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啟文生物雜交瘤技術(shù)平臺(tái)的優(yōu)化策略

瀏覽次數(shù):5414 發(fā)布日期:2018-9-3  來源:本站 僅供參考,謝絕轉(zhuǎn)載,否則責(zé)任自負(fù)

雜交瘤技術(shù)仍然是單克隆抗體發(fā)現(xiàn)的主要技術(shù),尤其是在治療性抗體藥物治療領(lǐng)域,相比噬菌體、酵母等非天然文庫,具有成藥性好、特異性強(qiáng)等特點(diǎn)。由于雜交瘤獲得的單克隆抗體,系經(jīng)過哺乳動(dòng)物細(xì)胞自然進(jìn)化篩選獲得的序列,因此其通常不會(huì)遇到表達(dá)困難、產(chǎn)量低、非特異性結(jié)合等問題。

 

雜交瘤技術(shù)具有以下挑戰(zhàn):
1. 對于免疫原性低的抗原,抗體滴度低、難以產(chǎn)生中和抗體;
2. 融合效率低、難以獲得低豐度存在的克;
3. 抗體親和力低、表位分布局限。

針對以上局限性,啟文生物提出了以下優(yōu)化方案:


1. 針對低免疫原性抗原,免疫增強(qiáng)佐劑提高抗體效價(jià)

方法:我們的免疫增強(qiáng)佐劑在CFA等傳統(tǒng)佐劑的基礎(chǔ)上拓展T細(xì)胞的抗原表位識別,進(jìn)而擴(kuò)展抗體的表位

結(jié)果:多次試驗(yàn)表明,初始免疫后,效價(jià)可提高5~10倍。

2. 針對融合時(shí)陽性率較低的現(xiàn)象,陽性克隆佐劑增強(qiáng)B細(xì)胞豐度

方法:在Pre-fusion boost階段,我們的陽性克隆佐劑可以增強(qiáng)陽性克隆在B細(xì)胞中的豐度,通過提高陽性率,從而幫助融合到稀有的克隆

結(jié)果:多次試驗(yàn)表明,對于大多數(shù)抗原,改方法可以提高陽性率3~5倍。

3.專用培養(yǎng)體系提高融合效率

方法:我們提供經(jīng)馴化的小鼠SP2/0細(xì)胞和雜交瘤細(xì)胞專用培養(yǎng)血清。對于結(jié)合先進(jìn)的電融合技術(shù)來說,我們自產(chǎn)的電融合緩沖液的實(shí)驗(yàn)效果和進(jìn)口產(chǎn)品相當(dāng)。

結(jié)果:根據(jù)客戶反饋,融合效率最高可達(dá)1 : 1000,通?梢宰龅1 : 4000以上。如果結(jié)合融合處理液一起使用,可以進(jìn)一步提高融合效率(融合效率提升3~5倍)。

4.  雜交瘤細(xì)胞增強(qiáng)培養(yǎng)基提高克隆生長率

方法:在雜交瘤細(xì)胞電融合之后的克隆篩選和生長階段,我們提供雜交瘤細(xì)胞增強(qiáng)培養(yǎng)基。該培養(yǎng)基含有多種促進(jìn)雜交瘤細(xì)胞生長的細(xì)胞因子。

結(jié)果:可以提高克隆生長率近10倍。

 

對于聚乙二醇法和電融合法來說,我們的大多數(shù)試劑都是通用的。具體種類如下表所示:

雜交瘤相關(guān)試劑

 

相關(guān)試劑圖片:

雜交瘤相關(guān)試劑

來源:上海啟文生物科技有限公司
聯(lián)系電話:021-31300851
E-mail:info@qiwenbio.com

標(biāo)簽: 雜交瘤專用
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