免疫系統(tǒng)調(diào)節(jié)人體的各種生理過(guò)程。因此,提高機(jī)體免疫力,增強(qiáng)免疫功能,對(duì)于預(yù)防疾病的發(fā)生,恢復(fù)健康至關(guān)重要;罨木奘杉(xì)胞可直接或間接參與免疫系統(tǒng)的免疫反應(yīng),通過(guò)吞噬作用清除抗原異物、衰老細(xì)胞和細(xì)胞碎片,進(jìn)而分泌活性氧、活性氮和促炎因子。
巨噬細(xì)胞(Macrophages)屬免疫細(xì)胞,有多種功能,是研究細(xì)胞吞噬、細(xì)胞免疫和分子免疫學(xué)的重要對(duì)象。小鼠巨噬細(xì)胞樣細(xì)胞系RAW264.7是醫(yī)學(xué)研究中最常用的小鼠巨噬細(xì)胞細(xì)胞系,RAW264.7細(xì)胞株是約30年前從生長(zhǎng)在BAB/14小鼠體內(nèi)的腫瘤中獲得的,這是一種BALB/c IgH同源株,接種了Abelson小鼠白血病病毒(MuLV)。
巨噬細(xì)胞的形態(tài)會(huì)隨著細(xì)胞活性、功能、環(huán)境和藥物的改變而改變。例如,相關(guān)研究顯示一種低分子量肽(NJP)處理引起RAW264.7細(xì)胞形態(tài)學(xué)改變,胞體增大呈圓形和不規(guī)則形狀,偽足擴(kuò)張,而正常對(duì)照組巨噬細(xì)胞呈圓形,形態(tài)正常。很多實(shí)驗(yàn)者發(fā)現(xiàn)在RAW264.7細(xì)胞正常培養(yǎng)中,細(xì)胞也會(huì)出現(xiàn)多邊形和不規(guī)則形狀,并伴有許多偽足的生成,細(xì)胞貼壁能力超強(qiáng)。
據(jù)了解,實(shí)驗(yàn)者甚至用0.25%的胰酶消化30min,結(jié)果細(xì)胞仍“無(wú)動(dòng)于衷”。
經(jīng)過(guò)本公司技術(shù)員不斷探究,
總結(jié)出了關(guān)于RAW264.7細(xì)胞培養(yǎng)的若干注意事項(xiàng),
希望可以幫到大家。
培養(yǎng)注意事項(xiàng)
1. 該細(xì)胞傳代時(shí)不需要用胰酶消化。傳代時(shí),吸走部分培養(yǎng)液,留下少許培養(yǎng)液(如T25培養(yǎng)瓶留下7-8ml),用無(wú)菌細(xì)胞刮刮拭培養(yǎng)表面將細(xì)胞刮落,吹打后接種到新的裝有新鮮培養(yǎng)液的培養(yǎng)瓶?jī)?nèi)。
2. 該株巨噬細(xì)胞形態(tài)上包含松散貼壁的紡錘形和圓形或者立方形的細(xì)胞。當(dāng)細(xì)胞密度較大時(shí),細(xì)胞會(huì)輕微脫落變圓或者許多細(xì)胞堆在一起,有些細(xì)胞甚至脫落漂浮,這些漂浮的細(xì)胞是存活的,在傳代時(shí)應(yīng)收集起來(lái)離心,細(xì)胞沉淀可以繼續(xù)培養(yǎng)。
3. 血清質(zhì)量差異可能引起細(xì)胞貼壁能力變化,應(yīng)選用高質(zhì)量的胎牛血清。
4. 培養(yǎng)條件、運(yùn)輸、環(huán)境變化等因素會(huì)影響此細(xì)胞的狀態(tài),因此收到細(xì)胞后需要調(diào)整一段時(shí)間,請(qǐng)耐心培養(yǎng)。
5. 強(qiáng)烈推薦使用本公司對(duì)應(yīng)的培養(yǎng)基,減少細(xì)胞培養(yǎng)過(guò)程的變因。
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Raw264.7細(xì)胞專用培養(yǎng)基成分包含基礎(chǔ)培養(yǎng)基、血清、雙抗等細(xì)胞生長(zhǎng)需要的其他添加物。
由中喬新舟技術(shù)團(tuán)隊(duì)精心優(yōu)化,經(jīng)過(guò)長(zhǎng)期測(cè)試,可保持細(xì)胞良好的生長(zhǎng)狀態(tài)。
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該培養(yǎng)基包括促進(jìn)RAW264.7細(xì)胞向破骨方向分化的基礎(chǔ)培養(yǎng)基,優(yōu)質(zhì)胎牛血清,細(xì)胞因子以及青鏈霉素。