HK-2細胞屬源于正常腎的近曲小管細胞，通過導(dǎo)入HPV-16 E6/E7基因而獲得永生化。將含有HPV-16 E6/E7基因的重組的逆轉(zhuǎn)錄病毒載體pLXSN 16 E6/E7轉(zhuǎn)染外生包裝細胞Psi-2；Psi-2細胞產(chǎn)生的病毒再去感染兼嗜性包裝細胞系PA317，最后將PA317細胞產(chǎn)生的病毒顆粒導(dǎo)入正常的腎皮質(zhì)近曲小管細胞。盡管pLXSN 16 E6/E7中含有新霉素抗性，但未用G418篩選轉(zhuǎn)導(dǎo)克隆。Southern和FISH分析顯示，HK-2細胞來源于單克隆。PCR檢測證實，HK-2細胞基因組中含有E6/E7基因。

細胞名稱：人腎皮質(zhì)近曲小管上皮細胞(STR鑒定正確)

細胞簡稱：HK-2

產(chǎn)品貨號：TCH-C400

種屬來源：人

組織來源：腎

細胞形態(tài)：上皮細胞樣

生長特性：貼壁生長

培養(yǎng)體系：MEM＋10% FBS＋1% P/S

配套培養(yǎng)基貨號：TCH-G400

傳代比例：1:3-1:4，每2-3天換液一次

傳代周期：24-48 h

培養(yǎng)條件：氣相：95%空氣+5%CO2，溫度：37℃

凍存條件：60%基礎(chǔ)培養(yǎng)基+30%FBS+10%DMSO，液氮儲存

質(zhì)量檢測：細菌、真菌、支原體檢測均為陰性

 

1. 出現(xiàn)空泡
空泡問題需要結(jié)合⽣⻓速度和形態(tài)來看：如果⽣⻓速度和形態(tài)正常，空泡可能是正常的細胞活動，傳代后空泡即可減輕。
如果⽣⻓較慢，形態(tài)異常，空泡可能是⾃噬⾏為，可加⼤⾎清⽐例（不超過20%）或更換⾎清品牌改善細胞狀態(tài)。

2. 出現(xiàn)拉絲
細胞伸出細⻓的絲有兩種情況：
第⼀種：細胞遷移造成的，細胞在培養(yǎng)⽫上并不是靜態(tài)的，也會出現(xiàn)遷移。遷移時細胞的⼀部分滯留在原處，遷移的過程中會拉出⼀條細⻓的絲。這種情況下拉絲的細胞占少數(shù)，細胞整體的⽣⻓狀態(tài)是正常的，不⽤特殊處理。
第⼆種：細胞營養(yǎng)不良，拉絲的細胞占⼤多數(shù)，同時細胞⽣⻓緩慢，此時可以提⾼⾎清⽐例（不超過20%）或添加5 ng/mL EGF。

3. 形態(tài)不對
正常的HK-2呈鋪路⽯狀⽣⻓，如果細胞呈鐮⼑狀或不規(guī)則狀，可能是因為培養(yǎng)環(huán)境發(fā)⽣了較⼤的改變，⽐如從有⾎清到⽆⾎清的轉(zhuǎn)換，此時換回原來的培養(yǎng)條件細胞可逐漸恢復(fù)；如果細胞變得細⻓，這時候可能是營養(yǎng)不良。

4. ⽣⻓緩慢
在標準培養(yǎng)條件（MEM+10%FBS+1%PS），以及1：3傳代條件下，HK-2的傳代周期約為3天；
當細胞⽣⻓緩慢，⼀周⽆法傳代時，需要考慮培養(yǎng)基特別是⾎清是否合適；選擇合適的培養(yǎng)基及⾎清，同時加⼤細胞接種密度可以改善；
⾎清質(zhì)量差異可能引起細胞狀態(tài)變化，建議選⽤⾼質(zhì)量的胎⽜⾎清。