速成膠(包括10-15分鐘水凝膠穩(wěn)定時間)。
VitroGel™與細胞培養(yǎng)基中的離子(如Ga2+或Na+)相互作用，室溫穩(wěn)定15分鐘即可形成水凝膠。成膠后在水凝膠表面覆蓋一層培養(yǎng)基，可進一步促進水凝膠交聯(lián)形成較硬的水凝膠。 |
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| ☰ 產品特點 | |||||||||||||
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| ☰ VitroGel™3D培養(yǎng)的優(yōu)勢 | |||||||||||||
與其他3D培養(yǎng)方式相比VitroGel 3D集眾多優(yōu)點于一身(詳見下表)  |
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| ☰ 產品應用 | |||||||||||||
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VitroGel™有兩種類型：VitroGel 3D和VitroGel 3D-RGD；它們的使用方法及產品特點相同，不同點在于VitroGel 3D多用于懸浮細胞的培養(yǎng)，VitroGel 3D-RGD因在水凝膠中添加了整合素的配基RGD肽，因此更有利于貼壁細胞的培養(yǎng)。 VitroGel™可應用于❶3D細胞培養(yǎng)、❷體內注射、❸細胞侵襲&遷移實驗、❹細胞成球實驗、❺藥物篩選、❻干細胞培養(yǎng)、2D細胞培養(yǎng)等諸多方面，下面來詳細介紹一下。 |
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| 01/ 3D細胞培養(yǎng) | |||||||||||||
● VitroGel 3D VitroGel 3D培養(yǎng)的Betalox 5細胞優(yōu)于普通2D培養(yǎng)，更易粘附形成細胞簇或成球，細胞生存能力增強。
圖1 數據來源：The Well ● VitroGel 3D長期培養(yǎng)優(yōu)于Matrigel B35細胞在分化后第3天開始擴散并形成神經元樣網絡結構，從細胞存活、培養(yǎng)擴散和形態(tài)學分析來看，第3天在VitroGel 3D和Matrigel 3D中培養(yǎng)的B35細胞效果相當。隨著培養(yǎng)天數的增加，到第七天VitroGel 3D中培養(yǎng)的B35細胞有自組織形成3D細胞簇的傾向，此時Matrigel中培養(yǎng)的B35細胞仍為分散的網絡結構；第14天在Matrigel中培養(yǎng)的細胞存活率急劇下降，大多數細胞分離，神經突回縮， VitroGel 3D中培養(yǎng)的細胞則無此現象。到第21天，Matrigel中培養(yǎng)的絕大多數細胞消失，VitroGel 3D中培養(yǎng)的細胞簇早已嵌入到水凝膠中，雖然細胞簇間的細胞數很少，但細胞無凋亡現象。
圖2：神經元 (B35) 細胞在VitroGel 3D與Matrigel中長期培養(yǎng)的結果比較 (β- III -微管蛋白(綠色)標染細胞骨架，用DAPI(藍色)標染細胞核。) 數據來源：The Well ● VitroGel 3D-RGD 在VitroGel RGD中生長的OP9細胞更易形成細胞網絡結構。 |
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圖3：VitroGel RGD中培養(yǎng)第7天10x (左)
圖4: VitroGel RGD中培養(yǎng)第7天20x (右)
數據來源：The Well |
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| 02/ 體內注射 | |||||||||||||
● VitroGel-3D-RGD VitroGel 3D-RGD形成的軟水凝膠，無任何外源性動物成分的引入，可作為良好的細胞移植支架。 
圖5：VitroGel-3D-RGD與NPMSC(髓核間充質干細胞)混合后，注射入動物體內示意圖 VitroGel3D-RGD作為移植支架時提供的有利環(huán)境，能夠很好的維持移植細胞(NPMSC)的存活能力。移植的NPMSC均用熒光探針標記，使用活體成像技術(IVIS)檢測感興趣區(qū)域(ROI)的熒光值，以此分析移植細胞的存活率。移植第一天H-gel+cell組與單獨cell組相比無差異，移植第三十天時H-gel+cell組的存活率明顯高于cell組。
 圖6：移植第1天與第30天，細胞存活率比較
相關文獻： |
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| 03/ 體外評估細胞的遷移與生長能力 | |||||||||||||
● VitroGel 3D-RGD 相關文獻：
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| 04/ 前列腺癌細胞系成球培養(yǎng) | |||||||||||||
● VitroGel 3D-RGD 相關文獻： |
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| 05/ 細胞毒檢測實驗 | |||||||||||||
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● VitroGel 3D-RGD 相關文獻： Thanindratarn. P, et al.(2019).Establishment and Characterization of a Recurrent Osteosarcoma Cell Line: OSA 1777. Journal of Orthopaedic Research.(點擊查看詳細內容) |
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| 06/ 牙根尖乳頭干細胞(SCAP)培養(yǎng) |
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● VitroGel 3D 相關文獻： Xiao. M, et al. (2019). Synergistic effects of stromal cell-derived factor-1α and bone morphogenetic protein-2 treatment on odontogenic differentiation of human stem cells from apical papilla cultured in the VitroGel 3D system. Cell and Tissue Research, 378(2), 207–220.(點擊查看詳細內容) |
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| VitroGel™相關產品列表 | |||||||||||||
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