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磁微;瘜W發(fā)光免疫檢測技術的原理及應用

瀏覽次數(shù):1087 發(fā)布日期:2024-6-3  來源:本站 僅供參考,謝絕轉(zhuǎn)載,否則責任自負
磁微粒是指磁性納米粒子與無機或有機分子結合形成的可均勻分散于一定基液中具有高度穩(wěn)定性的膠態(tài)復合材料。在磁微粒表面或通過磁微粒表面的功能基團將酶、抗體、寡核苷酸等生物活性物質(zhì)進行固定,可進一步用于酶的固定化、靶向藥物載體、細胞分選、免疫檢測、蛋白與核酸的分離純化及雜交檢測等領域。 

磁微粒化學發(fā)光免疫檢測是將磁性分離技術、化學發(fā)光技術、免疫分析技術三者結合起來的一種新興分析方法,該技術充分利用了磁性分離技術的快速易自動化性,化學發(fā)光技術的高靈敏度性,以及免疫分析的特異性,在生物分析領域展現(xiàn)了不可替代的作用。目前,磁微;瘜W分析免疫分析已經(jīng)應用于管式化學發(fā)光免疫檢測項目以及電化學發(fā)光免疫檢測項目。 傳統(tǒng)的免疫學檢測中以酶標板為固相載體。而懸浮性磁微粒作為載體具有較高的比表面積,能夠更為充分地與樣品反應,加之外加磁場的靈活應用,具有更高的靈敏度、更快的檢測速度和更好的重復性等優(yōu)點。

 根據(jù)免疫標記物也即發(fā)光原理的不同,化學發(fā)光分析種類大致分為以下三類: 

一、直接化學發(fā)光采用吖啶酯、異魯米諾衍生物ABEI等作為示蹤物質(zhì)標記抗原或抗體分子形成發(fā)光標記物,采用納米微球為固相載體的分離方式,通過堿性液誘導結合標記物發(fā)光,并通過測定發(fā)光強度實現(xiàn)對超微量物質(zhì)的定量分析。吖碇酯在不需要催化劑的情況下即可分解、發(fā)光。
主要優(yōu)點:試劑穩(wěn)定性好,易于保存;標記物為小分子,對標記的抗原/抗體的空間位點幾乎不造成影響;本底低,靈敏度好,結果穩(wěn)定。

二、間接化學發(fā)光(酶促化學發(fā)光)用參與催化某一化學發(fā)光反應的酶如辣根過氧化物酶(HRP)或堿性磷酸酶(ALP)來標記抗原或抗體,在與待測標本中相應的抗原(或抗體)發(fā)生免疫反應后,形成固相包被抗體-待測抗原-酶標記抗體復合物,經(jīng)洗滌后,加入底物(也就是發(fā)光劑),酶催化和分解底物發(fā)光。  
主要優(yōu)點:發(fā)光過程中作為標記物的酶基本不被消耗,發(fā)光信號強而穩(wěn)定,且發(fā)光時間較長;檢測方式簡單、成本較低。 

三、電化學發(fā)光(羅氏專利)以電化學發(fā)光劑三聯(lián)砒錠釕標記抗體(或抗原),以三丙胺(TPA)為電子供體,在電場中因電子轉(zhuǎn)移而發(fā)生特異性化學發(fā)光反應,它包括電化學和化學發(fā)光兩個過程。 
主要優(yōu)點:可控的反應體系,快速檢測時間,高精密度,高靈敏度,寬廣的檢測范圍;
用于化學發(fā)光免疫的磁性微球目前用于化學發(fā)光的磁微粒種類較多,但都有一些基本的要求,包括磁響應快、單分散、粒徑均勻、懸浮度高、非特異性吸附低、批間穩(wěn)定等。目前最常用的為磁性聚苯乙烯(PS)微球。在全球市場上,磁微;瘜W發(fā)光試劑主要為跨國公司壟斷,其中ThermoFisher(Dynabeads)、JSR、Merk、GE等的磁性微球占有較大市場份額。近年來,國內(nèi)亦涌現(xiàn)出一些磁性微球較為出色的公司。羧基、氨基和鏈霉親和素磁珠是其中最常選用的表面功能化磁珠。



上海領駿生物科技有限公司成立于2016年,位于上海市青浦區(qū)張江云立方園區(qū)。公司長期致力于生物領域內(nèi)相關產(chǎn)品的研發(fā)、生產(chǎn)和銷售,產(chǎn)品主要包括磁性納米材料和磁珠法核酸提取純化試劑。公司一直堅持以“質(zhì)量、誠信、團結、奮進”為宗旨,嚴格規(guī)范質(zhì)量管理體系,持續(xù)創(chuàng)新、精益求精,為客戶提供優(yōu)質(zhì)的產(chǎn)品和服務,被認定為國家級高新技術企業(yè)和上海市專精特新企業(yè)。
 
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