Hey小伙伴們,今天我們來(lái)聊聊細(xì)胞碎片的那些事兒,快拿起小本本記好啦!
細(xì)胞碎片長(zhǎng)什么樣,如何和污染區(qū)分?
細(xì)胞經(jīng)過(guò)運(yùn)輸后,部分細(xì)胞皺縮、脫落比較明顯,脫落的細(xì)胞部分殘骸就會(huì)保留在原地,高倍鏡下觀察就比較臟,脫落的細(xì)胞同時(shí)會(huì)產(chǎn)生凋亡小體附著在貼壁細(xì)胞表面和液體里。高倍鏡下觀察細(xì)胞碎片、分泌物就尤其多,形成大小不一的黑色圓點(diǎn),或不規(guī)則形狀,在原地震動(dòng),布朗運(yùn)動(dòng)等情況。
那這個(gè)時(shí)候有人就來(lái)質(zhì)疑,細(xì)胞是不是污染了,細(xì)胞狀態(tài)差需要怎么調(diào)整呢?
污染
1、當(dāng)你懷疑你的細(xì)胞到貨就污染時(shí),你可以使用一個(gè)6孔板取2ml或小培養(yǎng)瓶T12.5添加4ml,T25瓶添加5ml,取細(xì)胞培養(yǎng)液進(jìn)行空培養(yǎng)2-4天。
2、當(dāng)培養(yǎng)基變渾濁、快速游動(dòng),快速轉(zhuǎn)圈或相對(duì)液體靜止、圓球狀或桿狀,形態(tài)非常規(guī)則、黑色點(diǎn)狀分布均勻等情況時(shí),是污染。
碎片
3、同理如果黑點(diǎn)不增值,大小不均勻,高倍鏡下原地震動(dòng),那不用擔(dān)心,這是細(xì)胞碎片,只要培養(yǎng)基營(yíng)養(yǎng)足夠,傳代1-2次后碎片會(huì)減少很多。
碎片是怎么產(chǎn)生的呢?
1.細(xì)胞懸浮液處理不當(dāng):就像我們搖晃飲料一樣,如果太用力,泡沫和沉淀物就會(huì)增多。細(xì)胞懸浮液也是,如果抖動(dòng)或振蕩得太猛,細(xì)胞就會(huì)“暈頭轉(zhuǎn)向”,一不小心就變成碎片了。
2.細(xì)胞密度過(guò)高:想象一下,如果一個(gè)房間里擠滿了人,大家擠來(lái)擠去,摩擦自然就多了。細(xì)胞也是這樣,密度太高,細(xì)胞間的“摩擦力”就會(huì)增加,碎片也就隨之而來(lái)。
3.細(xì)胞本身就是碎片化的:有時(shí)候,細(xì)胞就像我們一樣,如果生病了或者沒(méi)活力了,就會(huì)慢慢衰弱,最終“離世”。細(xì)胞也是一樣,一旦失去活力,就會(huì)自然死亡,變成碎片。
4.受到運(yùn)輸環(huán)境影響:細(xì)胞在運(yùn)輸過(guò)程中,就像是我們坐長(zhǎng)途飛機(jī),難免會(huì)感到不適。細(xì)胞也會(huì)發(fā)生應(yīng)激反應(yīng),分泌活動(dòng)增加,導(dǎo)致分泌蛋白增多。同時(shí),路途中凋亡的細(xì)胞碎裂后,也會(huì)增加細(xì)胞碎片。
以上就是細(xì)胞碎片可能的幾種原因啦,希望對(duì)你們有所幫助!在實(shí)驗(yàn)中遇到細(xì)胞碎片問(wèn)題時(shí),記得檢查一下這些可能的原因哦~
如果你們有其他問(wèn)題或者經(jīng)驗(yàn)分享,也歡迎在評(píng)論區(qū)交流哦!
遇到細(xì)胞碎片不要驚慌!教你讓細(xì)胞慢慢恢復(fù)
1.PBS洗滌法:就像給細(xì)胞洗澡一樣,用PBS輕輕拍打培養(yǎng)瓶,讓那些貼壁不牢的碎片和顆粒脫落,然后把它們沖走。這個(gè)方法簡(jiǎn)單又溫和,不會(huì)傷害到我們的細(xì)胞寶寶哦!
2.消化+離心大法:消化細(xì)胞后,用低速離心,比如900-1000rpm,3分鐘,然后棄去上清液,把細(xì)胞碎片甩掉。但要注意,這個(gè)方法可能會(huì)讓一些細(xì)胞寶寶受傷,所以要溫柔一點(diǎn),別太粗暴哦!
3.控制胰酶消化時(shí)間:在處理細(xì)胞碎片時(shí),記得控制胰酶消化時(shí)間,別吹打得太猛,這樣可以減少細(xì)胞碎片的產(chǎn)生,保護(hù)細(xì)胞寶寶。
4.避免過(guò)度攪拌:在培養(yǎng)過(guò)程中,要避免攪拌過(guò)度,特別是在離心和重懸時(shí),這樣可以減少細(xì)胞碎片的產(chǎn)生,讓細(xì)胞寶寶更安全。
5.控制細(xì)胞密度和培養(yǎng)時(shí)間:高密度和長(zhǎng)時(shí)間的培養(yǎng)可能會(huì)導(dǎo)致細(xì)胞自發(fā)破裂,所以適當(dāng)控制細(xì)胞密度和培養(yǎng)時(shí)間,可以讓細(xì)胞寶寶更健康。
6.選擇合適的培養(yǎng)基和條件:不同的細(xì)胞寶寶需要不同的家,所以要選擇合適的培養(yǎng)基和條件,這樣可以減少細(xì)胞碎片的產(chǎn)生,讓細(xì)胞寶寶更舒適。