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PCR引物和測序引物不同方面歸納

瀏覽次數(shù):77 發(fā)布日期:2024-10-17  來源:本站 僅供參考,謝絕轉(zhuǎn)載,否則責(zé)任自負(fù)
一、定義不同:

PCR是體外酶促合成特異DNA片段的一種方法,由高溫變性、低溫退火(復(fù)性)及適溫延伸等反應(yīng)組成一個(gè)周期,循環(huán)進(jìn)行,使目的DNA得以迅速擴(kuò)增, 具有特異性強(qiáng)、靈敏度高、操作簡便、省時(shí)等特點(diǎn)。PCR引物是一段非常短的寡核苷酸序列,它能和靶DNA也就是模板DNA 3'端和5'端特異性結(jié)合。在PCR時(shí),在每一次熱變性之后,引物會和模板DNA特異性的結(jié)合在一起,然后DNA聚合酶就會從引物結(jié)合位置的3'末端開始進(jìn)行DNA鏈的延伸。一句話總結(jié),引物有點(diǎn)像一個(gè)向?qū),為DNA聚合酶提供結(jié)合位點(diǎn)的指引標(biāo)識。

測序引物分自帶引物和通用引物,自帶引物為客戶自行設(shè)計(jì)的PCR擴(kuò)增引物或者載體及目的片段上設(shè)計(jì)的引物進(jìn)行測序。

二、作用不同:

通用引物一般在購買載體時(shí)公司提供,一般測序引物如T7、SP6、M13等測序公司免費(fèi)使用。

不僅可用于基因分離、克隆和核酸序列分析等基礎(chǔ)研究,還可用于疾病的診斷或任何有DNA,RNA的地方。PCR又稱無細(xì)胞分子克隆或特異性DNA序列體外引物定向酶促擴(kuò)增技術(shù)。

三、適用不同:

PCR引物又稱為寡核苷酸引物,也就是RNA,是由人工合成的,分為兩種,引物1和引物2。由于DNA聚合酶只能從核苷酸鏈的5'端到3'端進(jìn)行復(fù)制,也就是只能識別3'的尾端。

測序必須為特異性引物,不能為隨機(jī)、兼并、不純、帶熒光標(biāo)記、長度過長引物.測序引物長度一般要求在18-25BP,最長不超過30BP..PCR引物要求相對低一些.簡單說來就是PCR引物可以用來擴(kuò)增但是不一定適合測序。


 
來源:上海博湖生物科技有限公司銷售部
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